施桥发
- 作品数：47 被引量：134H指数：8
- 供职机构：南昌大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省卫生厅科技计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学环境科学与工程更多>>
- VEGF在子宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义
- 张丽霞施桥发唐萍
- 文献传递
- O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶在子宫颈癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)在子宫颈癌组织中表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测子宫颈癌组织中MGMT的表达。结果 60例子宫颈癌组织中MGMT的阳性表达率为93.33%,显著高于14例对照正常宫颈组织中阳性率42.8%,(P<0.05);子宫颈癌患者中,Ⅰ期与Ⅱ期的MGMT阳性率分别为100%、95.83%,显著高于Ⅲ-Ⅳ期的阳性率62.5%(P<0.01)。结论 MGMT的表达水平与宫颈组织癌变发展的进程相关,其在宫颈癌组织的高表达可为宫颈癌的诊断提供重要依据。
- 张志勇邓荣春周爱群施桥发
- 关键词：子宫颈癌免疫组织化学染色
- HPV-16E4原核表达系统的建立和表达特性研究被引量：2
- 2006年
- 目的克隆人乳头瘤病毒-16型(HPV-16)E4基因(E4),构建E4蛋白表达重组工程菌,探索表达条件和鉴定表达产物特性。方法以临床HPV-16阳性宫颈炎患者上皮细胞提取物为模板,PCR扩增E4完整基因,并定向克隆到pET32a(+)原核表达质粒中,经双酶切和测序鉴定后转入大肠杆菌BL-21(DE3),获得工程菌(BL-21/E4)。经IPTG诱导,表达蛋白用SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果克隆到完整E4基因为342bp,与HPV-16东亚型的同源性为99%,与其他HPV16型的同源性高于97%。在28℃和37℃,0.1mmol/L的IPTG诱导18h时,重组蛋白(rE4)表达量分别占菌体总蛋白的12.2%和12.8%;SDS-PAGE和Westernblot证明rE4蛋白与表达载体的标签蛋白形成相对分子质量约34×103的可溶性融合蛋白(rE4/His)。结论成功构建了表达带标签的融合重组蛋白(rE4/His)的重组大肠杆菌BL-21/E4表达系统,这为高纯度HPV-16E4蛋白的制备和相关研究奠定了基础。
- 王保宁施桥发李虹张卫东庄永华杨靖蒋忠华李明远
- 关键词：HPV-16原核表达
- HPV16 E7蛋白免疫学特性研究及其单克隆抗体制备
- 目的
HPV16是引起子宫颈癌等疾病的重要原因。在子宫颈癌患者中，90％以上的患者存在HPV感染，其中60％以上为HPV16感染。在HPV16感染的子宫颈癌细胞中，HPV16 E7蛋白存在持...
- 施桥发
- 关键词：人乳头瘤病毒16型免疫印迹单克隆抗体反转录PCR
- 文献传递
- 风湿性关节炎的自身抗体免疫学指标检测及应用进展被引量：11
- 2013年
- 类风湿性关节炎的诊断涉及临床表现、X线改变和实验室自身抗体免疫学相关检测指标等,而自身抗体临床实际中应用的主要有类风湿性因子(RF)、抗核周因子抗体(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗RA33抗体、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗MCV抗体)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗体、抗核抗体(ANA)等一些自身抗体。笔者就这些指标做一综述。
- 何媛施桥发
- 关键词：抗RA33抗体
- 间充质干细胞和单个核细胞异种移植治疗大鼠肝损伤的研究
- 2010年
- 目的：研究小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）和单个核细胞（MNCs）在四氯化碳（CCl4）诱导性大鼠肝损伤治疗中的作用。方法：无菌条件下取雄性Balb/c小鼠骨髓分离MNCs,培养纯化及流式细胞仪筛选获得MSCs;采用CCl4制作雌性Wistar大鼠肝损伤模型,随机分为MSCs移植组、MNCs移植组和肝损伤对照组。2个细胞移植组分别在CCl4损伤后立即经尾静脉注入小鼠MSCs或MNCs,各组分别于移植细胞输入前即刻（T0）、输入后第1（T1）、7（T2）、14（T3）、28（T4）、42（T5）天断尾取血检测丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）。6周后处死大鼠,比较肝脏质量指数,肝病理学切片检测肝损伤程度,PCR检测小鼠Sry基因片段植入大鼠肝脏的情况。结果：MSCsCD44、CD90均表达阳性,而CD45表达阴性;2个细胞移植组在T1~4时点ALT和AST浓度差异有统计学意义（P〈0.05）;与肝损伤对照组比较,MSCs移植组ALT和AST浓度在T1~4时点均降低;MSCs移植组肝损伤修复程度明显好于MNCs移植组和肝损伤对照组;仅MSCs移植组肝内有小鼠Y染色体阳性细胞存在。结论：体外分离培养及扩增的小鼠MSCs可植入到CCl4诱导性肝损伤大鼠的肝组织中,并改善CCl4导致的肝损伤。
- 王福财刘玉琳傅颖媛施桥发
- 关键词：间质干细胞肝疾病
- 一种用于原代细胞过滤的离心管
- 本实用新型一种用于原代细胞过滤的离心管，包括离心管管体、离心管管盖和可调节过滤器，所述离心管管体内壁上等距设有四个限位球，所述限位球位于离心管管体内同一深度，所述可调节过滤器置于离心管管体内，可调节过滤器底端与限位球相接...
- 李鑫辰唐森施桥发闵卫平
- 缺氧诱导因子HIF-1α与HIF-2α在宫颈癌组织中的表达及相关性研究被引量：8
- 2012年
- 目的:研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)与缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2alpha,HIF-2α)在宫颈癌组织中的表达和相关性。方法:免疫组织化学染色方法检测宫颈癌组织中HIF-1α与HIF-2α的表达。用SPSS统计软件分析HIF-1α与HIF-2α在宫颈癌组织中的相关性。结果:原位癌组、浸润癌组HIF-1α蛋白阳性表达率分别为57.7%、78.6%;HIF-2α蛋白阳性表达率分别为65.4%、85.7%,宫颈癌组织中HIF-1α阳性表达得分为1.56±1.60,HIF-2α阳性表达得分为4.51±1.04,HIF-1α和HIF-2α蛋白的表达呈显著正相关(rs=0.855,P<0.05)。结论:宫颈原发癌、浸润癌中,HIF-1α、HIF-2α表达与宫颈癌临床病理特征有密切关系,且两者表达呈显著正相关,两者在宫颈癌的发生发展及浸润转移过程中可能起协同作用。
- 江丽霞施少华施桥发李峰刘四君
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α缺氧诱导因子-2Α免疫组织化学染色
- 鼠β-防御素2(mBD2)真核表达质粒的构建及稳定表达株的鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的:对小鼠β防御素-2(mBD2)基因进行克隆,构建其真核表达载体,筛选出稳定表达细胞株,并研究mBD2的生物学特性及其抗肿瘤机制。方法:通过向BALB/c小鼠腹腔注射内毒素(LPS),建立小鼠急性时相反应,取其肺组织提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增小鼠mBD2基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后插入相同酶切的pcDNA3.1(+)真核表达载体,对其进行酶切和测序鉴定。将构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD2转染SiHa细胞,采用G418进行稳定表达株的筛选,用免疫荧光染色和RT-PCR鉴定细胞内mBD2蛋白表达情况。结果:提取小鼠肺组织总RNA,采用RT-PCR方法扩增了250bp左右的产物,通过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD2。SiHa被该质粒转染后,在100mg/LG418浓度下筛选20d,得到了稳定表达mBD2的细胞株,用免疫荧光染色显示mBD2蛋白在胞质中有大量表达,RT-PCR反应扩增到了mBD2的mRNA。结论:成功地构建了pcDNA3.1(+)/mBD2真核表达质粒,mBD2蛋白在SiHa细胞中能稳定表达,这些结果为进一步深入研究mBD2的生物学特性及其抗肿瘤的作用奠定了基础。
- 魏晓丽施桥发李虹李婉宜蒋忠华李明远
- 关键词：真核表达免疫荧光RT-PCR
- HPV-16 E7、HIF-1α和HIF-2α在宫颈癌组织中的表达及其临床意义
- 王福财施桥发王美珍
- 关键词：宫颈癌E7缺氧诱导因子-2Α
