成小文
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:湖南农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种构建载体的新方法:一步式混合胶回收连接法
- 2015年
- 以构建原核表达载体重组质粒G4FPAGB1为例,介绍了一种新的载体构建方法。棉铃虫单核衣壳核多角体病毒G4毒株基因组上的Ha–FP–A片段用Hin dⅢ和Eco RⅤ双酶切,Ha–FP–B片段用XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切,绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因片段用Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切,载体质粒p Bluescript SK(+)用Hin dⅢ和Bam HⅠ双酶切。酶切产物经电泳检测后,将所有含目的片段的胶块切下,放在同一个离心管中进行DNA回收,得到的混合DNA产物直接加入连接酶进行连接、转化。结果表明,3个目的片段均成功连接到载体质粒上。本方法可高效、简单地构建包含多个目的片段的重组质粒。
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- 关键词:克隆方法
- 一种降低棉铃虫单包埋衣壳核型多角体病毒G4毒株突变率病毒的构建方法
- 一种降低棉铃虫单包埋衣壳核型多角体病毒G4毒株突变率病毒的构建方法,该方法是以fp25k基因未发生突变的野生型HaSNPV G4毒株的病毒粒子为实验材料;通过构建含fp25k基因的质粒,进行两次定点沉默突变;再通过构建含...
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- 文献传递
- 包囊病毒的诊断、鉴定及其世界分布(英文)
- 2011年
- 专性的昆虫包囊病毒ascoviruses包含一个大小为119-186kbp的环状DNA基因组。因包囊病毒感染昆虫无明显的可辨别症状,它们最近才被发现。广谱性化学农药的广泛应用降低了寄生蜂的自然种群,导致在野外依靠寄生蜂传播的包囊病毒在自然环境中尤为罕见。包囊病毒最初于20世纪80年代末在美国东南部和西部沿岸从夜蛾幼虫体内被发现。然而,在20世纪70年代,类包囊病毒颗粒ascovirus-like particles已被报道于火蚁(膜翅目)和苜蓿叶象甲(鞘翅目)体内;此外,在法国南部的美双缘姬蜂Diadromus pulchellus幼虫体内亦发现包囊病毒。这些数据表明,包囊病毒可能存在于鳞翅目,膜翅目和鞘翅目等不同目的昆虫体内;同时包囊病毒已报道于澳大利亚、印度尼西亚、法国、美国等国家,表明其分布是全球性的。有趣的是,在中国、印度、非洲等广大区域内没有包囊病毒记载。为确认其世界性的地理分布、与昆虫的协同进化,以及明确其在农业和自然环境中的生态意义,需要进一步努力从中国、印度、非洲大陆等国家和地区发现更多的包囊病毒。
- 成小文黄国华
- 一种将多个DNA片段同时连接至同一载体上的方法
- 一种将多个DNA片段同时连接至同一载体上的方法,是依托Glass milk的DNA胶回收方法,将几个待连接的DNA片段PCR产物以及载体片段从凝胶上一同洗脱并回收,然后加入DNA连接酶与连接缓冲液,4℃连接过夜,将连接产...
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- 文献传递