杭化莲 作品数:31 被引量:69 H指数:4 供职机构: 上海交通大学医学院附属仁济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南京市医学科技发展项目 上海市浦江人才计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
80%门静脉结扎后肝脏组织中MMP-9的表达与肝再生作用的相关性研究 被引量:1 2011年 目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在大鼠80%门静脉分支结扎模型中大鼠增生肝脏组织中的表达及其与肝再生作用的关系。方法:健康SD雄性大鼠48只,随机平均分成假手术对照组(Sham)和门静脉结扎实验组(PVL)。观察术后1、3、7和14d保留侧肝叶重量/体重比值;下腔静脉采血后检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)值的变化;光镜下观察保留侧肝脏组织的病理形态变化;用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,用免疫印记法检测MMP-9的表达,并进行统计分析。结果:80%门静脉分支结扎后,结扎侧肝叶呈进行性萎缩,保留侧肝叶重量/体重比值逐渐增加,7d达"平台期";与对照组明显不同,PVL组的ALT、AST的值在1h达到高峰,7d后回到正常水平;保留侧肝脏组织中PCNA阳性细胞计数与对照组比较,3d开始表达增强(P<0.05),7d以后逐渐恢复至正常水平(P>0.05);保留侧肝叶MMP-9蛋白的表达在术后3d开始增加,术后7d达到高峰。结论:MMP-9蛋白的表达在80%门静脉结扎后大鼠肝再生过程中发挥重要作用。 章世海 储建 杭化莲 禹亚彬 卞建民关键词:肝再生 基质金属蛋白酶 原位肝移植治疗成人尼曼匹克病一例 被引量:3 2014年 1 临床资料
患者女,23岁.因渐进性全身水肿伴皮肤巩膜黄染半年于2013年10月入院.患者幼年时即诊断为尼曼匹克病(内脏型),后未接受特殊治疗,无明显临床症状,入院前半年因劳累后开始出现下肢水肿,后病情逐渐加重,陆续出现腹胀,皮肤巩膜黄染等表现,当地医院查血常规提示三系降低,腹部超声提示腹腔积液,肝硬化,巨脾.其姐姐同为尼曼匹克病,父母为SMPD1基因突变携带者.入院查体:全身皮肤巩膜明显黄染,腹部膨隆,无压痛及反跳痛,肝肋下2 cm,脾脏重度肿大,肋下25 cm,光滑无触痛,移动性浊音阳性,双下肢重度水肿. 封明轩 杭化莲 张明 夏强关键词:尼曼匹克病 肝移植 永生化肝细胞系的建立及其生物学特性研究 第一部分成人原代肝细胞的分离、培养、冻存 目的:本研究主要目的是建立一种稳定的成人原代肝细胞分离、培养、冻存方法,为建立永生化肝细胞系提供充足的肝细胞来源,最终为肝细胞移植、生物人工肝支持系统治疗急慢性肝病以及肝细胞体... 杭化莲关键词:生物学特性 骨髓间充质干细胞在肝脏疾病治疗中的应用 被引量:5 2012年 原发性肝癌大多于肝纤维化、肝硬化的基础上发生,最终导致肝功能衰竭和全身转移。手术切除是肝癌的首选治疗方式,介入治疗和肝移植也是治疗终末期肝癌的手段。然而,肝部分切除和介入治疗往往制约于肝功能的失代偿。肝移植由于缺乏供体和价格昂贵临床亦难以广泛开展。近十多年来,骨髓间充质干细胞(BMSC)研究在医学领域取得了令人瞩目的成就。本文就骨髓间充质干细胞在肝脏疾病治疗中的应用作一综述。 储建 杭化莲 禹亚彬 章世海 卞建民关键词:骨髓间充质干细胞 肝癌 肝再生 肿瘤转移 慢加急性肝衰竭肝移植术后早期并发播散性曲霉病一例 2022年 慢加急性肝衰竭肝移植术后感染性并发症发生风险较高,抗排斥治疗进一步增加了感染风险。侵袭性曲霉感染是实体器官移植后少见的并发症,影像学表现不典型,临床上无特异诊断标志物,对及时诊断和治疗提出了巨大的挑战。 钱永兵 杭化莲 张灏旻 邓羽霄 陈小松 夏强关键词:慢加急性肝衰竭 肝移植 侵袭性肺曲霉病 肝细胞核因子4α抑制人肝癌细胞株血管内皮生长因子表达和人脐静脉内皮细胞小管形成 2017年 背景:肝细胞核因子4α(HNF4α)在肝脏的发育过程中发挥重要作用。研究证实HNF4α与肝细胞癌(HCC)的发生相关。然而HNF4α对人肝癌细胞株血管内皮生长因子(VEGF)表达和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成的调控作用尚不明确。目的:探讨HNF4α对人肝癌细胞株VEGF表达和HUVEC小管形成的影响。方法:构建过表达HNF4α的慢病毒,并转染人肝癌细胞株HepG 2和SMMC-7721(实验组),以转染慢病毒空载体和未转染的细胞分别作为阴性对照组和空白对照组。分别以qRT-PCR、蛋白质印迹法检测HNF4α、VEGF mRNA和蛋白表达。将HUVEC与HepG2和SMMC-7721细胞不含血清的条件培养基共培养,检测小管形成数量。结果:成功构建了过表达HNF4α的HepG2和SMMC-7721稳转株。与阴性对照组和空白对照组相比,实验组HepG 2和SMMC-7721细胞中VEGF mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),HUVEC小管形成数量明显减少(P<0.05)。结论:HNF4α能明显抑制人肝癌细胞株中VEGF表达以及HUVEC小管的形成。 汪海天 张勇 吴宁 周琎 杭化莲 马永 卞建民关键词:肝细胞核因子4Α 肝细胞 血管内皮生长因子类 人脐静脉内皮细胞 亲水性胆盐对减轻大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的作用 被引量:1 2008年 目的探讨亲水性胆盐对减轻大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的作用。方法应用大鼠原位肝移植胆道外引流模型,将192只SD大鼠随机分为4组,每组供、受者各24只。各组供者在供肝切取前30min经阴茎背静脉注射不同的试剂,对照组注射1ml生理盐水;疏水性胆盐(TDc)组注射牛磺脱氧胆酸钠40μmol/kg;高、低浓度亲水性胆盐(TUDC)组分别注射牛磺熊去氧胆酸钠8()和40μmol/kg。供肝取出后置于4℃的平衡液中保存2h再植入受者。移植肝再灌注后1、3、7和(或)14d时,采用全自动生化分析仪分别检测受者血清中碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、胆红素总量、直接胆红素和胆汁中y谷氨酰转移酶和葡萄糖的含量。移植肝再灌注后1d时,在光镜下观察肝内胆管上皮细胞的病理学改变,在荧光显微镜下观察肝内胆管上皮细胞的凋亡情况。结果高、低浓度TUDC组各项观察指标均低于对照组和TDC组(P(0.05),且肝内胆管炎症细胞的浸润、上皮细胞的损伤以及细胞的凋亡等程度均轻于对照组和TDC组(P(0.05);与低浓度TUDC组比较,高浓度亲水性胆盐组短期内可见各项观察指标均有所降低,但远期各指标的比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。TDC组术后各项观察指标均高于对照组(P〈0.05)。结论在供肝获取前,供者静脉注射亲水性胆盐能减轻大鼠移植肝肝内胆管的冷保存再灌注损伤。 杭化莲 仇毓东 吴亚夫 毛谅 朱新华 丁义涛关键词:肝移植 再灌注损伤 牛磺熊去氧胆酸 肝移植治疗慢加急性肝衰竭研究进展 被引量:9 2021年 慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)指在慢性肝病的基础上由各种损伤因素引发的急性肝功能失代偿。该病常伴肝外器官衰竭且短期死亡率极高。目前ACLF缺乏有效的治疗手段,肝移植手术是唯一有潜在治愈概率的治疗方式。肝移植的术前评估十分重要。我国由于乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染群体基数较大,需着重考虑HBV相关ACLF的术前情况,并根据COSSH-ACLF、CLIF-ACLF等评分对患者术前情况进行评估。手术时机方面,在患者处于ACLF2级时进行肝移植也许能够提高患者生存获益,但相关结论需要进一步的研究讨论。围手术期主要以病因处理以及多器官衰竭处理为主。术中则需要注意合理安排供体修整和受体游离的时间安排。术后除了肝移植常规并发症外,还需注意感染、肝性脑病、器官衰竭等ACLF相关并发症的处理。术前与术后的器官衰竭情况均与患者长期预后相关。该文结合笔者所在科室大量ACLF肝移植实际工作经验,在查阅大量文献的基础上,就ACLF肝移植术前评估、手术时机选择、围手术期管理、术中注意事项、术后并发症以及长期预后作一综述。 张天翼 于也萍 夏强 杭化莲关键词:慢加急性肝衰竭 肝移植 多器官衰竭 死亡率 并发症 兔慢性肝损害急性肝衰竭动物模型的建立 被引量:4 2011年 目的建立新西兰兔的慢加急性肝衰竭(ACLF)动物模型。方法将75只新西兰兔随机分为实验组(n=70)与对照组(n=5),实验组采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射建立兔代偿性肝纤维化模型,每周2次,通过体质量及谷丙转氨酶(ALT)/谷草转氨酶(AST)改变调整药物剂量,共10周,获得48只肝纤维化新西兰兔,在此基础上将动物随机分为4组(n=12),I组:继续腹腔注射CCl4,lI组:静脉注射D-氨基半乳糖(D—Gal)0.65g/kg,III组:静脉注射D—Gal0.70g/kg,1V组:静脉注射D一氨基半乳糖0.75g/kg,观察各组动物的一般情况、生化指标及病理改变。结果与对照组比较,肝纤维化实验组兔10周时ALT、AST、ALB、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、m型前胶原(PC-III)差异均有统计学意义(P〈0.05),可观察到肝纤维化的病理表现,出现典型的假小叶,在肝纤维化基础给予D-Gal后,I组动物全部存活,生化指标轻度改变;11组动物死亡率为33.3%(4/12),生化指标仅出现一过性的改变;III组动物死亡率为83.3%(10/12),平均存活时间为(53.00±25.69)h,给药后12h生化指标及临床表现出现改变,48h达到高峰,病理显示肝脏大块坏死;IV组动物均死于肝衰竭,平均存活时间为(32.70±17.46)h,肝损害出现时间早,损伤剧烈。结论对CCl4诱导的肝纤维化新西兰兔给予D—Gal急性攻击可建立ACLF模型。其中给予D—Gal0.70g/kg的模型稳定性好,能较大程度上的模拟临床上ACLF的病理生理过程。 顾广祥 施晓雷 杭化莲 丁义涛关键词:肝衰竭 肝纤维化 HNF4α真核表达载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达 被引量:2 2012年 目的:构建pcDNA3.1/HNF4α重组质粒,转染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs),并检测其在HUMSCs中的表达。方法:采用基因重组技术构建载体pcDNA3.1/HNF4α,经酶切和DNA测序鉴定,通过脂质体法转染HUMSCs后,进行RT-PCR和Western blot分析,免疫荧光检测转染后1周肝特异性生化指标。结果:成功构建真核表达质粒pcDNA3.1/HNF4α,转染人脐带间充质干细胞后,RT-PCR示转染后HNF4αmRNA表达,Western blot分析见HNF4α蛋白表达,免疫荧光示转染1周后HNF4α促进了HUMSCs向肝细胞方向分化。结论:成功构建真核表达载体,并在HUMSCs中正确表达,为进一步研究HNF4α在干细胞向肝细胞分化中作用提供了实验基础。 禹亚彬 杭化莲 卞建民关键词:质粒构建 人脐带间充质干细胞 肝细胞分化