徐志胜
- 作品数：44 被引量：125H指数：7
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省杰出青年基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4调控芹菜不同组织的着色被引量：4
- 2021年
- 【目的】研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4在不同颜色芹菜中的基因型及相对表达量,结合类胡萝卜素含量测定,分析AgCCD4对芹菜组织中类胡萝卜素积累的影响,为进一步研究CCD亚家族基因在不同颜色芹菜组织着色中的作用奠定基础。【方法】采用同源比对法检索芹菜基因组中的CCD家族基因AgCCD4。从‘津南实芹’‘黄太极’‘紫杆一号’和‘赛雪’4种不同颜色芹菜中分别克隆获得芹菜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4。对芹菜AgCCD4的蛋白氨基酸序列组成、蛋白质理化性质、亲缘关系、空间结构等进行分析,预测其保守结构域和二级结构以及建立三级结构模型。采用荧光定量PCR技术检测AgCCD4在不同颜色芹菜不同组织中的表达水平。采用超高效液相色谱(UPLC)对4种颜色芹菜的叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定。采用农杆菌介导的瞬时表达转化法,研究AgCCD4蛋白在烟草表皮细胞中的亚细胞定位。【结果】序列分析结果表明AgCCD4包含1个长度为1779 bp的开放阅读框(ORF),编码592个氨基酸。‘赛雪’中AgCCD4的核苷酸序列与其他品种相比存在18个碱基和9个氨基酸位点的差异,蛋白质相对分子质量分别为65.07 kD和65.12 kD,等电点分别为6.03和5.95。进化树分析表明,芹菜AgCCD4与菊科的向日葵和莴苣CCD4进化关系较近。AgCCD4蛋白的二级结构中包含多个α-螺旋和无规则卷曲,三级结构主要以β-折叠为主。亚细胞定位分析表明AgCCD4是一个定位在叶绿体上的蛋白。对4种颜色芹菜叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定,结果显示芹菜根中均未检测到叶黄素和β-胡萝卜素,叶片中叶黄素和β-胡萝卜素含量均以‘津南实芹’最高,分别为1102.58μg·g^(-1) DW和241.92μg·g^(-1)DW,‘紫杆一号’最低,分别为57.12μg·g^(-1) DW和45.65μg·g^(-1) DW。在叶柄中,仅在�
- 王昊尹莲刘洁霞贾丽丽丁旭沈迪冯凯徐志胜熊爱生
- 关键词：芹菜亚细胞定位基因表达类胡萝卜素
- 胡萝卜光合特性昼夜节律及生物钟基因DcRVEa和DcRVEb响应光周期分析
- 2023年
- 为了解胡萝卜生物钟相关基因REVEILLEs (RVEs)在昼夜节律中的分子调控机制,从胡萝卜基因组中检索获得DcRVEa和DcRVEb基因。对两个光周期不同时间点胡萝卜叶片进行光合参数测定,利用实时荧光定量PCR技术对DcRVEa和DcRVEb基因表达量进行检测与分析。结果显示:DcRVEa和DcRVEb分别含有304和307个氨基酸,均为亲水性蛋白;二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。胡萝卜RVE蛋白序列与其他物种同源性序列相似度为66.69%;DcRVEa与莲(Nelumbo nucifera)进化关系较近, DcRVEb与橡胶树(Hevea brasiliensis)进化关系较近。蛋白互作网络分析结果显示,胡萝卜DcRVEa和DcRVEb与LNK1、LNK2、CCA1、TOC1等生物钟核心元件具有较直接的作用。在两个光周期(48 h)中,胡萝卜叶片净光合速率(P_(n))、气孔导度(G_(s))和蒸腾速率(T_(r))在白天处于较高水平,胞间CO_(2)浓度(Ci)则相反。实时荧光定量PCR结果显示,在两个光周期(48 h)中, DcRVEa和DcRVEb的相对表达量均在黑暗条件下达到峰值。DcRVEa和DcRVEb的表达趋势相似,均响应昼夜节律的变化。本文研究结果为进一步研究胡萝卜生物钟基因DcRVEa和DcRVEb的分子机制提供参考。
- 张楠胡志航周建华刘慧王雅慧张雨晴王荟茹徐志胜熊爱生
- 关键词：胡萝卜生物钟光合特性
- 芹菜热激转录因子基因AgHSFB2的克隆及不同温度处理下的表达响应被引量：8
- 2015年
- [目的]热激转录因子HSF(heat shock transcription factor)在植物遭遇高温胁迫时起关键的调节作用,研究芹菜热激转录因子基因及相关蛋白的结构、功能对探究芹菜耐热机制、培育耐热新品种有重要作用。[方法]以‘六合黄心芹’‘津南实芹’和美国西芹‘文图拉’为试验材料,分离并克隆出Ag HSFB2基因,分析相关序列并采用实时定量荧光PCR技术检测该基因在不同温度(4、38和42℃)下的表达响应情况。[结果]研究发现该基因含有1个918 bp的开放阅读框,编码305个氨基酸。推测其蛋白质相对分子质量为34 048,理论等电点p I值为5.09。芹菜Ag HSFB2与拟南芥中HSF蛋白进行比对构建进化树,发现Ag HSFB2与拟南芥HSFB2a和HSFB2b进化距离最近,该基因属于HSFB2亚族。芹菜Ag HSFB2与茄科的番茄、马铃薯相应蛋白的亲缘关系较近。Ag HSFB2蛋白的高级结构主要由3个α螺旋和4个β折叠组成。Ag HSFB2基因主要在芹菜的叶中表达,具有组织、品种特异性,同时对4、38和42℃等多种温度信号有明显响应。该基因对温度胁迫的响应时间和强度有品种的差异:4和38℃处理下‘文图拉’均在2 h有明显上调表达;42℃处理下‘津南实芹’和‘文图拉’均在1 h有明显上调表达。[结论]高温胁迫下Ag HSFB2基因可诱导下游热激蛋白大量表达,帮助植物抵御高温胁迫所带来的伤害。
- 李岩徐志胜谭国飞贾晓玲王枫熊爱生
- 关键词：芹菜克隆温度处理
- 葡萄VvUGT72B1基因和杨树PtUGT72B1基因的合成与功能鉴定
- 一些酚类化合物(PhenolicCompounds，PCs)及3，4-二氯苯胺(Dichloroaniline，DCA)对生物体具有致癌性、致畸性和致突变性。这些物质中许多是农药、防腐剂、消毒剂和偶氮染料等合成和代谢的中...
- 徐志胜
- 关键词：葡萄杨树异源表达植物修复
- 文献传递
- 胡萝卜WRKY69基因(DcWRKY69)的克隆及其对不同植物生长调节剂的响应被引量：1
- 2019年
- 以胡萝卜品种‘黑田五寸’(Daucus carota var.sativa‘Heitian Wucun’)为研究对象,采用RT-PCR技术从叶片cDNA中克隆获得DcWRKY69基因片段,并对该基因及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析;同时,采用RT-qPCR技术比较了0.1 mmol·L^-1茉莉酸甲酯(MeJA)、1.0 mmol·L^-1水杨酸(SA)、0.1 mmol·L^-1赤霉素(GA3)和0.1 mmol·L^-1脱落酸(ABA)处理12 h内叶中DcWRKY69基因相对表达量的差异。结果表明:DcWRKY69基因包含1个长度为783 bp的开放阅读框(ORF),编码260个氨基酸;DcWRKY69转录因子氨基酸序列在第52至第110位含有1个WRKY结构域,其锌指结构类型为C2 H2型,理论相对分子质量为30030,理论等电点为pI 4.78;该转录因子含有34个磷酸化位点,无信号肽和跨膜结构,亲水性氨基酸较多,且酸性氨基酸比例最高(27%);该转录因子的二级结构由α-螺旋、β-折叠、延伸链和随机卷曲组成,比例分别为21.92%、4.23%、11.92%和61.92%。序列比对和系统进化树分析结果表明:WRKY转录因子在植物进化过程中具有高度的保守性。RT-qPCR分析结果表明:经MeJA、SA、GA3和ABA处理后,DcWRKY69基因相对表达量的变化趋势不同,分别在处理后8、12、1和4 h达到峰值,且显著高于对照(处理0 h)。研究结果显示:DcWRKY69转录因子属于Ⅱ类WRKY转录因子,为亲水性蛋白,且可能属于非分泌蛋白;DcWRKY69基因可能参与胡萝卜对不同植物生长调节剂的响应过程,但其对不同植物生长调节剂的响应模式存在差异。
- 张榕蓉王雅慧李彤丁旭徐志胜熊爱生
- 关键词：胡萝卜基因克隆植物生长调节剂
- 胡萝卜低温胁迫转录因子DcICE1基因克隆与非生物逆境响应分析被引量：7
- 2015年
- 植物ICE1基因是调控CBF基因表达的上游调控因子,在植物抵抗逆境胁迫中具有重要的作用。该实验以2个胡萝卜品种‘黑田五寸’和‘君川红’为实验材料,分别克隆出DcICE1转录因子基因,并通过荧光定量PCR方法测定了4种不同逆境胁迫下(4℃低温、38℃高温、0.2mol·L-1 NaCl及200g·L-1 PEG)DcICE1基因的表达情况,探讨DcICE1转录因子在植物抵抗非生物胁迫下的功能。序列分析显示,该基因全长1 458bp,编码485个氨基酸。2个胡萝卜品种的DcICE1基因在核苷酸水平上有2个位点的差异,分别为第139位的G/A和第475位的A/G,导致编码的氨基酸在第47位的E/K和第159位的N/D差异,该差异可能与DcICE1转录因子在2个不同品种应对逆境胁迫下的响应不同有关。胡萝卜DcICE1转录因子有一个保守的ICE1功能结构域。实时定量PCR检测DcICE1基因在不同逆境胁迫下的响应表明,低温(4℃)处理能明显地诱导DcICE1基因的表达,但盐(0.2mol·L-1 NaCl)和干旱(200g·L-1 PEG)处理下的诱导效果均不明显。
- 黄莹徐志胜王枫李梦瑶马静熊爱生
- 关键词：胡萝卜基因克隆非生物胁迫
- 一种与芹菜非生物胁迫相关的转录因子AgbZIP16基因序列及其应用
- bZIP转录因子家族属于转录因子家族中数目庞大的一种，并且十分保守，参与植物生长发育、代谢调节以及生物和非生物胁迫响应。本专利从两个芹菜品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’中克隆了一个新的bZIP类转录因子基因AgbZIP16...
- 熊爱生沈迪徐志胜刘洁霞
- 文献传递
- 植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列如SEQ ID No .2所示的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸...
- 徐志胜张凯熊爱生王璐
- 一种与芹菜非生物胁迫响应相关的AgHAT4基因序列及其应用
- HD‑Zip是高等植物特有的一类转录因子，在植物应对环境胁迫中起着重要的调节作用，HAT4是该转录因子家族中的一员。本专利从芹菜中克隆得到AgHAT4基因。该基因开放阅读框长为900bp，编码299个氨基酸。AgHAT4...
- 熊爱生尹莲徐志胜冯凯刘洁霞
- 一种适合芹菜贮藏环境条件的筛选方法
- 叶菜类蔬菜是我国种植面积最广的一类蔬菜，由于其叶片面积大、组织脆嫩等生理特点，在贮藏加工环节保鲜困难。芹菜(Apium graveolens L.)是全世界最重要的叶菜类蔬菜作物之一，因其丰富的营养物质和药用价值，在世界...
- 熊爱生朱胜琪徐志胜
