李赤波
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海医科大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠SRS白血病病毒前病毒DNA片段的分子克隆被引量：1
- 1993年
- 从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进行扩增,扩增产物用BamHⅠ酶切后与碱性磷酸单酯酶处理的pUC_(19)载体连接,并转化大肠杆菌JM_(103),得到含约3.4kb前病毒DNA片段插入子的重组质粒,并经Southern Blot证实,定名为pSF_(12),该克隆的SRSV DNA片段含有部分的env和pol基因。pSF_(12)和pSF_(11)构成SRSV的完整基因克隆。
- 李赤波郑葆芬
- 关键词：白血病病毒分子克隆
- 聚合酶链反应中引物的计算机辅助筛选
- 1994年
- 利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身及引物之间的同源性。由此我们设计了ＳＲＳ小鼠白血病病毒的引物，成功地扩增了３．４ｋｂ的大片段目的基因。实验结果证明了由此法筛选出来的引物的有效性和特异性。
- 李赤波吴春根郑葆芬
- 关键词：聚合酶链反应引物计算机
