武小椿
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒相关猪microRNA的初步筛选
- 2012年
- 本试验旨在初步筛选出与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染相关的猪microRNA(miRNA)。采用生物信息学方法预测可能与PRRSV 3′非编码区(3′utr)产生相互作用的猪miRNA,构建PRRSV 3′utr的双荧光素酶报告基因载体psi-CHECK-utr,同时合成预测到的miRNA(ssc-miR-323、ssc-miR-105-1)及其相应的抑制物,共转染猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC),检测双荧光素酶活性。结果发现,ssc-miR-323与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率略有升高,ssc-miR-105-1与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率降低。初步判定ssc-miR-323对PRRSV 3′utr没有抑制作用,而ssc-miR-105-1对PRRSV3′utr有一定的抑制作用。
- 郜原薄联锋武小椿孙柏温俊歌孙岩徐志坤张德礼
- BHD综合征致病基因FLCN介导亮氨酸调控mTORC1信号通路的研究
- BHD(Birt-Hogg-Dubé)综合征是一种由抑癌基因folliculin(FLCN)突变引起的遗传疾病,其临床症状主要包括良性皮肤肿瘤、自发性气胸、肺部囊肿等,严重时某些患者发生肾癌。然而FLCN的生物学功能至今...
- 武小椿
- 关键词：亮氨酸溶酶体
- 文献传递
- 野猪源与家猪源PRRSV陕西流行毒株对仔猪的致病性试验被引量：2
- 2011年
- 【目的】研究野猪源Shaanxi-2及家猪源Shaanxi-1猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株对易感仔猪的致病性及发病规律,进一步弄清PRRSV变异株的病原特征及其与"猪高热病"发生的关系。【方法】选取PRRSV和猪圆环病毒2型(PCV2)抗原、抗体检测均为阴性的健康仔猪(40日龄)9头,随机分为3组,用家猪源Shaanxi-1及野猪源Shaanxi-2 PRRSV变异株分别感染其中一组仔猪,每头肌注6 mL,滴鼻2 mL;另一组作为阴性对照,按相同剂量和方法接种正常Marc-145细胞处理液。攻毒后各组分圈饲养,每天定时测量体温,绘制体温变化曲线,观察临床症状,记录发病情况。攻毒后采血及咽喉、眼、鼻分泌物和粪便,采用RT-PCR方法检测PRRSV、猪瘟病毒(CSFV)、PCV2、猪伪狂犬病毒(PRV)核酸,用ELISA试验及血清中和试验检测血清抗体。【结果】Shaanxi-1与Shaanxi-2攻毒组均出现体温升高及典型临床症状,但未见死亡病例;攻毒组CSFV、PCV2、PRV核酸检测均为阴性,咽喉、眼、鼻分泌物和粪便在一定时间段可检测到PRRSV核酸;PRRSV特异性抗体检测均为阳性,仅Shaanxi-2攻毒组在第35天检测到中和抗体;Shaanxi-2与Shaanxi-1相比,感染猪的体温较高,临床症状明显,病毒血症的维持时间较长,抗体水平较高。【结论】野猪源Shaanxi-2及家猪源Shaanxi-1 PRRSV变异株对易感仔猪具有一定的致病性,能使感染动物发病但不能致死,Shaanxi-2毒株的致病性相对较强。攻毒后第7天出现病毒血症,持续14～21 d后逐渐消退,仔猪感染PRRSV变异株后,病毒可通过鼻、眼、咽喉分泌物及粪便等排出,其中鼻分泌物排毒最早、排毒时间最长,眼、咽喉分泌物与鼻分泌物、粪便相比排毒较晚、持续时间较短。
- 武小椿王波刘阳坤杨增岐张淑霞党如意张鹏赵伟张冲韩青松
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒家猪野猪
- 鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2010年
- 【目的】对鸽源新城疫病毒（NDV）陕西分离株P基因进行克隆和序列分析,为研究P基因及V基因的功能奠定基础,并为防治新城疫提供科学依据。【方法】参考GenBank发表的NDV基因序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增NDV/Pigeon/ShX/China/2003P基因的全长片段,并进行克隆、序列测定和分析。【结果】NDV/Pigeon/ShX/China/2003P基因全长1 451 bp,其完整的ORF长度为1 188 bp,编码395个氨基酸。同源性比较可知,NDV/Pigeon/ShX/China/2003与其他分离株P基因的核苷酸序列同源性在63.6%~92.9%,推导的氨基酸序列同源性在67.7%~92.2%。系统发育进化树表明,NDV/Pigeon/ShX/China/2003与鸽源分离株P68亲缘关系最近,与F48E9和La Sota毒株处于进化树的不同分支。【结论】NDV/Pigeon/ShX/China/2003与国内外已报道的NDV毒株间存在较大变异。
- 韩青松代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲武小椿
- 关键词：新城疫病毒P基因
- PRRSV Shaanxi-1株分离鉴定、全基因测序及遗传进化分析
- 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)也称猪蓝耳病,是由动脉炎病毒科动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reprodu...
- 武小椿
- 关键词：PRRSV遗传进化分析
- 文献传递
- 鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析
- 【目的】通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析,为研究P基因及V基因的功能奠定基础,也为防治新...
- 韩青松代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲武小椿
- 关键词：新城疫病毒P基因
- 文献传递
- 野猪源与家猪源PRRSV陕西分离株全基因测序与遗传进化分析被引量：2
- 2011年
- 【目的】研究野猪源与家猪源猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV）陕西分离株的遗传变异情况及分子生物学特征。【方法】根据VR-2332和HB-1（sh）/2002毒株序列设计引物,对2株PRRSV陕西分离毒株Shaanxi-1（家猪源）、Shaanxi-2（野猪源）全基因分段进行扩增并测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因,然后进行序列的比对分析。【结果】PRRSV Shaanxi-1、Shaanxi-2毒株高度同源且均属于美洲型毒株,它们与2006年以前分离的毒株相比存在明显差异（与BJ-4株的核苷酸同源性仅为89%）,而与高致病性PRRSV（HP-PRRSV）保持较高的同源性（相似率为99%左右）。Shaanxi-1、Shaanxi-2分别呈现不同的变异特点,Shaanxi-1 ORF3、ORF5基因变异较大,ORF6、ORF7较为保守;Shaanxi-2 ORF7基因变异最大,ORF3~ORF6较为保守。分析发现,Shaanxi-1、Shaanxi-2具有HP-PRRSV的分子特征,但部分位点氨基酸的突变明显区别于HP-PRRSV。【结论】不同来源的Shaanxi-1、Shaanxi-2毒株均属于HP-PRRSV演化中的一个分支,但其发生了部分变异,使其具备了新的特点。
- 张冲武小椿王波韩青松杨增岐
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化分析
- 抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2单克隆抗体的制备
- 2013年
- 【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),进行诱导表达,通过GST亲和层析法纯化GST-Atac2融合蛋白。以GST-Atac2为抗原免疫8周龄的Balb/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株,检测抗体的特异性、效价和亚型,并检测其亲和常数。【结果】PCR扩增获得了目的片段。成功构建了GST-Atac2融合蛋白表达载体,于37℃下220r/min振摇5h,当IPTG终浓度为0.1mmol/L时,GST-Atac2在E.coli BL21(DE3)中高效表达,GST-Atac2融合蛋白大小约为30ku,与预期结果一致。获得1株稳定分泌抗Atac2抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C7。单抗1C7能够特异地识别GST-Atac2蛋白,效价为1∶2×105;亚型鉴定表明其重链为IgG1,所得单克隆抗体的亲和常数为2×105。【结论】获得了1株特异性好、能够稳定分泌抗果蝇Atac2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。
- 马延森李晓陈志兰向丽武小椿靳亚平刘伟
- 关键词：果蝇原核表达单克隆抗体
- 鸽源新城疫病毒陕西分离株P基因克隆与序列分析
- 目的：通过对鸽源新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)陕西分离株(NDV/Pigeon/ShX/China/2003)P基因的克隆和序列分析，为研究P基因及V基因的功能奠定基础，也为防治新城...
- 韩青松武小椿代鹏杨增岐张鹏张淑霞党如意樊荣王波张冲
- 关键词：P基因亲缘关系
- 文献传递
