权富生 作品数:108 被引量:349 H指数:9 供职机构: 西北农林科技大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 引进国际先进农业科技计划 陕西省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 轻工技术与工程 更多>>
牛胚胎性别简易鉴定方法 本发明涉及一种牛胚胎性别简易鉴定方法,其血液基因组鉴定率达100%,胚胎性别鉴定率为99.0%以上,操作简便、灵敏度高、鉴定快速、实用性强、使用设备简单,并可以在1h内鉴定出胚胎性别,形成的胚胎性别鉴定试剂盒完全可以应用... 张志平 张涌 刘俊平 安志兴 张君涛 张立 权富生 郑月茂 赛务加甫 蔡欣卵巢颗粒细胞自噬研究进展 2025年 卵巢颗粒细胞(granulosa cells, GCs)是雌性动物卵泡发育的基础保障。过去人们普遍认为GCs凋亡能调控卵泡发育。然而,近年来研究发现GCs自噬也能调控卵泡发育。在畜牧养殖行业中,卵泡发育的优劣与雌性动物繁殖率的高低息息相关,直接影响养殖场经济效益。目前,越来越多研究表明miRNAs是调控GCs自噬的因素之一。因此,本文将从GCs的来源、结构和功能、GCs自噬对卵巢的重要性、卵巢GCs自噬相关的miRNAs及其对卵泡发育的调控作用等方面的研究进展进行综述,以期为今后相关研究提供参考。 王莹 张姣姣 王鲜忠 权富生关键词:卵巢颗粒细胞 家畜 细胞自噬 MIRNAS 基因打靶定点突变秦川牛MSTN基因 被引量:9 2010年 Myostatin(MSTN,肌肉生长抑制素)基因属于TGF-β超家族,对骨骼肌的生长发育具有负调控作用。该基因的功能缺失,能够引起肉用动物的"双肌"表型,从而提高产肉率。基因打靶技术是制作转基因动物的常用方法。构建了两个置换型打靶载体pA2T-Mstn4.0和pA2T-Mstn3.2,通过同源重组将G938A突变点引入秦川牛MSTN基因第三外显子。电穿孔方法转染秦川牛胎儿成纤维细胞,经过600μg/mL G418和50nmol/L GCV的药物正负筛选,共得到170个药物抗性细胞克隆。对细胞克隆进行PCR、测序及Southern blotting鉴定,结果显示,第58号细胞克隆为发生了正确同源重组的中靶细胞。牛胎儿成纤维细胞中的MSTN基因的一条等位基因被成功改造。 刘永刚 华松 兰杰 宋永利 何玉龙 权富生 张涌关键词:肌肉生长抑制素 基因打靶 定点突变 成纤维细胞 转EGFP基因山羊克隆胚的发育 被引量:1 2007年 利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒,并将之导入山羊乳腺上皮细胞,经G418筛选获得阳性细胞,以阳性细胞作为核供体,利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果表明:用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体,电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液,在培养72 h后加入10%的正常山羊血清(Normal goat serum,NGS)。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达,大部分克隆胚发育到8-16细胞以后的时期,绿色荧光蛋白才开始逐渐表达,随着发育时间的延长,绿色荧光蛋白的表达也逐渐增强。说明外源基因在胚胎早期发育阶段可以表达,EGFP可以作为报告基因来实现对外源基因整合及表达的监测。 郑月茂 刘凤军 安志兴 李向臣 赵晓娥 权富生 张涌关键词:绿色荧光蛋白基因 基于Cas9介导的定点整合FABP4基因和MSTN基因点突变打靶载体及重组细胞 本发明公开了一种基于Cas9介导的定点整合FABP4基因和MSTN基因点突变打靶载体及重组细胞,本发明利用电穿孔的方法将靶向MSTN基因的Cas9真核表达载体和打靶载体共转染鲁西黄牛胎儿成纤维细胞,实现对鲁西黄牛胎儿成纤... 张涌 康健 权富生 谢晓刚 葛陆星 董翔宸 王丰瑜 孙洪政 韩成全波尔山羊青年母羊体质量与超数排卵的关系 被引量:3 2010年 【目的】研究波尔山羊青年母羊体质量与超数排卵反应及回收胚胎数之间的关系。【方法】将12~18月龄的波尔山羊青年母羊57只,按体质量分为26~30,31~35,36~40,41~45,〉45 kg 5个组,分析超数排卵处理青年母羊后,不同胚胎回收范围内母羊数量的分布情况及青年母羊不同体质量范围回收胚胎(卵)总数和可用胚胎数,并对青年母羊超数排卵处理后体质量与回收的胚胎(卵)总数及可用胚胎数的关系进行线性回归分析。【结果】(1)青年母羊有52.94%个体的回收胚胎(卵)总数≥16枚,有39.22%个体的可用胚胎数≥16枚。(2)用体质量〉36kg青年母羊进行超数排卵,可以得到较多的回收胚胎(卵)总数及可用胚胎数。(3)体质量与回收胚胎(卵)总数之间有较强的相关关系,且相关性达显著水平,并建立了二者之间的回归方程。【结论】波尔山羊青年母羊体质量与超数排卵效果之间有密切的关系,将青年母羊配种前进行良好的饲养,有利于其繁殖潜能的发挥。 权富生 刘永刚 王勇胜 赵晓娥 张涌关键词:超数排卵 体质量 波尔山羊 牛胎儿皮肤成纤维细胞的分离培养及转染Ipr1基因 被引量:2 2011年 为了为核移植提供供体细胞,本研究构建了真核表达载体PEGFP-SRA-Ipr1,并研究了牛胎儿皮肤成纤维细胞的体外分离培养,进行了Ipr1基因转染。克隆Ipr1基因和SR-A启动子,并构建了巨噬细胞特异性真核表达载体。用组织块贴壁法分离培养牛胎儿皮肤成纤维细胞,在体外经传代、纯化后,用电穿孔法将真核表达载体PEGFP-SRA-Ipr1转染至经体外纯化的第4~10代牛胎儿成纤维细胞,24h后观察荧光表达,48h后加入600μg.mL-1 G418,筛选1周,300μg.mL-1持续筛选,然后挑选单克隆,继续扩大培养。对稳定转染的牛胎儿成纤维细胞进行PCR检测和核型分析。结果,转染24h后有绿色荧光蛋白表达,并经G418筛选获得稳定转染PEG-FP-SRA-Ipr1的牛胎儿成纤维细胞株,经PCR检测在大约1 500bp处有目的片段,经流式细胞仪分析转染细胞染色体倍型未发生变化,仍是二倍体。说明目的基因已经成功整合,同时保持了遗传稳定性。可以作为核移植进行转基因克隆牛研究。 宋永利 何小宁 华松 兰杰 郑月茂 贺小英 李吉霞 权富生 张涌关键词:供体细胞 真核表达载体 牛胎儿成纤维细胞 电穿孔 绿色荧光蛋白 秦川牛胎儿骨骼肌卫星细胞的分离培养 被引量:5 2012年 【目的】探索胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及基因转染的方法。【方法】分别采用Ⅰ型胶原酶消化、Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化及链霉蛋白酶消化法对胎牛骨骼肌卫星细胞进行培养,比较了3种不同分离方法所得细胞数及其存活率的差异;利用差速贴壁法和Percoll密度梯度离心相结合的方法纯化骨骼肌卫星细胞,对纯化后的细胞进行myostatin基因RT-PCR以及结蛋白(Desmin)免疫细胞化学染色鉴定,最后通过电转染法对纯化的骨骼肌卫星细胞进行EGFP基因转染研究。【结果】3种消化培养方法中,以链霉蛋白酶消化法分离得到的胎牛骨骼肌卫星细胞数显著高于其它2种方法(P<0.05),但细胞存活率较低(P<0.05);而采用Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化法可以得到相对较高的细胞数及存活率。利用差速贴壁和Percoll密度梯度离心相结合的方法可以得到纯化的骨骼肌卫星细胞;电转染法适用于骨骼肌卫星细胞的基因转染。【结论】建立了胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、纯化、鉴定及基因转染的方法,为通过转基因方法改良秦川牛产肉性能研究奠定了基础。 何玉龙 吴月红 权富生 刘琴 张涌关键词:骨骼肌卫星细胞 EGFP基因 陕北绒山羊舍饲条件下规模化同期发情处理方法研究 选择吴起县12个乡镇18个舍饲养羊小区1.5~4岁的繁殖母羊共3 533只,用4种方案诱导母羊同期发情,并进行人工授精。对不同处理方法同期发情率和配种受胎率、产羔率等进行了比较。Ⅰ组即海绵栓组处理后同期发情率、配种受胎率... 权富生 齐天光 刘锦如 蔺生焕 王文萍关键词:绒山羊 同期发情处理 舍饲养羊 安秦杂交一代与秦川牛育肥对比试验 被引量:6 2005年 2003年9月在陕西省永寿县选择30头18月龄红安格斯×秦川牛和15头18月龄秦川牛进行饲养肥育试验,30头杂交牛分为两组,试验组2在试验组1牛日粮的基础上添加0.2%的发酵剂,15头秦川牛作为对照组,从日增重、健康状况、饲料转化率、投入产出比几个方面进行了比较,试验结果发现:平均日增重,试验组1比对照组提高17.9%,试验组2比对照组提高33.9%;健康状况,试验组2明显优于对照组、试验组1;饲料转化率,试验组1、试验组2比对照组分别提高14.8%和16%。 辛亚平 权富生 郭亚宁 许尚忠 昝林森关键词:育肥试验 杂交改良