杨一峻
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：遵义医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：贵州省自然科学基金贵州省科技厅科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胆固醇致人血管内皮细胞DNA损伤被引量：7
- 2012年
- 本文研究胆固醇是否通过氧化应激机制损伤人内皮细胞DNA.实验用12.5 mg/L,25mg/L,50 mg/L胆固醇作用于人内皮细胞12 h,用免疫荧光法观察到不同浓度的胆固醇均可诱导细胞内γH2AX形成焦点,随着胆固醇浓度的增加,γH2AX焦点的荧光强度也逐渐增强.利用Western印迹及流式细胞术检测到细胞内γH2AX的量和ROS水平也随胆固醇浓度增大而增加.彗星电泳实验检测到细胞内拖尾DNA量随胆固醇浓度逐渐增加,DNA损伤加重.用抗氧化剂10 mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)预作用细胞1 h后,再用50 mg/L胆固醇作用细胞12 h,细胞内γH2AX焦点的荧光强度明显减弱,γH2AX量减少,ROS的水平下降.结果表明,胆固醇可诱导人脐静脉内皮细胞中ROS升高,导致DNA损伤.
- 汪慧星杨一峻钱民章
- 关键词：DNA损伤胆固醇活性氧人脐静脉内皮细胞
- 绞股蓝总苷逆转胆固醇诱导的血管平滑肌细胞表型转化被引量：5
- 2015年
- 目的:研究绞股蓝总苷(Gypenosides,GP)对胆固醇所致人血管平滑肌细胞(Human Vascular Smooth Muscle Cells,HVSMCs)表型转化的影响。方法:体外培养人VSMCs株,分别用1.0、10.0、100.0μg·m L-1的GP预处理1 h后,再加入50.0 mg·L-1的胆固醇处理48 h。透射电镜观察细胞超微结构改变;Western blot法检测VSMCs中α-平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle alpha-Actin,α-SMA)、平滑肌22α(Smooth Muscle 22 alpha,SM22α)及表皮调节素(Epiregulin)蛋白表达;实时定量PCR检测VSMCs中生长抑制同源基因(Growth arrest-specific homeobox,Gax)基因的表达。结果:与正常对照组比较,胆固醇组各指标差异均有统计学意义(P<0.01);与胆固醇组比较,10.0、100.0μg·m L-1GP可逆转胆固醇所致细胞超微结构的改变,增加细胞收缩表型标志蛋白α-SMA、SM22α的表达及减少合成表型标志蛋白Epiregulin的表达(P<0.05),并能减少胆固醇所致的细胞增殖(P<0.05)。GP可逆转胆固醇所致的转录因子Gax的减少(P<0.05)。结论:GP可逆转胆固醇所致的VSMCs表型转化,并可能与增加转录因子Gax的表达有关。
- 束波杨一峻钱民章
- 关键词：绞股蓝总苷血管平滑肌细胞胆固醇表型转化
- 胆固醇诱导人血管平滑肌细胞表型转化被引量：3
- 2014年
- 目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌22α(SM22α)mRNA的表达;采用Western blot法检测胆固醇对VSMC中α-SMA、SM22α及单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白(MCPIP)表达的影响;CCK-8法检测VSMC增殖。结果 (12.5、25.0、50.0)mg/L胆固醇作用VSMC 48 h较对照组相比,α-SMA及SM22αmRNA水平及蛋白水平表达均降低(P<0.05),50.0 mg/L胆固醇作用后表达水平最低,存在剂量依赖效应;用50.0 mg/L胆固醇分别作用VSMC 48、72 h后,α-SMA及SM22αmRNA及蛋白表达与对照组相比均降低(P<0.05)。与对照组相比,胆固醇作用均明显促进VSMC增殖(P<0.05)。50.0 mg/L胆固醇作用VSMC48 h可诱导MCPIP蛋白表达增加。结论胆固醇作用VSMC后可降低收缩型标志蛋白α-SMA及SM22α的表达、促进VSMC增殖,提示胆固醇可诱导VSMC表型转化。
- 束波杨一峻钱民章
- 关键词：平滑肌细胞胆固醇表型转化
- MCPIP1介导MCP-1诱导的VSMC增殖
- 本文分为二部分：
第一部分：MCPIP1介导MCP-1诱导的VSMC增殖
目的:探讨MCPIP1是否介导MCP-1诱导的VSMC增殖。
方法:培养并鉴定人血管平滑肌细胞(hVSMC);用1、10、100...
- 杨一峻
- 关键词：血管平滑肌细胞胆固醇内皮细胞损伤VSMC增殖细胞迁移
- 文献传递
- MCPIP1介导MCP-1诱导的血管平滑肌细胞增殖被引量：5
- 2013年
- 本文旨在探讨单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白1(monocyte chemotactic protein-1 induced protein-1,MCPIP1)是否介导单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖。用Real-time PCR及Western blot检测体外培养的VSMC中MCP-1诱导的MCPIP1表达;用siRNA沉默VSMC中MCPIP1基因后,用细胞计数板记录细胞数量,用CCK-8试剂盒检测细胞活力,用EdU试剂盒检测DNA合成率,用流式细胞术检测S期细胞数量,用Real-time PCR检测MCP-1或血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导的c-fos mRNA水平变化。结果显示,MCP-1提高VSMC中MCPIP1 mRNA水平,并呈剂量和时间依赖性地上调MCPIP1蛋白表达。和MCP-1处理的VSMC相比,MCPIP1基因沉默后VSMC的细胞数量、细胞活力及细胞DNA合成率均明显降低,S期细胞数量下降;MCPIP1基因沉默可抑制MCP-1或PDGF对c-fos mRNA的上调作用。以上结果提示,MCPIP1介导了MCP-1诱导的VSMC增殖,其机制涉及对c-fos表达的上调。
- 杨一峻吴柳松束波钱民章
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1平滑肌细胞增殖C-FOS基因
- 胆固醇致内皮细胞损伤对平滑肌细胞增殖和迁移的促进作用被引量：2
- 2013年
- 目的观察胆固醇损伤人血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)后能否影响血管平滑肌(vascular smooth muscle,VSMC)的增殖与迁移。方法用12.5、25.0、50.0 mg/L 3个浓度的胆固醇作用体外培养的HUVEC 24 h后,再用培养内皮细胞的培养基继续培养VSMC 24 h,CCK-8、划痕实验检测VSMC增殖与迁移;用12.5、25.0、50.0 mg/L的胆固醇作用共培养的HUVEC、VSMC 24 h,用Transwell检测VSMC迁移。结果 25.0、50.0 mg/L胆固醇作用HUVEC后的培养基与对照组相比(1.37±0.01),明显促进VSMC增殖(1.53±0.06)、(1.54±0.10)(P<0.05);12.5、25.0、50.0 mg/L胆固醇作用HUVEC后的培养基与对照组相比(33.24±0.43)均能促进VSMC细胞迁移[(269.10±3.78)、(272.79±4.69)、(458.69±4.78),P<0.01]。胆固醇作用共培养的HUVEC、VSMC 24 h后,促进VSMC迁移[(175.00±4.63)、(182.00±4.13)、(207.00±5.59)],与对照组相比(101.00±2.33)差异明显(P<0.01)。结论胆固醇诱导HUVEC损伤后能够促进VSMC增殖与迁移。
- 杨一峻罗洁钱民章
- 关键词：动脉粥样硬化血管内皮细胞血管平滑肌细胞胆固醇
