林成招 作品数:14 被引量:87 H指数:6 供职机构: 南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室 更多>> 发文基金: 教育部“优秀青年教师资助计划” 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响 被引量:14 2005年 本实验研究了大豆异黄酮对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响。实验设3组:空白对照组、50μg/ml大豆黄酮及15μg/ml染料木素组。采用放射免疫测定法(RIA)检测了胞内cAMP的浓度、腺苷酸环化酶(adenylatecyclase,AC)和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)的活性,用(γ-32P)ATP掺入法测定cAMP依赖性PKA的活性,半定量RT-PCR法分析cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)mRNA表达的变化。结果表明:在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的cAMP浓度分别比对照组升高了9.5%和11.0%(P<0.05);10min时,分别比对照组升高31.0%和40.3%(P<0.01)。3组细胞的AC活性在处理时间内没有明显变化。但在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的PDE活性分别降至对照组的71.8%和71.6%(P<0.05)。处理后20min,大豆黄酮组和染料木素组细胞PKA活性分别上升到对照组的125.8%和122.3%(P<0.05);到40min时仍维持在高水平。大豆黄酮组和染料木素组细胞CREBmRNA的表达量在处理后3h分别比对照组增加31.6%和51.1%(P<0.05);6h后开始下降。这些结果提示,大豆异黄酮能够激活大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径;而且是通过抑制磷酸二酯酶的活性,导致胞内cAMP浓度升高而实现的。 林成招 马海田 邹思湘 王国杰 陈伟华 韩正康关键词:大豆黄酮 染料木素 大豆异黄酮抑制大鼠乳腺癌细胞增殖的研究 被引量:8 2004年 应用MTT法、3H-TdR掺入法及流式细胞术,研究了两种主要的大豆异黄酮棗大豆黄酮和染料木素对乳腺癌细胞增殖的抑制效应,并探讨了其作用机理。结果表明:两种大豆异黄酮均能够抑制乳腺癌细胞的生长,并呈明显的剂量和时间依赖效应;降低3H-TdR掺入量,抑制癌细胞DNA的合成;增加S期细胞的比例,阻滞细胞的周期活动;但未引起明显的细胞凋亡。 林成招 邹思湘 陈伟华关键词:大豆异黄酮 乳腺癌细胞 DNA合成 细胞周期 牛乳铁蛋白的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立 被引量:13 2003年 用牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferrin,BLf)、纯品免疫新西兰白兔制得兔抗BLf的多克隆抗体,琼扩效价最高为1:64。经ELISA方法检测,该抗体与牛乳中的主要蛋白质:α-乳清蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白以及酪蛋白之间不存在免疫交叉性,说明抗体特异性良好。以BLf纯品为包被抗原,自制抗体为一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG为二抗,邻苯二胺(OPD)为底物,建立了BLf的竞争抑制性ELISA方法。包被抗原及抗体的浓度均由方阵稀释实验确定。所建立的ELISA方法孔间误差1.6%,板间误差4.3%,灵敏度25μg/L,检测范围25~800μg/L。标准曲线线性方程(Logit)Y=-1.488 lg C+3.811 6,相关系数R=0.990。 林成招 张彦明 邹思湘 陈伟华关键词:牛乳铁蛋白 多克隆抗体 食品 二花脸母猪泌乳期乳中乳铁蛋白分泌规律的研究 被引量:1 2004年 应用我们已建立的酶联免疫吸附分析 (ELISA)方法 ,研究二花脸母猪泌乳期乳中乳铁蛋白 (Lactoferrin,Lf)的分泌规律。采集分娩后的4头二花脸母猪在泌乳起始 48h内的连续乳样 (每小时采样 1次 )进行测定。结果显示 :刚分娩时乳中Lf浓度最高 ,为 1 2 66 59μg/mL ;随后开始下降 ,前 2 0h内下降较快 ,2 0h之后下降变缓 ;至第 48h ,浓度降为第 1小时的 53 %。对处于泌乳期前 30d内的 4头二花脸母猪连续乳样 (每天采集 1次 )和 1 0 2头二花脸母猪散点乳样 (每天随机采样 )的测定结果表明两者Lf的分泌规律基本相似 :分娩第 1天 ,Lf浓度最高 ;1周内迅速下降 ,第 7天降至第 1天的 2 5 % ;1周后下降缓慢 ;2周后趋于平稳。 林成招 张彦明 邹思湘关键词:ELISA 泌乳期 乳铁蛋白 大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞cAMP/PKA信号通路的影响 应用放射免疫测定、同位素掺入和RT-PCR等方法,检测了大豆异黄酮处理后SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内环腺苷酸(cAMP)的浓度、腺苷酸环化酶(AC)、磷酸二酯酶(PDE)和cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)的活性以及cAM... 林成招 马海田 邹思湘 陈伟华关键词:大豆黄酮 染料木素 乳腺癌细胞 信号通路 细胞增殖 文献传递 大豆黄酮和染料木素对大鼠乳腺癌细胞体外生长的抑制试验 被引量:3 2004年 林成招 邹思湘关键词:大豆黄酮 染料木素 乳腺癌 体外生长 细胞生长 大豆异黄酮植物雌激素对大鼠乳腺癌细胞和小肠上皮细胞生长的影响及其机理研究 该研究以大鼠乳腺癌细胞系(SHZ-88)为研究对象,观察了2种大豆异黄酮(大豆黄酮、染料木素)对其体外增殖的影响,并从DNA合成、细胞周期与凋亡以及cAMP/PKA信号通路等方面分析了二者抑癌的作用机理.同时,建立了大鼠... 林成招关键词:大豆黄酮 染料木素 肝素亲和柱分离纯化乳铁蛋白 被引量:9 2003年 林成招 张彦明 陈伟华 邹思湘关键词:色谱柱 纯化 乳铁蛋白 大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响 被引量:18 2005年 分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究了 0、0 1、0 5、1和 5μg·mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响, 并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化。结果显示: 100ng·mL-1的大豆异黄酮 (大豆黄酮、染料木素 ) 能够提高该细胞3H TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性, 提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性; 0 1和 0 5ng·mL-1的大豆黄酮和 0 5和 1 0ng·mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用, 而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响。 林成招 马海田 邹思湘 陈伟华 王国杰关键词:大豆异黄酮 小肠上皮细胞 葡萄糖 氨基酸 小肠吸收 蛋白酶解物对仔猪胃窦胃泌素分泌的影响 被引量:4 2005年 为研究食物蛋白源活性肽对仔猪胃窦胃泌素分泌的影响,通过模拟猪胃内消化环境,制备了大豆蛋白酶解产物、酪蛋白酶解产物和面筋蛋白酶解产物的溶液和对照液,对 10 日龄仔猪离体胃窦进行体外灌流。结果表明,3 种蛋白的胃蛋白酶解物对 4 头试验仔猪的胃窦黏膜胃泌素的分泌均有促进作用,但以大豆蛋白酶解物的作用最强。其中大豆蛋白酶解物组的 4 头猪胃泌素分泌分别比相应的对照组增高 99.98%、65.12%、30.45%和9.48%,面筋蛋白酶解物组的 4 头猪胃泌素分泌分别比相应的对照组增高34.66%、20.35%、5.56%和3.87%,酪蛋白酶解物组的4头猪胃泌素分泌分别比相应的对照组增高107.12%、56.26%、6.77%和0.72%。 潘翠玲 陈伟华 邹思湘 林成招关键词:胃泌素 蛋白酶解物 仔猪 胃窦