李树山
- 作品数：13 被引量：20H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高龄合并冠心病股骨颈骨折患者人工髋关节置换的围术期治疗被引量：1
- 2012年
- 目的探讨合并冠心病股骨颈骨折的高龄患者行人工髋关节置换术的围术期治疗措施。方法28例合并冠心病的股骨颈骨折高龄患者中，19例行人工双极股骨头置换，9例行人工全髋关节置换。根据术前评估冠心病情况，给予硝酸酯类、β-受体阻滞剂等药物或同时给予低分子肝素抗凝药物进行围术期综合治疗。结果术后患者恢复良好，无切口感染、肺栓塞、深静脉血栓及死亡等并发症。结论对合并冠心病的高龄患者，围术期给予适当的药物治疗，可减少人工髋关节置换术的并发症，增加手术安全性。
- 李树山殷力韩奇财杜振宁娄超举徐晨阳李弘帅
- 关键词：股骨颈骨折冠心病围术期治疗
- 转化生长因子-β1转染兔骨髓基质细胞修复软骨缺损被引量：1
- 2012年
- 目的观察转化生长因子-β1（TGF-β1）基因转染兔骨髓基质细胞（MSCs）复合海藻酸钠凝胶修复兔关节软骨缺损的效果。方法取兔龄4周龄的新西兰兔骨髓，体外分离纯化培养得到MSCs。选用24只成年新西兰兔，随机分为4组，在两侧股骨髁非负重区造成全层软骨缺损模型，A组（实验组）植入TGF-β1转染的MSCs＋藻酸钙，B组（对照组I）植入空质粒转染的MSCs＋藻酸钙，C组（对照组Ⅱ）植入不含MSCs的藻酸钙，D组（对照组Ⅲ）旷置。于移植后12周取材，观察软骨缺损修复及组织学评价。结果实验组修复组织基本光滑，有大量Ⅱ型胶原蛋白表达，3个对照组修复组织Ⅱ型胶原蛋白表达量少，仍有明显缺损。实验组与3个对照组12周时O’Driscoll，Kee—leyandSalter组织形态学评分分别为：实验组为（17．0004-1．758）分，对照组I为（7．830±1．528）分，对照组Ⅱ为（6．580±1．379）分，对照组Ⅲ为（3．170±1．267）分，组间单因素方差分析比较结果显示，实验组分别与3个对照组两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论TGF-β1转染兔MSCs修复软骨缺损效果优于其他对照组。
- 殷力娄超举韩奇财杜振宁李树山徐晨阳李红帅赵国强
- 关键词：软骨修复转化生长因子-Β1骨髓基质细胞基因转染
- 经股内侧肌入路全膝表面关节置换治疗膝骨性关节炎被引量：1
- 2010年
- 目的探讨人工全膝表面关节置换手术入路(TKA)。方法膝骨性关节炎21例,经股内侧肌间入路行TKA,采用人工全膝表面关节后稳定型假体,骨水泥固定。结果 21例膝术后均无神经血管损伤、髌骨轨迹不良、感染、切口皮肤牵拉性坏死等并发症;术后平均出血(305±55)ml;术后第2d下床行走;术后3d膝关节屈曲活动度为(85±7)度、7d(105±5)度、6周(114±6)度;3个月(122±6)度;术后直腿抬高时间为(2±1)d;术后3个月膝关节功能评分为(92±5)分。结论经股内侧肌入路行TKA具有手术创伤小、功能恢复快。
- 韩奇财殷力李树山娄超举徐晨阳杜振宁
- 关键词：股内侧肌手术入路
- 核因子-κB信号通路在股骨头坏死发病机制中的作用
- 2023年
- 目的观察核因子-κB(NF-κB)信号通路在股骨头坏死(ONFH)发病中的作用及其分子机制。方法髋关节置换术中对股骨头坏死患者的骨髓(实验组)和非股骨头坏死患者的骨髓(对照组)进行采样,利用密度梯度离心法分离提取实验组和对照组的骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行纯化和培养。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSCs成骨分化关键因子Runx2表达情况。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测实验组和对照组BMSCs中NF-κB信号通路p65蛋白磷酸化水平及Runx2的表达差异。采用噻唑蓝法(MTT)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性细胞凋亡检测法分别检测实验组和对照组BMSCs的增殖活性及凋亡情况。对实验组和对照组的BMSCs进行成骨诱导后,进行茜素红染色,检测BMSCs成骨分化水平的差异。通过雷公藤甲素(Triptolide)抑制经脂多糖(LPS)预处理的实验组BMSCs,观察磷酸化p65及Runx2的表达水平,同时,应用茜素红染色,验证抑制磷酸化p65对NF-κB信号通路对成骨分化的作用。采取单因素方差分析和t检验进行统计学意义分析。结果RT-PCR结果表明实验组Runx2基因表达指标低于对照组(0.48±0.15比1.0,t=6.890,P<0.01)。Western blot显示实验组的核因子-κB信号通路p65磷酸化水平显著升高,Runx2显著降低。磷酸化p65实验组指标高于对照组(0.68±0.10比0.34±0.12,t=6.532,P<0.01),Runx2实验组指标低于对照组(0.31±0.16比0.78±0.14,t=6.890,P<0.01)。MTT检测表明实验组BMSCs增殖能力指标低于对照组(0.6±0.1比1.0,t=12.153,P<0.01)。Caspase-3/7活性细胞凋亡检测显示,实验组BMSCs凋亡指标高于对照组(1.5±0.1比1.0,t=3.386,P<0.01)。茜素红染色显示,成骨诱导后实验组BMSCs吸光度值(650 nm)低于对照组(0.51±0.15比1.16±0.16,t=6.335,P<0.01)。雷公藤甲素抑制经LPS预处理的实验组BMSCs后,Runx2表达显著升高,抑制后指标高于抑制前(0.77±0.05比0.54±0.10
- 张翼王泫棕田燊郝壮宇许登辉李树山时程程
- 关键词：骨髓间充质干细胞蛋白磷酸化股骨头坏死成骨分化
- 膝关节骨性关节炎病变区软骨细胞来源的细胞外囊泡促进膝关节骨性关节炎进行性发展的机制
- 2023年
- 目的探究膝关节骨性关节炎(OA)患者来源病变区域软骨细胞(OA-L-CH)分泌的细胞外囊泡(OA-L-CH-EVs)对非病变区域软骨细胞的OA发展的影响机制。方法软骨细胞来源于郑州大学第一附属医院10例因OA需行膝关节置换术的患者,提取病变区域(OA-L-CH)和非病变区区域(OA-NL-CH)软骨细胞进行传代培养,运用差速离心法+超速离心法提取EVsOA-L-CH,用蛋白质印迹法(Western blot)检测p65和p38在OA-NL-CH和OA-L-CH中的表达水平。将OA-NL-CH与EVsOA-L-CH共培养作为实验组,对照组(OA-NL-CH)加入等量的磷酸盐缓冲液(PBS),分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶法(Caspase)-3/7检测EVsOA-L-CH对正常软骨细胞的增殖、凋亡的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测软骨合成基因和炎性因子基因表达,采用免疫荧光检测(IF)检测实验组的p-p65和p-p38 MAPK磷酸化水平。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果电子显微镜下可观察到提取物为粒径范围在50~200 nm、大小不等的膜性囊泡结构,Western blot结果显示提取物表达CD9、CD63标志蛋白。镜下可见PKH_(2)6标记后的EVs被摄取到软骨细胞内。Western blot结果显示,EVsOA-L-CH促进p38MAPK和p65核因子-κB(NF-κB)的磷酸化。CCK-8法检测软骨细胞的实验组(0.58±0.13)增殖活性明显低于对照组(1.0,t=5.889,P<0.01)。Caspase-3/7检测实验组(1.33±0.19)的细胞凋亡数量高于对照组(1.0,t=2.931,P<0.05)。RT-PCR检测结果显示实验组[B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)](0.65±0.09)、ACAN(0.80±0.12)、Sox9(0.77±0.14)软骨合成基因的表达明显低于对照组(bcl-2,1.0,t=7.591,P<0.001;ACAN,1.0,t=3.494,P<0.05;Sox9,1.0,t=3.081,P<0.05),实验组(1.19±0.15)炎性因子基因白细胞介素(IL)-1B表达明显高于对照组(1.0,t=2.477,P<0.05)。免疫荧光检测p38(实验组2.33±0.58,对照组1.0,t=3.954,P<0.01)、p65(实验组6.85±1.54,对照组1.0,t=6.564,P<0.001)�
- 石翔宇李树山王海涛韩煜赵洪波董懿新郭沛殷力
- 关键词：膝关节骨性关节炎软骨细胞
- 来自人骨髓间充质干细胞低表达微小RNA-127-5p的细胞外囊泡促进激素性股骨头坏死疾病进展
- 2023年
- 目的观察激素性股骨头坏死(SONFH)患者来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌的低表达微小RNA(miR)-127-5p细胞外囊泡(EVs)对正常BMSCs增殖及成骨分化的影响。方法骨髓来源于郑州大学第一附属医院10例需行全髋关节置换手术的患者(激素性股骨头坏死5例,非股骨头坏死5例),提取其中的BMSCs进行培养。使用差速离心法分离SONFH-BMSCs-EVs并用蛋白质印迹法(Western blot)和纳米颗粒跟踪分析(NTA)鉴定。将正常BMSCs中加入SONFH-BMSCs-EVs作为实验组,对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS),用噻唑蓝(MTT)法检测SONFH-BMSCs-EVs对BMSCs的增殖的影响。分别取两组第3代BMSCs,提取总RNA,使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-127-5p的表达差异。取第3代BMSCs进行成骨诱导,诱导过程中加入miR-127-5p mimic、miR-127-5p NC,分别用茜素红染色、MTT法、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性细胞凋亡检测,来检验miR-127-5p对BMSCs增殖及成骨分化的影响。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果SONFH-BMSCs-EVs为大小不均的圆形膜性囊泡,粒径范围在40~200 nm之间且表达CD63、CD9标志蛋白。共聚焦显微镜下显示EVs可以被BMSC摄取。MTT法显示实验组(0.98±0.20)增殖活性低于对照组(0.40±0.13,t=5.39,P<0.01)。RT-PCR显示实验组miR-127-5p的相关表达(1.03±0.21)明显低于对照组(0.58±0.12,t=4.05,P<0.01)。茜素红染色显示SONFH+miR-127-5p mimic(Smm)组成骨分化染出红色的阳性率远远高于SONFH(S)组。MTT法和Caspase-3/7活性细胞凋亡检测显示Smm组相较于S组,促进增殖(Smm组1.51±0.18,S组1.09±0.17,t=3.84,P<0.01),减少凋亡(Smm组0.59±0.12,S组1.02±0.12,t=5.56,P<0.01)。结论SONFH患者来源的BMSCs分泌的低表达miR-127-5p EVs可以抑制正常BMSCs增殖及成骨分化。
- 赵洪波李树山王海涛韩煜孔智恒石翔宇董懿鑫郭沛殷力
- 关键词：激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞
- 阿仑膦酸钠／磷酸钙骨水泥释放体系结构及体外释放规律的研究被引量：3
- 2012年
- 目的制备不同浓度的阿仑膦酸钠／磷酸钙骨水泥释放体系，观察阿仑膦酸钠对磷酸钙骨水泥结构的影响及复合释放体系体外释放的规律。方法分别制备1wt％、3wt％和5wt％的载阿仑膦酸钠磷酸钙骨水泥释放体系，分别采用傅氏转换红外线光谱分析仪、扫描电子显微镜和高效液相色谱仪研究载阿仑膦酸钠磷酸钙骨水泥的结构和药物体外释放规律。结果阿仑膦酸钠的载人没有改变磷酸钙骨水泥相成分的官能团；扫描电镜下各实验组微观结构相似，均呈珊瑚样状结晶体相互交织成网状结构；各组药物在同一时间点释放量（％）的差异无统计学意义（P〉0．05），各组药物的释放均分为48h前的突释阶段和48h后的缓释阶段，符合Higuchi机制扩散释放模型。结论阿仑膦酸钠的载入对磷酸钙骨水泥的晶体结构基本没有影响，且在磷酸钙骨水泥释放体系中能够持续、稳定的释放。
- 殷力徐晨阳李树山韩奇财娄超举杜振宁李红帅
- 关键词：磷酸钙骨水泥阿仑膦酸钠晶体结构
- 激素性股骨头坏死来源的细胞外囊泡对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响被引量：2
- 2022年
- 目的观察激素性股骨头坏死(SONFH)患者来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌的细胞外囊泡(SONFH-BMSCs-EVs)对正常BMSCs成骨分化的影响。方法骨髓来源于郑州大学第一附属医院的10例需行髋关节置换术的患者(激素性股骨头坏死5例, 非股骨头坏死5例), 提取其中的BMSCs进行培养。采用差速离心法分离SONFH-BMSCs-EVs。将正常BMSCs中加入SONFH-BMSCs-EVs共培养作为实验组, 对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS), 分别用噻唑蓝(MTT)法, 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性实验检测SONFH-BMSCs-EVs对BMSCs的增殖、凋亡的影响。取第3代BMSCs进行成骨诱导, 诱导过程中实验组加入SONFH-BMSCs-EVs, 再进行茜素红染色, 检测其对BMSCs成骨分化的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR), 蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路上成骨相关因子基因、蛋白表达。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果 SONFH-BMSCs-EVs为大小不均的圆形膜性囊泡, 粒径范围在40~200 nm之间, 且表达CD63、CD9标志蛋白。共聚焦显微镜下显示细胞外囊泡可以被BMSCs摄取。MTT法检测BMSCs增殖能力实验组(0.5±0.1)明显低于对照组(1.0, t=11.160, P<0.01)。Caspase-3/7活性实验检测BMSCs凋亡, 实验组(1.4±0.2)明显高于对照组(1.0), (t=3.458, P<0.01)。茜素红染色结果显示实验组的红染染色阳性率显著小于对照组。Western blot结果显示Wnt/β-catenin信号通路上关键因子蛋白表达分别为β-catenin(实验组为0.68±0.10, 对照组为1.37±0.17, t=6.960, P<0.01)、Runt相关基因2(Runx2, 实验组为0.66±0.13, 对照组为1.30±0.16, t=6.240, P<0.01), 差异均有统计学意义。RT-PCR检测实验组β-catenin、Runx2相对基因表达分别为0.59±0.12、0.66±0.08, 差异有统计学意义(t=6.960、6.240, P均<0.01)。结论激素性股骨头坏死患者来源的BMSCs分泌的细胞外囊泡可以抑制正�
- 孔智恒李树山王海涛石翔宇赵洪波殷力
- 关键词：骨髓间充质干细胞激素性股骨头坏死成骨分化
- 人工全膝关节表面置换术后近期疗效分析被引量：2
- 2012年
- 目的探讨人工全膝表面关节置换术后的近期疗效。方法根据纽约特种外科医院膝关节评分表（HSS），对60例（68膝）行人工表面全膝关节置换患者进行术前和术后3—4个月评分，并将所得数据进行分析比较。结果60例患者全部获随访。膝关节HSS评分由术前（36．3±7．1）分提高至术后的（88．6±7．4）分，优55膝，良9膝，优良率约为94％。结论人工全膝关节表面置换术后总体近期疗效满意。
- 杜振宁殷力韩奇财李树山娄超举徐晨阳李弘帅
- 关键词：近期疗效
- 骨形成蛋白-2转染兔骨髓基质细胞修复软骨缺损的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察骨形成蛋白．2（BMP-2）基因转染兔骨髓基质细胞（MSCs）复合藻酸钙修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法取4周龄的新西兰兔骨髓细胞，体外培养得到MSCs。选用24只成年新西兰兔，在两侧股骨髁非负重区造成全层软骨缺损模型，A组（实验组）植入BMP-2转染的MSCs＋藻酸钙，B组（对照组Ⅰ）植入空质粒转染的MSCs＋藻酸钙，C组（对照组Ⅱ）植入不含MSCs的藻酸钙，D组（对照组Ⅲ）旷置。12周后，观察软骨缺损修复情况及组织学评价。结果实验组修复组织基本光滑，有大量Ⅱ型胶原蛋白表达，3个对照组修复组织Ⅱ型胶原蛋白表达量少，仍有明显缺损。实验组和3个对照组组织学评分差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BMP-2转染兔MSCs修复软骨缺损效果优于其他对照组。
- 殷力娄超举韩奇财杜振宁李树山徐晨阳李弘帅赵国强
- 关键词：软骨骨形成蛋白-2骨髓基质细胞基因转染
