汪伟
- 作品数：102 被引量：75H指数：4
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 用于检测抗猪产肠毒素性大肠杆菌抗体的融合蛋白、制备方法及应用
- 本发明提供用于检测抗猪产肠毒素性大肠杆菌抗体的融合蛋白、制备方法及应用，属于生物技术领域。所述融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ？ID？NO:1所示。制备融合蛋白的方法，包括：将所述融合蛋白的编码基因插入pCold？I质粒，...
- 张雪寒俞正玉张强张碧成汪伟茅爱华周俊明何孔旺倪艳秀温立斌李彬周萍
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的分离鉴定及遗传变异分析被引量：11
- 2014年
- 从江苏某猪繁殖与呼吸综合征（ PRRS）发病猪场采集的血清样本中分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒（ PRRSV）毒株,对该毒株的生物学特性进行了鉴定,并对其Nsp2和ORF5序列进行测定和序列比对分析。利用细胞传代的方法对PRRSV检测阳性,PPV和PRV检测阴性的猪血清进行病毒分离。通过RT-PCR、CPE和IFA对PRRSV分离毒株进行鉴定,并测定其TCID50。测序获得Nsp2和ORF5基因,并利用DNAStar软件进行序列同源性和进化分析。成功分离获得1株PRRSV毒株,该毒株能够在Marc-145细胞上增殖并产生细胞病变,免疫荧光检测可观察到特异性荧光,TCID50为105.5。 Nsp2序列分析表明,该分离株具有HP-PRRSV 30个氨基酸缺失的基因特征,同时495-516位也存在缺失。分离株ORF5基因与其他参考毒株氨基酸同源性为57.1%-99.5%,与NJ-1106的同源性最高,为99.5%。系统进化树分析表明,该分离株属于北美型,与WUH4、NJ-1106等HP-PRRSV毒株属于同一分支。本试验分离得到一株HP-PRRSV变异毒株,为分析我国PRRSV的遗传变异和防控奠定了基础。
- 王小敏何孔旺周忠涛茅爱华俞正玉汪伟倪艳秀温立斌张雪寒郭容利李彬于洋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 重组蛋白和猪流行性腹泻疫苗组合物
- 本发明提供一种重组蛋白和猪流行性腹泻疫苗组合物。重组蛋白是由来自猪流行性腹泻病毒S蛋白(Spike，纤突蛋白)的截短片段与猪IgG的Fc片段串联而成的融合蛋白，S蛋白的截短片段优选选自S蛋白的S1亚基中具有唾液酸结合活性...
- 李彬范宝超时丹怡周金柱郭容利何孔旺赵永祥朱雪蛟李澧汪伟王丹丹祝昊丹
- 文献传递
- 猪链球菌2型粘附相关因子荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 为了建立定量检测猪链球菌2型(SS2)粘附相关因子mRNA转录水平的荧光定量PCR方法,根据已报导的SS2粘附相关因子甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、分选酶A(SrtA)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD)及其管家基因aroA,用GenBank登录的核苷酸序列,设计特异性引物,提取SS2总RNA,经RT-PCR扩增和克隆了各粘附相关因子的核苷酸片段,以构建含有各自引物扩增序列的重组质粒,建立检测各粘附相关因子SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法起始模板数的对数与荧光信号达到所设定荧光阈值所经历的循环数(Ct)之间线性关系好,相关系数均达到0.995以上;扩增产物形成单一的特异性熔解峰;初始模板的检出下限达到了1μl 1.0×102拷贝数;组内变异系数小于2%,说明该方法特异性强、敏感性高、重复性好。
- 汪伟何孔旺倪艳秀周俊明张雪寒俞正玉吕立新茅爱华温立斌王小敏李彬郭容利
- 关键词：猪链球菌2型STREPTOCOCCUSSUIS
- 猪链球菌3型分离菌的生物学特性及致病性被引量：1
- 2020年
- 为研究猪链球菌3型(Ss3)分离菌的生物学特性及致病性,对疑似Ss进行培养、染色、生化试验、猪链球菌PCR鉴定、血清分型PCR鉴定、多位点序列分型(MLST型)PCR鉴定,并对小鼠和仔猪进行致病性试验。结果显示,3株分离菌(分别命名为JSHZ菌株、GD7菌株、H30菌株)均呈革兰氏阳性,Ss PCR鉴定显示为阳性,血清分型PCR结果表明分离到的菌株为Ss3,序列型(ST)分别属于ST27型(JSHZ菌株)、ST1004型(GD7菌株)和ST 117型(H30菌株);3株分离菌的生化特性与猪链球菌相符;3株分离菌经腹腔注射均可致死Balb/C小鼠,半致死量(LD50)分别为2.0×107CFU/ml、3.5×107CFU/ml和2.5×108CFU/ml。选择3株分离菌中毒力较强的JSHZ菌株进行仔猪致病性试验,感染仔猪会出现明显的关节红肿、跛行,体温多数升高至40.5~41.8℃,精神萎靡,食欲减少等症状;高剂量(每头仔猪注射JSHZ菌数6.0×109 CFU)处理可致仔猪出现食欲废绝、神经症状,甚至濒死,并在其脑组织中分离到Ss3。本研究结果为进一步开展Ss3的防控研究奠定了基础。
- 肖琦赵霞玲钱雯娴郭佳慧檀济敏俞正玉汪伟孙珂倪艳秀祝昊丹周俊明姚火春范红结牛家强索朗斯珠何孔旺
- 关键词：生物学特性
- 猪IL-1β与IL-18 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用。为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-actin核苷酸序列,设计特异性引物,经RT-PCR从3D4猪肺泡巨噬细胞系中克隆和扩增了上述3个因子核苷酸片段,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性模板,建立了检测IL-1β、IL-18及β-actin SYBR GREEⅠ荧光定量PCR方法。该方法起始模板数与Ct值之间线性关系好,相关系数达到0.990以上;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;敏感性高,初始模板的检出下限达到了1μl 1.0×102拷贝;重复性好,组内变异系数均小于4%。
- 汪伟倪艳秀温立斌吕立新周俊明俞正玉茅爱华张雪寒李彬郭容利王小敏范红结何孔旺
- 关键词：促炎症细胞因子IL-1ΒIL-18
- 猪链球菌2型对细胞粘附作用及粘附因子转录水平分析被引量：4
- 2013年
- 本研究中主要采用粘附计数和目前已发表的粘附因子,通过检测它们mRNA相对转录水平,研究了SS2粘附PK-15细胞、HEp-2细胞及PIEC的能力。结果显示,总体强毒株对细胞的粘附能力较强,无毒株对细胞没有粘附能力,但这不是绝对的,并初步在mRNA水平上阐明SS2粘附细胞能力差异的原因。这为后续研究SS2粘附机制及了解SS2感染后的致病机理奠定基础。
- 汪伟何孔旺倪艳秀吕立新周俊明张雪寒
- 关键词：猪链球菌2型粘附作用粘附因子荧光定量PCR
- 猪圆环病毒2型201105ZJ分离株的遗传变异分析（英文）
- 2014年
- [目的]了解我国部分地区猪圆环病毒2型（PCV2）的遗传变异特性。[方法]使用细胞传代的方法对 PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料进行病毒分离，并通过 PCR、IFA进行初步鉴定，并特异性扩增出该分离病毒的全基因组，并进行同源性和系统进化树分析。[结果]该研究成功分离出1株 PCV2毒株，并命名为201105ZJ株；该分离株能在 PK15细胞上增殖，特异性 PCR检测可扩增出特异性片段，经 PCV2阳性血清作用后，呈现特异性免疫荧光，其 TCID50偏低，为102.67；基因组全长1768bp，与13株参考毒株的序列同源性介于94.1%～96.8%；与 AF055392PCV2a的同源性最高，为96.8%；分离株201105ZJ 和AF055392属于基因型 PCV2a，与 PCV2c基因型亲缘关系较远。[结论]该研究中201105ZJ分离株的遗传变异特征对于疫苗的研发、PCV2致病机理的研究和华东地区 PCVAD的防控提供了理论依据。
- 王小敏何孔旺汪伟周忠涛杨光远茅爱华俞正玉倪艳秀
- 关键词：猪圆环病毒2型
- 猪链球菌3型疫苗株及其应用
- 本发明提供猪链球菌3型疫苗株及其应用，涉及兽用疫苗领域。猪链球菌3型疫苗株，分类命名为猪链球菌3型JSHZ，保藏编号为CCTCC NO:M 2019687。本发明还提供含有所述猪链球菌3型疫苗株的疫苗及该菌株在制备治疗或...
- 肖琦何孔旺俞正玉汪伟倪艳秀祝昊丹周俊明王丹丹温立斌
- 通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型
- 目的：志贺毒素和紧密素是大肠杆菌致病群最主要的毒力因子之一,本文旨在是建立能够同时检测志贺毒素和紧密素多个基因变型的二重PCR快速检测技术,更好的适应临床和实验室等的检测需求。方法：以志贺毒素2(Shiga toxin2...
- 张雪寒叶青汪伟倪艳秀温立斌李彬王小敏周俊明何孔旺
- 关键词：动物疾病大肠杆菌志贺毒素基因检测
- 文献传递
