提金凤
- 作品数：33 被引量：46H指数：5
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家水禽产业技术体系建设项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不同日龄雏鸭感染鸭坦布苏病毒后血清中免疫球蛋白及细胞因子的动态变化被引量：1
- 2016年
- 为研究雏鸭感染鸭坦布苏病毒(DTMUV)后血清中相关免疫指标的动态变化及其在不同日龄雏鸭中的差异性,本实验分别对5日龄、10日龄、25日龄雏鸭静脉接种DTMUV,并于接种后不同时间对雏鸭血清中的免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig M及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ进行检测。结果显示,不同日龄雏鸭接种DTMUV后,血清中3种免疫球蛋白含量均显著高于对照组(p<0.05),表明体液免疫在抗DTMUV的感染中发挥了主要作用。5日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ含量均较低;10日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IL-6水平均不同程度升高,但IFN-γ含量仍低于对照组;25日龄雏鸭血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量在接种后一周内均显著高于对照组(p<0.05),IL-6含量则持续稳定在较高水平。综上所述,雏鸭接种DTMUV后细胞免疫受到了一定抑制,随着日龄的增长,DTMUV对雏鸭细胞免疫的抑制作用减弱,细胞免疫也逐渐在抗DTMUV的感染中发挥作用。
- 李秀丽程冰花陈浩路云建提金凤王爱华窦砚国牛晓宇于相龙刁有祥
- 关键词：雏鸭免疫球蛋白细胞因子
- 一种鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位及其应用
- 本发明提供了一株分泌鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体及其鉴定的TMUV‑NS1蛋白的TMUV特异性细胞表位。本发明利用TMUV NS1蛋白制备了单克隆抗体，利用单克隆抗体筛选鉴定了1个N...
- 刁有祥提金凤陈浩唐熠李志杰
- 抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2016年
- 【目的】制备抗鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)NS5蛋白的单克隆抗体。【方法】将实验室保存的PET28a-NS5载体转化入Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,利用纯化的鸭坦布苏病毒NS5蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴瘤细胞杂交技术结合有限稀释法制备单抗,并对单抗的特异性、反应性及其抗原表位和亚类进行鉴定。【结果】筛选获得2株稳定分泌针对DTMUV的NS5蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为A4D1和B4B8。此2株杂交瘤细胞诱导BALB/c小鼠的抗体效价均可达到1∶64 000。间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光(IFA)检测结果表明,所获细胞分泌的抗体能与DTMUV及纯化的NS5蛋白发生特异性反应。经鉴定2株单抗的亚类均为IgG1型,通过叠加ELISA方法,初步判定2株单抗识别不同的抗原表位。【结论】成功获得了抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白的单克隆抗体,为研究NS5蛋白的功能奠定了基础。
- 杨国平刁有祥赵丹丹陈浩提金凤张璐张英李川川
- 关键词：单克隆抗体
- 鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备被引量：1
- 2016年
- 【目的】制备鸭瘟病毒(DPV)gB蛋白单克隆抗体,为建立DPV快速诊断方法及进一步鉴定DPV的抗原表位奠定基础。【方法】克隆DPVgB基因,构建其表达载体并进行原核表达,纯化DPV gB蛋白,以其作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,进行间接ELISA及亚克隆筛选,并对单抗亚类及抗原性进行鉴定。【结果】PCR扩增出915bp的目的基因,成功连接于pET-28a载体,并转化大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,获得4株稳定分泌抗DPV gB蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6,间接ELISA检测其腹水效价分别为1∶103、1∶103、1∶105、1∶103,亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blot结果显示4株单抗均能与DPV gB蛋白特异性结合,IFA结果表明4株单抗是针对DPV产生的。【结论】成功获得了特异性针对DPV gB蛋白的单克隆抗体。
- 赵丹丹刁有祥杨国平陈浩提金凤张璐
- 关键词：鸭瘟病毒单克隆抗体
- 一种坦布苏病毒双抗体夹心ELISA检测方法
- 本发明提供了一种坦布苏病毒双抗体夹心ELISA检测方法；本发明包括单克隆抗体制备、酶标抗体的选择和ELISA检测程序等步骤；本发明建立的坦布苏病毒夹心ELISA检测方法具有快速、稳定、特异性高、灵敏度高，使用本发明只需使...
- 刁有祥陈浩唐熠高绪慧提金凤
- 文献传递
- 鸭源呼肠孤病毒对樱桃谷肉鸭的致病性研究
- 引言1950年,Kaschula VR首次在南非报道番鸭感染禽呼肠孤病毒[1],并先后在鸭、鹅、火鸡、鸡、鹦鹉、鸵鸟、野鸟等多种禽类体内均分离到病毒[2]。鸭源呼肠孤病毒（duck reovirus,DRV）主要造成番鸭...
- 提金凤唐熠陈浩张颖刁有祥
- 抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单克隆抗体的研制及鉴定被引量：1
- 2007年
- 以抗H5亚型禽流感病毒(AIV)JSD株鸡胚尿囊液免疫8周龄BALB/c小鼠,第4次免疫后取其脾淋巴细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)对杂交瘤进行筛选,经3次亚克隆后,共获得4株针对血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体,分别命名为:2D2、2C8、3D3和3D11。该4株单抗的小鼠腹水的HI效价在213～215,ELISA效价为1.2×105～5.1×105。亚类鉴定结果表明,2D2和3D11属于IgG1,2C8属于IgG3,3D3属于IgG2a亚类;特异性试验结果表明,上述4株单抗仅与H5 AIV毒株发生特异性反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、IBV和EDSV-76等病毒反应;鸡胚中和试验结果显示,4株单抗均具有较好的中和活性。本研究成功获得4株针对H5 AIVHA蛋白的特异性单抗,为临床H5 AIV的血清学监测及鉴定提供了必需的试剂。
- 郝贵杰提金凤陈清刘文博吴艳涛
- 关键词：禽流感病毒单克隆抗体血凝抑制试验
- 坦布苏病毒对雏鹅的致病性研究
- 引言 坦布苏病毒(Tembusu Virus,TMUV)感染是我国2010年新发生一种传染性疾病,该病以蛋鸭产蛋下降、雏鸭瘫痪为特征,给我国养鸭业带来严重的经济损失[1-4].坦布苏病毒主要感染鸭,包括北京鸭、樱桃谷鸭、...
- 张璐杨国平路云建刁有祥陈浩提金凤赵丹丹张英
- 鹅源新城疫病毒ZJ1株拯救体系相关因素的探索
- 2006年
- 在构建了鹅源新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)ZJ1毒株的微型基因组和表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒的基础上,通过对该病毒拯救体系中的重要影响因素如ZJ1在易感细胞的增殖、热休克对拯救效率的影响、表达T7RNA聚合酶的重组痘苗的感染复数、胞嘧啶阿拉伯呋喃糖苷(Arac)对重组痘苗复制的影响以及共转染质粒的比例和量等进行了探索。以上研究为该病毒的成功拯救及开展其它相关研究奠定了基础。
- 张艳梅提金凤胡顺林刘玉良刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒
- 2010-2013年坦布苏病毒的仝基因组序列分析
- 自2010年首次分离到坦布苏病毒以来，坦布苏病毒感染已成为严重危害我国蛋鸭、种鸭生产性能的重要传染性疫病之一。自发生以来，该病逐渐由我国华东沿海地区扩散到我国主要养鸭地区。目前该病的流行和发生并没有明显的季节性和地域性，...
- 陈浩唐熠提金凤刁有祥
- 关键词：鸭群全基因组序列测定分子流行病学
