李凤珍
- 作品数：15 被引量：26H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划军队医学科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 纯化的抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体对乙酰胆碱酯酶活性的影响(英文)被引量：2
- 1989年
- 本文研究了Balb/c小鼠杂交瘤细胞分泌的抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体对电鳐电器官乙酰胆碱酯酶催化反应的影响及其机理。小鼠腹水抗体经蛋白A琼脂糖亲和层析分离纯化,达到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。酶联免疫吸附试验检测了11株单克隆抗体,滴度在1:5000～1:300 000范围内。在以乙酰胆碱为底物的催化反应中,3F3、2G8及1H11三株杂交瘤分泌的单克隆抗体对乙酰胆碱酯酶活性有明显的抑制作用,抑制作用随单克隆抗体用量的加大而增强。但在以乙酰靛酚为底物的催化反应中,仅3F3显示抑制作用。因而推论,3F3作用在乙酰胆碱酯酶的活力中心,而2G8及1H11可能作用在活力中心的邻近部位.乙酰胆碱酯酶的活力中心不仅是酶的催化部位,而且也是酶分子上的一个抗原决定簇.乙酰胆碱酯酶活力中心具有催化及诱导抗体产生的双重功能.
- 王家蓓李凤珍傅风华孙曼霁阎国珍辛颜彬徐品芳
- 关键词：乙酰胆碱酯酶单克隆抗体乙酰胆碱
- 以氯化丁酰胆碱为底物测定假性胆碱酯酶活性的微量羟胺比色法被引量：2
- 1999年
- 目的：建立适用测定假性胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）活性的微量羟胺法。方法：酶促反应用人血清ＢＣｈＥ，选择优化以氯化丁酰胆碱为底物测定ＢＣｈＥ活性微量羟胺法的条件并进行了方法学评价。结果及结论：本法底物丁酰胆碱最适浓度为９ｍｍｏｌＬ－１，最佳反应时间为３０ｍｉｎ，最适比色波长为４９２ｎｍ，灵敏度是以乙酰胆碱做底物的微量羟胺法的２倍，呈色物质比５，５－二硫基双－２－硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）法中的稳定，重复性好，操作简单，试剂及酶用量少。
- 魏婉丽李凤珍孙曼霁
- 关键词：假性胆碱酯酶
- 抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体的研究被引量：1
- 1989年
- 乙酰胆碱酯酶(Acetylcholine acetylhydrolase,EC 3.1.1.7.简称AChE)是神经系统中重要的水解酶,它催化胆碱能神经末梢释出的化学递质已酰胆碱水解,使之在完成信息传递后迅速失活,以维持正常的神经活动。AChE的生化研究因而受到广泛的重视。近年来,抗AChE单克隆抗体已用于组织、种属及分子型间AChE交叉免疫反应性的研究。
- 辛颜彬阎国珍徐品芳李凤珍张翰孙曼霁
- 关键词：乙酰胆碱酯酶单克隆抗体
- 内皮素受体拮抗剂的活性筛选
- 2009年
- 内皮素（ET）是由21个氨基酸组成的多肽，具有强大的缩血管和促进血管平滑肌细胞增殖作用，在许多心、脑、肺、肾和血管疾病的发病中都有重要意义。内皮素的生物学作用是由其在细胞膜上特异的内皮素受体所介导的，通过与内皮素受体结合后发挥广泛的生物学活性。目前，对ET受体拮抗剂的研究已成为此领域的热点，本文主要是叙述新型内皮素受体拮抗剂在离体血管功能和内皮素受体上作较为系统的活性筛选。根据离体血管功能实验，对新拮抗剂进行了初筛，结果表明：筛选出有较高活性的肽类拮抗剂53个，其中有18个活性超过阳性对照BQ485筛选出9个非肽类拈抗剂显示出较强的拮抗活性。离体大鼠血管条初筛2位为pro的系列化合物，其中12个化合物与阳性BQ485相当。离体初筛不同R结构的系列化合物，有6个化合物活性与BQ485相当。离体初筛含特定非天然氨基酸的化合物，有7个化合物与BQ485相当。
- 池木根李昕李凤珍郑建全董俊军高峰刘克良
- 关键词：内皮素受体拮抗剂活性筛选离体血管细胞增殖作用非天然氨基酸阳性对照
- 重组人脑乙酰胆碱酯酶的基因表达和生化毒理学性质被引量：3
- 2002年
- 人脑乙酰胆碱酯酶的全长cDNA序列克隆到真核高效表达载体pcDNA3.1中 ,并将pcDNA AChE转染人胚肾细胞株 2 93细胞 ,进行rhAChE的暂时表达 .真核细胞表达的rhAChE的生化性质与天然人脑AChE十分相似 .rhAChE的Km 值约为 137μmol L ;有过量底物抑制现象 ;可被胆碱酯酶抑制剂huperzineA和eserine抑制 (IC50 分别为 2 5× 10 -8mol L和 1 0× 10 -7mol L) ;肟类化合物HI 6 (10 -4 mol L)可以有效地重活化被sarin(10 -6mol L及 10 -7mol L)抑制的rhAChE ,4h内重活化率分别达 86 %和 97% .rhAChE反复冻融 3次 ,酶活性没有损失 .
- 李前刘伟李凤珍孙曼霁
- 关键词：真核表达基因表达
- 乙酰胆碱酯酶抑制性抗体的作用靶位分析
- 2001年
- 电鳐乙酰胆碱酯酶(AChE)的单克隆抗体3F3在与酶分子结合的同时可强烈地抑制电鳐乙酰胆碱酯酶活性,已有的实验结果表明,3F3不仅可以抑制酶对于乙酰胆碱的水解能力,还可以抑制酶对于乙酰靛酚的水解作用[1,2].
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- 王玉霞李凤珍武军华郭崇志孙曼霁
- 关键词：乙酰胆碱酯酶单克隆抗体
- 裸露DNA直接注入小鼠骨骼肌中瞬时表达研究
- 2001年
- 目的医学预防是军事医学课题中一个非常重要的领域.在预知可能遭遇神经性毒剂伤害的战前进行医学防护,将会大大提高战时作战人员的生存能力和作战能力.我们采用裸露DNA直接注射法进行医学防护,是基于战时医学防护的特点及此种基因转移方法的优点而进行的尝试
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- 李前宋晓菲李凤珍张瀚孙曼霁
- 内皮素受体拮抗剂的活性筛选
- 内皮素(ET)是由21个氨基酸组成的多肽,具有强大的缩血管和促进血管平滑肌细胞增殖作用,在许多心、脑、肺、肾和血管疾病的发病中都有重要意义。内皮素的生物学作用是由其在细胞膜上特异的内皮素受体所介导的,通过与内皮素受体结合...
- 池木根李昕李凤珍郑建全董俊军高峰刘克良
- 文献传递
- 抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体的产生被引量：10
- 1989年
- 将SP 2/O-Ag 14/小鼠骨髓瘤细胞和用乙酰胆碱脂酶免疫的Balb/c小鼠脾细胞在PEG-1000作用下进行融合,获14株分泌抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体的杂交瘤细胞系。用酶联免疫吸附试验(ELISA)对其分泌的抗体滴度进行了检测,其免疫鼠腹水滴度最高可达1:2 560 000。对其中5株杂交瘤分泌的滴度很高的抗体做了特异性交叉免疫试验,仅与乙酰胆碱脂酶发生特异反应,与其它4种酶(胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶及胰蛋白酶)无交叉反应;对其中12株杂交瘤分泌的抗体还进行了免疫球蛋白类型鉴定及染色体检查。上述杂交瘤细胞经3～6个月稳定传代后冻存于液氮中1年多后复苏,其抗体水平未见下降。
- 辛颜彬阎国珍徐品芳李凤珍张翰王家蓓孙曼霁
- 关键词：乙酰胆碱酯酶单克隆抗体杂交瘤
- 单克隆抗体3F3识别电鳐乙酰胆碱酯酶构象抗原决定簇(英文)
- 1997年
- 目的:研究天然电鳐乙酰胆碱酯酶(AChE)单克隆抗体3F3针对的抗原决定簇的类型.方法:以酶联免疫吸附试验测定抗原与抗体间的反应.结果:单克隆抗体3F3能与天然AChE反应,而不与还原并烷基化的AChE(RA-AChE)反应;梭曼不影响3F3与AChE的结合;化学合成的含AChE活性中心丝氨酸的24肽不与3F3反应.结论:3F3是识别电鳐AChE活性中心构象抗原决定簇的单克隆抗体,但它不占据AChE活性中心的丝氨酸残基.
- 傅风华王玉霞李凤珍辛颜彬孙曼霁
- 关键词：乙酰胆碱酯酶抗原决定簇单克隆抗体梭曼
