樊剑鸣
- 作品数：46 被引量：147H指数：6
- 供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析被引量：10
- 2011年
- 利用RT-PCR技术对河南省某规模化猪场乙脑疑似病例的种猪精液进行分析,从部分样本中扩增出与流行性乙型脑炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的预期产物。在3日龄乳鼠脑内接种种猪精液上清,10 d左右即出现典型神经症状,并且病死鼠脑组织RT-PCR结果均为阳性。用病死鼠脑组织研磨上清接种BHK-21细胞,感染60 h后用JEV单抗进行间接免疫荧光鉴定均为阳性,这表明分离毒株均为JEV流行毒株,分别命名为BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3。对新分离毒株进行体外细胞培养,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3连续传代3次后病毒量均获得明显增加,最高分别可达104.5±0.1TCID50/mL和104.2±0.2TCID50/mL。用生物学软件MEGA 4.0分别构建JEV基因的系统进化树,发现BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3处于同一进化分支,均属于基因Ⅲ型。
- 王兴涛罗俊滕蔓樊剑鸣鄂巍禹斌刘力张改平
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒M基因E基因系统进化树
- 苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的表达及特性分析被引量：5
- 2008年
- 目的:克隆苦瓜MAP30蛋白基因的cDNA序列,并在体外进行原核表达和纯化,体外测定MAP30对镰刀菌的抑制作用并测定MAP30基因的表达模式。方法:利用RT-PCR技术扩增861 bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列,克隆至pMD18-T载体。构建苦瓜MAP30原核表达质粒pET-28a-MAP30,SDS-PAGE和Western blot检测MAP30的表达。采用镍离子亲合层析纯化MAP30,并采用真菌抑制实验检测对镰刀菌的抑制作用,Northern blot检测其表达模式。结果:克隆片段与基因库所登录的序列一致,表达的MAP30蛋白相对分子质量约为30 000,MAP30体外能抑制镰刀菌的生长,镰刀菌能诱导MAP30基因的表达。结论:MAP30基因可能参与植物早期的过敏反应并在植物的抗病中发挥重要的作用。
- 樊剑鸣许君张巧姚武徐玉宝
- 关键词：苦瓜镰刀菌
- 一种慢性病食疗食品的安全快速检测设备
- 本发明公开了一种慢性病食疗食品的安全快速检测设备，其包括供料组件和检测组件，其中，所述供料组件能够持续为所述检测组件进行供料，所述供料组件包括送料盘、进出料组件、振荡摇匀组件以及转动驱动组件，其中，所述送料盘采用安装板设...
- 张晓峰樊剑鸣芦鑫王伟东唐宇君管孝贤张志会
- 苦瓜几丁质酶基因的克隆、表达及酶学特性分析被引量：1
- 2008年
- 采用一步法逆转录聚合酶链反应（RT—PCR），以苦瓜幼叶为材料克隆几丁质酶基因的cDNA序列，序列分析表明其包含了基因完整的编码序列，编码由333个氨基酸组成的几丁质酶，对所克隆的基因进行了原核表达和纯化．纯化的几丁质酶具有分解几丁质的生物活性．当底物质量浓度在100～400mg·L^-1时，几丁质酶分解底物的能力随底物浓度增加而增大；大于400mg·L^-1时，几丁质酶分解底物的能力反而降低；当底物质量浓度固定时，几丁质酶分解底物的量随反应时间延长而增多．苦瓜几丁质酶基因的克隆和表达将为研究其结构和生物学功能奠定基础．
- 许君樊剑鸣朱海华
- 关键词：苦瓜几丁质酶
- miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响被引量：1
- 2023年
- 为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN_(3)0_(2)为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11(克隆号C58-8-4)。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失,且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示,miRM11缺失毒株HN_(3)0_(2)ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN_(3)0_(2)(P<0.05)。综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。
- 王伟东滕蔓滕蔓刘金玲张文凯李林燕张志会樊剑鸣樊剑鸣
- 关键词：马立克病微小RNA
- DT40细胞sIgMλ轻链基因的克隆鉴定及原核表达
- 2009年
- 本研究利用RT-PCR技术,从鸡法氏囊淋巴瘤细胞系DT40中扩增sIgMλ轻链基因并在E.coli中进行了表达。序列分析结果表明,sIgMλ轻链基因全长852nt,含有一个长度为657nt的ORF及长度为195nt的3'-UTR,该基因与鸡Igλ基因的序列同源性为95%,差异位点主要存在于λ轻链的可变区。氨基酸序列预测结果表明,DT40sIgMλ蛋白与鸡Igλ蛋白的序列同源性为92.6%。构建的原核表达载体pET-λ在E.coliBL21(DE3)中成功的获得大量表达。本实验为进一步研究sIgM在IBDV感染法氏囊B淋巴细胞中的作用奠定了基础。
- 罗俊樊剑鸣滕蔓王方雨王丽叶世同孙玉梅张改平
- 关键词：传染性法氏囊病病毒
- 以合成肽为抗原检测O型口蹄疫病毒抗体ELISA方法的建立和评价被引量：6
- 2009年
- 作者以固相法合成特异性FMDV主要保护性抗原VP1上的表位肽,将其与载体蛋白BSA偶联,作为包被抗原,制备检测抗O型口蹄疫病毒(FMDV)抗体的ELISA试剂盒,并对该试剂盒进行方法考核。结果表明该方法的敏感性为95.12%,特异性为100%。检测199份血清标本,与UBI FMD VP1试剂盒的符合率达到98.49%,与液相阻断ELISA试剂盒的符合率达到96.98%。该多肽ELISA试剂盒特异、敏感、稳定、操作简便,可用来监控口蹄疫抗体水平。
- 杨苏珍杨继飞鲍登克刘庆堂罗俊樊剑鸣李学伍邓瑞广张改平
- 关键词：FMDV抗体合成肽
- 氧氟沙星单链抗体的制备及间接竞争ELISA的建立被引量：2
- 2021年
- 为了制备高灵敏度、高特异性的抗氧氟沙星单链抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA),试验采用噬菌体展示技术构建免疫小鼠噬菌体库,经过筛选后将分离出的阳性抗体转入大肠杆菌BL21中进行表达,然后采用分子对接的方法进行分子识别机制研究和虚拟突变,将关键氨基酸残基进行突变制备突变体,并建立间接竞争ELISA。结果表明:构建的噬菌体库经过四轮筛选后,最终库容量为2.35×10^(7) cfu/mL。从库中分离出25株单克隆阳性菌落,选择结合能力高的第22株单克隆菌落进行表达。分子对接后甲硫氨酸209(Met209)残基为单链抗体与氧氟沙星结合的关键氨基酸残基,将其突变为谷氨酰胺(Gln)后,总结合能从-5.32 kJ/mol降至-6.94 kJ/mol,表明突变体结合能力更强。建立检测方法的标准曲线方程为y=-0.192 7x+0.542 3 (R2=0.999 4),半数抑制浓度为1.66 ng/mL,相比于亲本单链抗体的21.08 ng/mL,敏感性提高了12.7倍。说明试验成功制备了高灵敏度、高特异性的抗氧氟沙星单链抗体并建立了间接竞争ELISA,为动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留检测提供基础。
- 张运尚王方雨胡曼樊剑鸣
- 关键词：噬菌体展示技术单链抗体氟喹诺酮类药物药物残留检测
- 氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展被引量：12
- 2021年
- 氟喹诺酮类药物(FQS)是第3代喹诺酮类抗生素,具有良好的生物利用度和耐受性,不仅对革兰氏阳性菌和阴性菌有杀菌作用,还具有抗真菌和抗病毒活性,因此被广泛应用于治疗畜牧动物养殖过程中的细菌性感染。但当人类过多食用含有FQS残留的食品后,将会损害身体多个系统并引起细菌耐药性,因此建立灵敏度高、简便的检测方法十分必要。本文综述了FQS残留的检测标准和常用的检测方法及优缺点,酶联免疫分析法(ELISA)具有灵敏度高、操作简便等优势,预测ELISA法在今后FQS残留检测中发挥重要作用。
- 张运尚杜加茹王伟东樊剑鸣
- 关键词：氟喹诺酮类药物酶联免疫分析法
- 针对牛病毒性腹泻病毒RNA干扰真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 牛病毒性腹泻病毒（Bovineviraldiarrheavirus，BVDV）会引起牛病毒性腹泻一黏膜病（bovineviraldiarrheamucosaldisease，BVD—MD），造成牛腹泻、发热、黏膜恶性坏死，甚至可以在孕牛体内通过胎盘传染给幼牛，使得产下的幼牛终身带毒，成为持续感染源。牛病毒性腹泻在世界各地都普遍存在，P．Olafson等在1946年首次对此病进行了报道，近些年来，其发生、流行呈上升趋势，在养牛业发达的地区则更为严重，给全球畜牧业造成极大危害和重大的经济损失。
- 范璐樊剑鸣张改平常咏哲王爱萍
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒真核表达载体RNA干扰经济损失BVD
