段新平
- 作品数：15 被引量：8H指数：2
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小型猪体细胞克隆试验被引量：1
- 2010年
- [目的]建立体细胞克隆小型猪的技术平台并了解克隆效率。[方法]运用体细胞核移植技术,以小型猪胎儿成纤维细胞作为核移植供体细胞,以体外成熟卵母细胞作为核移植受体细胞进行体细胞克隆猪生产,并利用STR序列对所出生的克隆猪进行个体识别。[结果]将重构胚胎移植到5头代孕母猪体内,其中一头代孕母猪成功产下2头克隆小型猪。经过个体识别试验证实克隆小型猪来自供核细胞,与代孕母猪无直接亲缘关系。[结论]克隆小型猪的成功出生表明所建立的技术平台适于小型猪的克隆。
- 黄永业李小平周焱谢万华段新平谭广云李栋袁婷高飞谢光洪赖良学欧阳红生逄大欣
- 关键词：体细胞核移植小型猪克隆猪性别鉴定
- 表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建
- 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建，其特征在于：首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒，并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞，在表达Cre重组酶的...
- 逄大欣周杨欧阳红生朱建国张明军王铁东李莉聂代邦段新平毛丹
- 文献传递
- 鉴定转基因猪整合位点的新方法
- ＜正＞转基因动物整合位点克隆及相关序列特征研究是探索外源基因整合机制和整合稳定性的重要手段。通常的转基因整合位点序列的克隆方法主要有:个体基因组文库筛选法、反向PCR法、质粒回收法和热不对称交互式PCR法。本实验采用hi...
- 高飞李小平武蓉段新平闫森李莉王铁东赖良学欧阳红生逄大欣
- 文献传递
- 维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒的构建
- 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建，其特征在于具体制备方法如下：首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T，然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的...
- 欧阳红生唐小春逄大欣周杨朱建国赖良学陈月段新平张明军
- 绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养
- 2010年
- 目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。
- 谭广云谢万华周焱黄永业宋红肖李栋宋娜袁婷段新平逄大欣欧阳红生
- 关键词：EGFP胚胎干细胞小鼠
- 睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪的建立
- 目的：建立睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪，为制备人类生殖系统疾病模型猪奠定基础。方法：通过PCR法在猪的全基因组上扩增出PIWILI基因启动子，同时将本实验室保存的猪源Cre重组酶的表达载体oET28a.MHC-C...
- 段新平武蓉高飞宋奇姚朝刚欧阳红生
- 关键词：转基因猪
- Fat-1基因真核表达载体的构建及其对人口腔鳞癌细胞脂肪酸含量的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:构建真核表达载体pcDNA3.1-Fat1,线性化稳定转染人口腔鳞癌细胞株Tca8113,检测其细胞内脂肪酸含量变化。方法:通过重叠延伸PCR方法人工合成利于真核表达的Fat-1基因,用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1-Fat-1,用脂质体转染真核细胞的方法转染人口腔鳞癌细胞株Tca8113,用气相色谱仪检测脂肪酸的变化情况。结果:测序及酶切鉴定成功合成真核偏好表达的Fat-1基因。与对照组相比,转染Fat-1基因的口腔癌细胞的n-3脂肪酸明显增多,n-6/n-3明显下降。结论:成功构建真核表达载体pcDNA3.1-Fat1,并对口腔鳞癌细胞内脂肪酸含量产生明显影响,为进一步研究Fat-1基因在口腔鳞癌中的生物学功能奠定了基础。
- 李栋聂代邦王海军段新平逄大欣欧阳红生
- 关键词：真核表达载体转染口腔鳞癌细胞N-3脂肪酸
- PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建
- 2012年
- [目的]建立PIWIL1基因启动子调控的特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制奠定基础。[方法]通过PCR扩增,从猪的全基因组上扩增出PIWIL1基因的启动子。切除猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的启动子MHC,将其与PIWIL1基因启动子连接,构建成特异性表达Cre重组酶的pPIWIL1-Cre载体。将该载体转染小型猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选,获得阳性克隆进行核移植。[结果]获得2头PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre酶的转基因猪。[结论]成功构建了PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制提供了工具猪。
- 段新平高飞武蓉宋奇韩杨姚潮刚纪元
- 关键词：PIRNA转基因猪
- 肌生成抑制素MSTN基因敲除猪的建立
- 本发明涉及一种肌生成抑制素MSTN基因敲除猪的建立，其特征在于具体制备方法如下：1、基因打靶载体的构建；2、MSTN基因敲除的猪胎儿成纤维细胞的构建；3、利用体细胞核移植技术构建MSTN基因敲除猪；4、对MSTN基因敲除...
- 欧阳红生逄大欣段新平赖良学周杨周焱陈颖李占军欧阳松应赵增明朱建国
- 文献传递
- PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建
- 2012年
- Cre-LoxP重组酶系统是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的主要技术。本实验建立睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为制备人类生殖系统疾病模型猪奠定基础。利用PCR法扩增出猪PIWIL1启动子序列2822 bp,替换本实验室保存的猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的MHC启动子。
- 段新平高飞全龙泉唐成程武蓉戴祯欧阳红生逄大欣
- 关键词：CRE重组酶转基因猪基因打靶启动子调控生殖系统疾病
