李东升
- 作品数：22 被引量：12H指数：2
- 供职机构：佛山科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- cPouV和cNanog基因在鸡胚多能性细胞发育过程中的表达定位被引量：2
- 2014年
- 研究cPouV和cNanog基因在鸡早期胚胎中的时空表达规律,探索鸡胚早期发育过程中胚胎干细胞的增殖分化规律,为进一步研究2基因在鸡胚早期发育中的作用奠定基础。本试验分别构建了pMD-18T-cPouV和pMD-18T-cNanog重组质粒,制备了地高辛(DIG)标记cPouV和cNanog基因的cDNA探针,采用原位杂交的方法检测cPouV和cNanog在鸡早期胚胎中的表达模式。结果表明:在原条发生前,cPouV和cNanog基因均匀表达于明区。原条期,cPouV基因在原条及其周围表达,cNanog基因则表达于原条周围,原条上未见表达。随着神经板的形成,2基因大量表达于神经板、神经管和脑部周围。待鸡胚发育至14HH阶段,2基因主要集中表达于头部和心等血管富集处,在外周血管中也能检测到其表达信号。综上表明:随着胚胎的发育,能够表达cPouV和cNanog基因的多能性干细胞逐渐由中央明区向外周迁移。
- 李东升陈志胜王丙云彭特陈胜锋计慧琴陈金顶
- 关键词：胚胎干细胞原始生殖细胞原位杂交鸡胚
- 禽类间充质干细胞的研究:探索与前景被引量：2
- 2015年
- 背景:禽类间充质干细胞是来源于禽类中胚层的一类多能性成体干细胞,具有强大的增殖能力和多向分化潜能,应用前景广阔。目的:对禽类间充质干细胞的来源、分离、纯化、培养和分化等方面的最新研究进展进行综述,为禽类间充质干细胞的进一步研究和应用提供理论依据和实验基础。方法:以"mesenchymal stem cells,poultry,chicken,isolation,culture,differentiation"和"间充质细胞,禽类,鸡,分离培养,分化"为检索词,由第一作者检索1990至2014年Pub Med和中国知网数据库,查阅近年禽类间充质干细胞的相关文献,最终保留42篇文献。结果与结论:禽类间充质干细胞在建立禽类细胞体外模型、研究禽类疾病发病机制以及动物营养和肉品质调控方面有着巨大的应用前景。间充质干细胞来源广泛,易于获得,不同组织来源间充质干细胞的分离、纯化、培养和生物学特性也有所不同。但是禽类间充质干细胞的研究还在探索过程中,还有许多亟待解决和深入探究的问题。
- 李东升王丙云陈志胜陈胜锋计慧琴冼琼珍陈金顶
- 关键词：间质干细胞家禽干细胞禽类间充质干细胞国家自然科学基金
- 不同胚期分离的鸡原始生殖细胞(PGCs)遗传与培养特性比较
- 2017年
- 根据家禽原始生殖细胞(PGCs)的迁移路径,分别从孵化24h的鸡胚生殖新月(gcPGC)、2.5d的胚血(cPGC)和5.5d的生殖腺(gPGC)中分离PGCs,置于完全培养基中培养,表达干细胞标志物SSEA-1和生殖细胞特异标志物DAZL免疫荧光染色鉴定结果,表明纯化的细胞为PGCs。CCK-8法细胞增殖检测显示,BRL-3A饲养层细胞能明显促进PGCs的体外增殖,与无饲养层条件培养的PGCs间有显著性差异(P<0.05),但不同来源PGCs间无增殖速度的差异。检测这3种不同来源PGCs的集落形成能力,结果显示cPGCs的集落形成率最高,集落体积最大。real time-PCR结果显示多能性相关基因nanogv和pouV在gcPGCs中的表达量最高,而生殖相关基因dazl和cvh在cPGCs中的表达量最高。结果表明,体外培养的PGCs保持其体内遗传状况,即gcPGC的多能性最好,cPGC开始进入生殖系分化,而gPGC可能已部分进入减数分裂。而从培养特性上来看,gcPGC由于数量过少难以扩大培养,而gPGC混合的分化细胞过多,cPGC是体外培养和增殖分化研究的最佳细胞来源。
- 陈志胜张晓芳李东升王丙云陈胜锋陈金顶
- 关键词：原始生殖细胞体外培养增殖多能性
- 一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法
- 本发明所述一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法，包括以下步骤：(1)分离方法是通过贴滤膜法从种蛋中取出无卵黄污染的干净鸡胚，然后从鸡胚中获取生殖新月组织；(2)用胰酶将生殖新月组织消化成单细胞，然后对单细胞中的PGC...
- 王丙云陈志胜陈胜锋计慧琴李东升冼琼珍
- 文献传递
- 一种犬间充质干细胞注射液及其制备方法和应用
- 本发明所述一种犬间充质干细胞注射液及其制备方法和应用，包括：犬骨髓间充质干细胞、肝素钙、犬血白蛋白和电解质溶液，巧妙的运用犬骨髓来源的间充质干细胞，并将其与其他成分组合制备成注射液形式，即犬骨髓间充质干细胞注射液，打破了...
- 张贝莹王丙云李东升罗冬章麦海涛陈祥浪郭彦陈志胜陈胜锋计慧琴冼琼珍
- 文献传递
- 一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法
- 本发明所述一种鸡生殖新月来源PGCs的分离培养方法，包括以下步骤：(1)分离方法是通过贴滤膜法从种蛋中取出无卵黄污染的干净鸡胚，然后从鸡胚中获取生殖新月组织；(2)用胰酶将生殖新月组织消化成单细胞，然后对单细胞中的PGC...
- 王丙云陈志胜陈胜锋计慧琴李东升冼琼珍
- 文献传递
- 一种饲养层细胞、培养方法及应用
- 本发明提供了一种饲养层细胞的培养方法，包括步骤：1)鸡骨髓间充质干细胞的获取；2)饲养层的制备。本发明打破了传统的以成纤维细胞作为饲养层的传统方法，避免了多次制备不同代次的成纤维细胞造成的不确定性与不稳定性；避免了异源细...
- 赵姝灿陈志胜李东升张晓芳郑桂纯
- 文献传递
- 猪瘟病毒C株E2截短蛋白及制备方法与应用
- 本发明公开一种猪瘟病毒C株E2截短蛋白及制备方法与应用。本发明将E2基因主要抗原区进行表达外还将维持其空间结构的三对二硫键进行同时表达，在一定程度上可使得表达蛋白有一定空间结构，更加符合天然蛋白的特点，且包涵体也利于蛋白...
- 陈金顶郑仲华姚俊庸李东升勾红潮漆月王利军邓洁汝
- 文献传递
- 一种分离鸡胚血来源的原始生殖干细胞的方法
- 本发明公开了一种分离鸡胚血液来源原始生殖细胞的方法。其在制备微量玻璃针采血装置的基础上，利用玻璃细针虹吸原理快速有效的从血液分离鸡原始生殖细胞。包括以下步骤：微量玻璃针采血装置的制备；14HH鸡胚血液的采集；采集的14H...
- 王丙云张晓芳陈志胜陈胜锋计慧琴李东升冼琼珍刘樱冯娜
- 文献传递
- 一种犬的临床用间充质干细胞冷藏保存液及其应用方法
- 本发明提供一种犬的临床用间充质干细胞冷藏保存液，包括以下原料：注射用水、犬白蛋白、葡萄糖、枸橼酸钠、枸橼酸、氯化钠、碳酸氢钠、葡聚糖40以及水溶性维生素E；按照重量比计算，注射用水、犬白蛋白、葡萄糖、枸橼酸钠、枸橼酸、氯...
- 王丙云何诗冼伟杭李东升陈胜锋陈志胜刘淑英周鑫吴尚聪
