林辰
- 作品数:6 被引量:5H指数:1
- 供职机构:福建农林大学更多>>
- 发文基金:福建省教育厅科技项目福建省科技厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水稻条纹病毒编码的NS2蛋白的亚细胞定位分析被引量:1
- 2013年
- 通过RT-PCR克隆获得水稻条纹病毒(RSV)编码的蛋白NS2和拟南芥柯浩体蛋白Atcoilin的cDNA,将两者分别与表达载体pEarley102(带青色荧光蛋白,CFP)和pEarley101(带黄色荧光蛋白,YFP)同源重组.将构建好的重组载体分别转化到农杆菌EHA105中,通过农杆菌接种法将两者共同注射到本氏烟叶片表皮细胞中进行表达.在共聚焦显微镜下观察,NS2-CFP与Atcoilin-YFP能重叠在一起,表明RSV NS2定位于柯浩体.
- 郑璐平林辰吴祖建谢联辉
- 关键词:水稻条纹病毒NS2细胞定位
- 用于检测水稻条纹病毒NS2基因的qPCR引物
- 本发明涉及一种用于检测水稻条纹病毒<i>NS2</i>基因表达量的qPCR引物及其检测方法,所述引物序列为NS2-qPCRF:ATCAACAGACGGAGCATC;?NS2-qPCRR:CATTG...
- 郑璐平林辰贺杰吴康成吴祖建
- 文献传递
- 水稻条纹病毒沉默抑制子亚细胞定位和RNAi转基因水稻培育
- 水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV/)是纤细病毒属的代表成员,其编码的蛋白NS2和NS3被鉴定为基因沉默抑制子。沉默抑制子一般具有核定位信号且定位在细胞核中,它在病毒侵染、扩散等过程中发挥着重要作...
- 林辰
- 关键词:水稻条纹病毒NS2NS3共定位转基因植株
- 文献传递
- 水稻条纹病毒NS2和NS3基因共干扰转基因水稻的培育及抗病性分析被引量:2
- 2014年
- NS2和NS3是水稻条纹病毒编码的两个转录后基因沉默抑制子,沉默抑制子往往与病毒致病性相关。本研究利用重叠PCR方法将NS2和NS3基因的部分cDNA片段重组后连接到RNAi载体,并借助PstⅠ将其重组到植物表达载体PXQ上;通过农杆菌介导法侵染水稻日本晴种子的愈伤组织,经新霉素(G418)抗性筛选获得31株转基因植株。对T0代转基因植株进行PCR及Southern blot分析结果显示,目的基因已成功转入水稻基因组中,并且不同转化植株含有目的基因的拷贝数不同;抗病性实验表明,与野生型植株相比,T0代转基因水稻能推迟RSV发病时间10~20d,导致病毒积累量下降30%~50%,且其下降量与发病时间延迟有相关性。
- 郑璐平林辰谢荔岩吴祖建谢联辉
- 关键词:水稻条纹病毒NS2NS3转基因水稻抗病性
- 一个可指示核仁定位和柯浩体定位信号Marker的构建被引量:1
- 2013年
- 通过RT-PCR获得本氏烟纤维蛋白Fibrillarin2的cDNA,并将其重组到表达载体pEarley101(黄色荧光蛋白,YFP)和pEarley102(青色荧光蛋白,CFP)上。在本氏烟叶片表皮细胞中瞬时表达融合蛋白,激光共聚焦显微镜下观察,发现蛋白定位在细胞核仁和柯浩体上,可以作为这两种细胞器的指示Marker,并通过Western blot检测融合蛋白的表达。该Marker对明确蛋白特别是病毒编码的蛋白在细胞核中的定位以及功能推测具有重要意义。
- 郑璐平毛倩卓林辰谢荔岩吴祖建谢联辉
- 关键词:细胞定位纤维蛋白核仁