段康民
- 作品数：43 被引量：113H指数：6
- 供职机构：西北大学生命科学学院西部资源生物与生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金重大基础研究前期研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 铜绿假单胞菌耐药性相关基因的筛选及鉴定被引量：4
- 2010年
- 铜绿假单胞菌在人体内能引起严重的感染.由于铜绿假单胞菌高水平的内在性和获得性耐药性,使其引起的感染难以治愈.为解决该问题,弄清病原菌抗生素抗性的分子机制是一个关键.本实验构建了含有17000个铜绿假单胞菌转座突变株文库,并在LB固体平板上,用7种抗生素在最小抑制浓度(MIC)和1/2MIC条件下,筛选抗生素抗性发生变化的突变株.结果确定了43株转座突变株,每个突变株对至少一种抗生素的敏感性表现出增加3倍或降低1/2的表型.通过随机PCR和DNA测序,确定了这些铜绿假单胞菌突变体中转座子在基因组上的插入位点,确定了被破坏的基因.其中,9个是已知的与抗生素抗性相关基因,包括mexI,mexB和mexR;24个是以前未知与抗性相关的基因,包括一个菌毛合成基因pilY1,这个菌毛合成基因的破坏导致菌株对羧苄青霉素的MIC增加了128倍.此外,43个基因中有12个是功能完全未知的基因.这些基因的筛选鉴定有助于了解铜绿假单胞菌中抗生素抗性的产生机制,这些基因或许可成为控制或扭转抗生素抗性的作用靶点.
- 陈林杨亮赵兴艳沈立新段康民
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药性基因组
- 一株具有抗菌作用的P. polymyxa sp.菌株的分离鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的研究对辣椒疫病具有防治作用的一株桔抗细菌。方法从辣椒植株根的韧皮部分离出对辣椒疫霉(Phytophora capsic Leonian)具有强烈拮抗作用的辣椒植株内生细菌菌株,通过形态观察、生理生化实验、16s rRNA基因测序以及与NCBI(National Center for Biotechnology Informa-tion)的数据库中进行对比,鉴定该菌株。采用平皿对峙法测定其抑菌活性。结果分离出的该菌株确定为Peanibacillus polymyxa sp(其后简称为J),其对辣椒疫霉(phytophora capsic Leonian)、西瓜枯萎(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、小麦赤霉(Gibberella saubinetii(Mont.)Sacc.)、马铃薯干腐(Gibberella pulicris)、烟草赤星(A.alternata(Fr.)Keisslerf.sp.nicotianae)和番茄早疫(Alternariasolani)病害真菌具有抑菌活性。结论对Paenibacillus polymyxa sp.的生物学特性研究结果表明,菌株对多种植物病原真菌具有抑制作用。同时,它还可固定大气中的氮,且无磷酸酶、纤维素酶和脂肪酶活性,它同宿主属互惠共生关系。因此,该菌株可能是适用于生物防治的一株优良菌株。
- 陈林董兆麟段康民
- 关键词：拮抗作用内生细菌
- 铜绿假单胞菌多重耐药基因的筛选及鉴定被引量：5
- 2008年
- 【目的】研究铜绿假单胞菌中与耐药性相关的基因。【方法】筛选转座突变体文库中对多种抗菌药物敏感的突变体,通过随机PCR、核苷酸测序及序列比对确定突变体中转座子的插入位点及其破坏的基因。【结果】筛选得到2株对多种抗菌药物敏感的突变体,其中被破坏的基因分别为功能未知的新基因PA2580和PA2800。【结论】PA2580和PA2800可能分别通过参与细胞氧化还原作用和细胞壁合成进而与铜绿假单胞菌耐药性相关。
- 赵兴艳梁海华沈立新董兆麟段康民
- 关键词：铜绿假单胞菌多重耐药性
- PA2580基因与铜绿假单胞菌环境压力耐受性相关
- 2014年
- 【目的】研究铜绿假单胞菌PAO1 PA2580基因的功能。【方法】构建了PA2580的敲除突变体及突变体互补体,通过最小抑制浓度测定、基因启动子活性检测、蛋白体外表达纯化等方法,对PA2580基因的功能进行了深入的研究。【结果】PA2580突变体对羧苄青霉素、氯霉素、环丙沙星的敏感性增强。PA2580基因的表达还受到不同种类的低于抑制浓度的抗生素的调节。PA2580蛋白产物以NADPH为电子供体,能够高效还原多种醌类物质。此外,PA2580突变体对过氧化氢敏感性增加,过氧化氢酶编码基因在PA2580突变体中的表达降低,表明PA2580与铜绿假单胞菌氧化压力耐受性相关。【结论】PA2580产物是NADPH-醌类的还原酶,其功能与铜绿假单胞菌对环境压力的耐受密切相关。
- 赵琳李娟陈林沈立新段康民
- 关键词：铜绿假单胞菌
- 黄芩苷在抗细菌感染和预防细菌感染中的应用
- 本发明涉及黄芩苷在抗细菌感染及预防细菌感染中的应用，本发明提供了黄芩苷不会给细菌本身带来生存压力、产生抗药性的几率小的黄芩苷在抗细菌感染及预防细菌感染中的应用。
- 段康民迈克·G·撒瑞特黄一农郭俏
- 文献传递
- 活性氧在细菌耐抗生素机制中的作用被引量：3
- 2010年
- 细菌对抗生素的耐药性以惊人的速度蔓延,阐明抗生素导致细菌死亡内在机制,对提高抗生素药效以及寻找新型抗生素显得尤为迫切。近期研究表明,抗生素引起的细菌内活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)产生,是导致细菌细胞死亡的关键原因。该文对ROS、SOS和细菌耐药性方面的最新研究进行了综述和探讨,为开发新型抗菌药物,遏制细菌感染和耐药性提供新的思路。
- 张亚妮段康民
- 关键词：抗生素耐药性活性氧SOS
- 铜绿假单胞菌随机启动子库的构建及受铁调控基因的筛选和鉴定被引量：3
- 2008年
- 【目的】针对铁这种几乎所有微生物都必需的,对病原菌尤为重要的营养元素,在全基因组水平上检测铜绿假单胞菌的铁感应基因。【方法】采用含LuxCDABE报道子的质粒pMS402为载体,构建了铜绿假单胞菌的随机启动子库,建立了特定条件下研究铜绿假单胞菌全基因组基因表达变化的高通量平台。【结果】验证了2个已知的受铁调控的基因,并发现了尚未报道的二氢叶酸还原酶,磷酸葡萄糖脱水酶和柠檬酸铁转运蛋白受铁调控的现象,发现与铁相关的四个功能未知的基因和3个假定蛋白的基因。【结论】研究结果对于阐明铁在铜绿假单胞菌中的调控作用,揭示铁对细菌生理及致病性的作用机制提供了理论基础。随机启动子库的构建也为细菌基因组水平研究基因表达提供了一个有用的工具。
- 王琰魏金花沈立新段康民
- 关键词：铜绿假单胞菌铁基因调控
- 谷胱甘肽与铜绿假单胞菌致病性的关系
- 2009年
- 铜绿假单胞菌由于对抗生素的固有耐药和多重抗药性,已成为医院内感染的重要病原菌之一。谷胱甘肽是细胞内最重要的抗氧化剂,保护细胞免受氧化压力的损害。但是在铜绿假单胞菌感染的组织中,由于绿脓菌素等致病因子的存在,可以导致谷胱甘肽的水平降低。同时,谷胱甘肽又可以增强绿脓菌素的致病性。本文就谷胱甘肽与铜绿假单胞菌关系的最新研究进展并结合作者的工作,对上述问题进行了综述和探讨。
- 张亚妮梁海华段康民
- 关键词：谷胱甘肽铜绿假单胞菌绿脓菌素
- 铜绿假单胞菌 prtN 突变引起甲氧苄啶耐药
- 2024年
- 耐药铜绿假单胞菌(PAO1)在临床感染过程中造成非常棘手的问题,研究其耐药机制有助于临床的治疗。研究结果表明,相对于野生型,ΔprtN表现出明显的甲氧苄啶(Tmp)抗性。为了了解其抗性出现的机理,测定了Tmp作用靶点folA的表达情况。相比于PAO1,folA在ΔprtN中的表达并未升高,反而有所下降。进一步研究发现,PrtN调控的S型绿脓杆菌素基因和prtN的双突变体对Tmp的抗性稍有降低,而脂多糖缺陷菌株ΔwbpL对Tmp的抗性略有升高。在ΔprtN中活性氧(ROS)相关基因(oxyR,katA,ahpC)的表达水平、生物被膜及外排泵相关抗生素抗性检测结果都显示与野生型无显著性差异。综上,prtN基因突变引起的Tmp抗性可能是通过PrtN调控S型绿脓杆菌素及脂多糖相关靶标作用的结果。
- 肖悦王冲司玉洁韩雪段康民陈林
- 关键词：绿脓杆菌素甲氧苄啶脂多糖ROS
- SP-TAT-Apoptin融合蛋白对HepG2细胞周期的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究SP-TAT-Apoptin融合基因诱导人肝癌HepG2细胞凋亡和细胞周期阻滞,探讨其用于肝癌治疗的可能性。方法:通过DNA重组技术,以pcDNA3.1/Apoptin质粒11为模板,构建SP-TAT-Apoptin融合基因plenti6-V5-D-TOPO真核表达载体。用SP-TAT-Apoptinplenti6-V5-D-TOPO真核表达载体转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),转染后Blasticidin霉素进行筛选,并进行鉴定得到稳定表达SP-TAT-Apoptin的CHO细胞株。收集含有TAT-Apoptin融合蛋白的筛选细胞培养上清,用于HepG2细胞培养。于共培养后的不同时段收集HepG2细胞,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期。结果:用包含SP-TAT-Apoptin融合基因的plenti6-V5-D-TOPO真核表达载体瞬时转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),成功筛选出稳定表达SP-TAT-Apoptin融合蛋白的CHO细胞,收集细胞培养上清,继续用于HepG2细胞培养,可观察到HepG2细胞阻滞于G1期并引起细胞凋亡。结论:SP-TAT-Apoptin融合表达可引起HepG2细胞的细胞周期G1期阻滞。
- 韩苏夏马瑾璐吕毅黄辰段康民
- 关键词：信号肽蛋白转导域鸡贫血病毒
