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李红飞
作品数:
5
被引量:1
H指数:1
供职机构:
武汉科技大学
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发文基金:
湖北省自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张志兵
武汉科技大学医学院公共卫生学院
汪智琼
武汉科技大学医学院公共卫生学院
张玲
武汉科技大学医学院公共卫生学院
石玉琴
武汉科技大学医学院公共卫生学院
付国庆
武汉科技大学医学院公共卫生学院
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结构域
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精子
机构
5篇
武汉科技大学
1篇
华中科技大学
作者
5篇
李红飞
3篇
张玲
3篇
汪智琼
3篇
张志兵
2篇
石玉琴
1篇
宋世震
1篇
江高峰
1篇
付国庆
传媒
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中国男科学杂...
1篇
中华男科学杂...
年份
1篇
2017
1篇
2015
1篇
2014
2篇
2013
共
5
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BC022687基因原核及真核重组质粒的构建及表达
目的:构建BC022687(N端)的原核表达载体,诱导该质粒在大肠杆菌中表达并纯化表达融合蛋白;构建BC022687(全长)基因真核表达载体,探讨融合蛋白在细胞内表达及定位。 方法:1.以健康成年雄性小鼠的睾丸组织为来...
李红飞
关键词:
男性不育
重组质粒
蛋白纯化
ARM结构的缺失对SPAG6在哺乳细胞中定位的影响
2015年
目的:本研究构建精子相关抗原6(SPAG6)基因全长及6个不同长短ARM序列的真核表达载体pEGFP-N2-SPAG6-△ARM,并使其在CHO细胞中表达,观察全长及6个ARM结构缺失后对真核细胞CHO细胞中SPAG6蛋白定位的影响。方法利用NCBI数据库,寻找小鼠SPAG6蛋白的保守功能区,分析全长蛋白序列,检索出SPAG6有7个ARM区域。利用PCR技术扩增出6个缺失不同ARM结构的SPAG6 cDNA,测序后亚克隆至携带绿色荧光蛋白基因的pEGFP-N2真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切和测序鉴定,将构建的重组质粒转染到CHO细胞中,分别提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察7个不同SPAG6/GFP融合蛋白在CHO细胞内的定位。结果酶切和测序鉴定表明,全长及6个缺失不同长短ARM结构的真核表达质粒构建成功,转染实验发现重组质粒均能够在CHO细胞中表达,但仅全长表达产物定位于微管,缺失任何一个ARM区域都可影响在细胞中的微管定位。结论SPAG6在哺乳动物细胞内的正确定位依赖于全长。该研究为进一步研究SPAG6蛋白的结构与功能奠定基础。
汪智琼
张玲
石玉琴
李红飞
张志兵
关键词:
不育
一种座式宣传横幅张拉装置
本实用新型涉及公共宣传工具领域,具体的说涉及一种座式宣传横幅张拉装置,它包括第一卡板、第二卡板、连接轴、螺母、照明灯带、照明灯罩、第一脚杆、第二脚杆、卡紧旋钮、支脚、风铃板、软绳、风铃条;所述第一卡板呈长方体薄板状,第一...
李红飞
苏传政
李仁敏
王世鑫
李慈森
文献传递
精子发生和运动相关蛋白的研究新进展
2014年
近年来男性不育症的发病率有不断上升趋势,在男性不育的各种原因中,精子发生障碍是一个重要因素,其中遗传因素缺陷导致的精子发生障碍是一个重要机制。男性精子发生是一个复杂的细胞分化过程,受到诸多有序表达基因的调控,其中任何一个基因发生缺失、突变或表达异常都可能引起精子生成障碍,导致男性不育。近年来随着小鼠基因敲除技术的广泛运用,越来越多调节精子发生的基因被发现,据报道目前有超过2300个基因参与。
汪智琼
李红飞
张玲
刘晙玭
平光伦
张志兵
关键词:
精子发生
BC022687基因真核表达质粒的构建及在CHO细胞内的蛋白表达和定位
被引量:1
2013年
目的:BC022687可能是调节纤毛形成的蛋白。本研究构建BC022687基因真核表达载体并探讨融合蛋白在细胞内表达及定位。方法:以小鼠睾丸cDNA文库为模板,PCR扩增全长BC022687编码序列,测序后亚克隆至携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的pEGFP-C1真核表达载体中。将构建的重组质粒转染到CHO细胞中,提取细胞蛋白进行Western印迹检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察BC022687/GFP融合蛋白在CHO细胞内定位。结果:翻译BC022687蛋白的cDNA序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小950 bp。Western印迹检测到相对分子质量约为64 000的融合蛋白表达。BC022687/GFP融合蛋白在细胞内定位以细胞质为主,并在中心体、纤毛形成的模板表达。结论:成功构建BC022687全长基因真核表达载体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
李红飞
张玲
石玉琴
汪智琼
江高峰
宋世震
付国庆
张志兵
关键词:
中心体
CHO细胞
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