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BC022687基因原核及真核重组质粒的构建及表达: 目的:构建BC022687(N端)的原核表达载体，诱导该质粒在大肠杆菌中表达并纯化表达融合蛋白;构建BC022687（全长）基因真核表达载体，探讨融合蛋白在细胞内表达及定位。　　方法:1.以健康成年雄性小鼠的睾丸组织为来...; 李红飞; 关键词：男性不育重组质粒蛋白纯化

ARM结构的缺失对SPAG6在哺乳细胞中定位的影响: 2015年; 目的：本研究构建精子相关抗原6（SPAG6）基因全长及6个不同长短ARM序列的真核表达载体pEGFP-N2-SPAG6-△ARM，并使其在CHO细胞中表达，观察全长及6个ARM结构缺失后对真核细胞CHO细胞中SPAG6蛋白定位的影响。方法利用NCBI数据库，寻找小鼠SPAG6蛋白的保守功能区，分析全长蛋白序列，检索出SPAG6有7个ARM区域。利用PCR技术扩增出6个缺失不同ARM结构的SPAG6 cDNA，测序后亚克隆至携带绿色荧光蛋白基因的pEGFP-N2真核表达载体中，对阳性克隆进行酶切和测序鉴定，将构建的重组质粒转染到CHO细胞中，分别提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察7个不同SPAG6/GFP融合蛋白在CHO细胞内的定位。结果酶切和测序鉴定表明，全长及6个缺失不同长短ARM结构的真核表达质粒构建成功，转染实验发现重组质粒均能够在CHO细胞中表达，但仅全长表达产物定位于微管，缺失任何一个ARM区域都可影响在细胞中的微管定位。结论SPAG6在哺乳动物细胞内的正确定位依赖于全长。该研究为进一步研究SPAG6蛋白的结构与功能奠定基础。; 汪智琼张玲石玉琴李红飞张志兵; 关键词：不育

一种座式宣传横幅张拉装置: 本实用新型涉及公共宣传工具领域，具体的说涉及一种座式宣传横幅张拉装置，它包括第一卡板、第二卡板、连接轴、螺母、照明灯带、照明灯罩、第一脚杆、第二脚杆、卡紧旋钮、支脚、风铃板、软绳、风铃条；所述第一卡板呈长方体薄板状，第一...; 李红飞苏传政李仁敏王世鑫李慈森; 文献传递

精子发生和运动相关蛋白的研究新进展: 2014年; 近年来男性不育症的发病率有不断上升趋势，在男性不育的各种原因中，精子发生障碍是一个重要因素，其中遗传因素缺陷导致的精子发生障碍是一个重要机制。男性精子发生是一个复杂的细胞分化过程，受到诸多有序表达基因的调控，其中任何一个基因发生缺失、突变或表达异常都可能引起精子生成障碍，导致男性不育。近年来随着小鼠基因敲除技术的广泛运用，越来越多调节精子发生的基因被发现，据报道目前有超过2300个基因参与。; 汪智琼李红飞张玲刘晙玭平光伦张志兵; 关键词：精子发生

BC022687基因真核表达质粒的构建及在CHO细胞内的蛋白表达和定位被引量：1: 2013年; 目的:BC022687可能是调节纤毛形成的蛋白。本研究构建BC022687基因真核表达载体并探讨融合蛋白在细胞内表达及定位。方法:以小鼠睾丸cDNA文库为模板,PCR扩增全长BC022687编码序列,测序后亚克隆至携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的pEGFP-C1真核表达载体中。将构建的重组质粒转染到CHO细胞中,提取细胞蛋白进行Western印迹检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察BC022687/GFP融合蛋白在CHO细胞内定位。结果:翻译BC022687蛋白的cDNA序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小950 bp。Western印迹检测到相对分子质量约为64 000的融合蛋白表达。BC022687/GFP融合蛋白在细胞内定位以细胞质为主,并在中心体、纤毛形成的模板表达。结论:成功构建BC022687全长基因真核表达载体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。; 李红飞张玲石玉琴汪智琼江高峰宋世震付国庆张志兵; 关键词：中心体 CHO细胞

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李红飞