汪六庆
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：合肥市第三人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- IgY-和IgG-ELISA用于日本血吸虫病循环抗原检测的效果比较被引量：2
- 2011年
- 目前，血吸虫病循环抗原的检测敏感度和特异度均不理想，交叉反应有待解决[1]。免疫检测体系中，探针的特异度和亲和力是影响检测效果的主要因素。IgY是卵黄免疫球蛋白的简称，是用特异性抗原免疫产蛋母鸡后母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中去的，且是蛋黄中惟一存在的抗体，和哺乳动物的IgG相比，IgY具有高特异、高灵敏度，
- 周银娣温和汪六庆沈继龙
- 关键词：循环抗原检测日本血吸虫病卵黄免疫球蛋白特异度抗原免疫
- 抗肠道病毒71型外壳蛋白1卵黄抗体的制备和鉴定
- 2011年
- 目的 克隆肠道病毒71型（EV71）BrCr株外壳蛋白1（VP1）基因,构建原核表达载体PET28a/VP1,表达VP1重组蛋白,以VP1免疫产蛋母鸡,获得抗VP1的鸡免疫球蛋白（IgY）.方法 培养Vero细胞,利用Vero细胞增殖肠道病毒EV71 BrCr株,提取病毒总RNA,利用RT-PCR扩增出VP1目的基因,目的基因插入克隆载体pGEM-T,提取重组质粒,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切获得目的基因,插入原核表达载体pET-28a,重组子同时BamHⅠ,EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,转化入感受态工程菌E.coli BL21（DE3）,获得阳性重组工程菌,经IPTG诱导获得表达融合蛋白,试剂盒纯化蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,用VP1蛋白免疫开产母鸡,收集鸡蛋,利用EGG stractTM IgY Purification System试剂盒提取卵黄抗体IgY,间接ELISA测滴度,SDS-PAGE和Western blotting验证其表达量和免疫活性.结果 本实验成功扩增出肠道病毒EV71 BrCr株VP1基因,获得了含重组表达质粒pET28a/VP1的阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1蛋白,VP1经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,利用纯化后VP1蛋白免疫产蛋母鸡,提取的IgY经ELISA 鉴定后其滴度为1：104,SDS-PAGE和Western blotting证实为抗VP1的特异性IgY.结论 成功的从EV71 BrCr株扩增出VP1基因,构建了PET28a/VP1表达载体,获得高效表达融合蛋白,免疫产蛋母鸡后制备高效价抗VP1蛋白的特异性IgY.
- 汪六庆胡元生沈继龙刘宜升
- 关键词：人肠道病毒71型卵黄抗体IGY
- EV71病毒致病机制的研究现状被引量：1
- 2013年
- 最近，肠道病毒71型humanenterovirus，EV71）病毒受体的发现对于病毒受体的研究方法和病毒致病性的研究都有参考意义，同时也为抗EV71药物的研制提供了重要的理论基础。因此，本文就EV71病毒结构，流行病学特点简单介绍，同时重点介绍EV71病毒受体以及病毒致病机制方面的研究进展。
- 汪六庆徐海红
- 关键词：肠道病毒71型肠道病毒致病机制
- 2型糖尿病患者甲状腺功能与血糖、颈动脉内膜中层厚度及斑块积分的关系被引量：4
- 2023年
- 目的探讨2型糖尿病患者甲状腺功能与血糖、颈动脉内膜中层厚度(IMT)、颈动脉斑块积分的关系。方法选取2018年5月至2021年9月合肥市第三人民医院收治的2型糖尿病患者204例,均对其行甲状腺功能[三碘甲状腺原氨酸(TT_(3))、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、甲状腺激素(TT_(4))、游离甲状腺素(FT_(4))、促甲状腺激素(TSH)]、糖代谢相关指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]及颈动脉IMT检测,并评估颈动脉斑块积分。根据甲状腺激素水平将所有患者分为正常组、甲状腺功能减退(甲减)组、甲状腺功能亢进(甲亢)组,对比各组糖代谢相关指标水平、颈动脉IMT及颈动脉斑块积分,并采用Pearson相关性分析法分析各项指标之间的相关性。结果204例2型糖尿病患者中,正常组126例,甲减组61例,甲亢组17例。甲减组及甲亢组颈动脉IMT及颈动脉斑块积分均明显高于正常组(P<0.05),甲亢组FPG、2 hPG、HbA1c、HOMA-IR均明显高于正常组与甲减组(P<0.05)。相关性分析结果显示,在甲减组及甲亢组中,TT_(3)、FT_(3)、TT_(4)、FT_(4)与FPG、2 hPG、HbA1c、HOMA-IR均呈正相关(P<0.05),与FIns呈负相关(P<0.05);此外,TT_(3)、FT_(3)、TT_(4)、FT_(4)与颈动脉IMT、颈动脉斑块积分在甲减组及甲亢组中分别呈负相关和正相关(P<0.05);甲减组的TSH与FPG、2 hPG、HbA1c、HOMA-IR均呈负相关(P<0.05),与FIns、颈动脉IMT、颈动脉斑块积分均呈正相关(P<0.05)。结论2型糖尿病患者存在甲状腺功能异常情况,并以亚临床甲减及临床甲减为主,2型糖尿病并甲状腺功能异常者与糖代谢、颈动脉IMT、颈动脉斑块积分关系密切。
- 王娟高学祥殷应传汪六庆蒋文韬韩成建
- 关键词：甲状腺功能亢进症甲状腺功能减退症颈动脉内膜中膜厚度血糖
- 抗弓形虫腺苷激酶IgY的制备及理化性质的研究被引量：4
- 2016年
- 目的制备抗重组刚地弓形虫腺苷激酶（AK）的抗体IgY,对IgY进行特异性鉴定,并用间接ELISA的方法进行滴度、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶等理化性质的研究。方法利用弓形虫AK蛋白,免疫产蛋母鸡,制备并纯化抗AK的卵黄抗体IgY,SDS-PAGE和Western blot进行特异性分析,间接EILSA进行滴度和理化性质的检测。结果 SDS-PAGE检测IgY分子量与理论值一致;Western blot显示制备的IgY为抗AK的特异性IgY;二喹啉甲酸（BCA）法测浓度为4.25 mg/ml;间接ELISA检测滴度为1∶1×10~5;耐热,温度80℃时作用5 min不降解;耐碱,pH为8.5时,作用120 min不降解;30%岩藻糖可以完全抑制在pH等于3时的迅速降解;37℃胃蛋白酶作用120 min不降解。结论本研究成功制备并鉴定了抗AK的IgY,IgY具有滴度和浓度高、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶的性质,为下一步的研究提供了理论依据。
- 汪六庆周银娣徐海红
- 关键词：弓形虫腺苷激酶卵黄抗体IGY
