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汪成富: 作品数：31 被引量：78H指数：8; 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>

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[A_(15)Asn,A_(17)Pro,A_(21)Ala]-胰岛素的体内外生物活性: 1999年; A 15 Asn,A 17 Pro,A 21 Ala] insulin was synthesized by the Fmoc solid phase synthetic method to study the biological significance of the helix in the C terminal region of A chain of insulin.In order to make this helix unable to form,Asn and Pro were utilized to substitute A 15 Gln and A 17 Glu,respectively,according to the Chuo Fasman method.The biological activity assays showed that this insulin analogue held only 10% of the biological activities of native insulin.The results suggest that the loss of the A12 18 helix in A chain leads to a remarkable decrease of biological activities of insulin,and this helix is significant to the three dimensional structure and biological functions of insulin.; 汪成富姜智阮中中揭新凤; 关键词：胰岛素类似物生物活性

产朊假丝酵母全细胞转化合成谷胱甘肽的营养条件被引量：4: 2014年; 为了进一步提高产朊假丝酵母全细胞转化生物合成谷胱甘肽(GSH)的能力,利用响应面分析方法对酵母培养的发酵培养基进行优化。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman设计筛选出显著影响GSH转化力的2个主要因素:葡萄糖和KH2PO4。采用最陡爬坡试验和响应面设计预测了葡萄糖和KH2PO4的最佳质量浓度分别为58.5和17.2 g/L。验证实验结果表明,在该优化培养基条件下,酵母细胞的GSH转化力为1.54 mg/(g·h),比优化前提高了1倍。该结果为类似的采用全细胞转化法高效合成有用化学品的研究与开发提供了可行的优化思路。; 朱健胥京京汪成富卫功元; 关键词：谷胱甘肽产朊假丝酵母

人直肠及其癌组织DNA的RAPD多态性分析被引量：2: 2002年; 目的　研究细胞癌变后DNA结构的改变与寻找与癌变有关的DNA片段。方法　采用AP -PCR方法扩增直肠癌及其癌旁和正常组织DNA。结果　引物E1( 5′CGGCCCCTGT 3′)对直肠癌、癌旁组织和正常直肠组织的DNA扩增产物的电泳图谱表现出多态性 ,而且分别得到直肠癌组织特异的DNA片段K851和正常直肠组织特异的DNA片段K10 72 、K776 。结论　直肠细胞癌变后DNA结构在引物E1序列处发生了改变 ;DNA片段K851、K10 72 和K776 可能与细胞癌变有关。; 阮中中汪成富陆挺王畅; 关键词：直肠癌肿瘤相关基因多态性分析

结核分枝杆菌Ag85A在毕赤酵母中的表达、纯化及酶联免疫斑点试验研究: 2012年; 目的利用毕赤酵母表达和纯化结核分枝杆菌Ag85A蛋白,以期得到高效刺激T淋巴记忆细胞产生γ-干扰素的特异性抗原。方法用PCR扩增得到Ag85a基因,构建出重组质粒pPic9k-85a,通过电转化进入毕赤酵母,经遗传霉素G418抗性筛选、硫酸铵沉淀浓缩及离子交换层析纯化得到目的蛋白。最后以大肠杆菌和毕赤酵母表达的Ag85A分别为抗原刺激物进行酶联免疫斑点(Elispot)试验,分析其刺激BCG免疫小鼠T淋巴细胞产生γ-干扰素(IFN-γ)的能力。结果在毕赤酵母中成功克隆并稳定表达了Ag85A蛋白,Elispot检测结果表明,毕赤酵母比大肠杆菌产生的Ag85A蛋白,对小鼠T淋巴细胞的刺激效果更加明显(P<0.05),能产生更多的免疫斑点。结论毕赤酵母表达的Ag85A蛋白可以更高效的刺激T淋巴细胞,可用于检测结核杆菌感染诱导的细胞免疫应答。; 冯丽萍张平静汪成富孙晓璐樊小英李忠明; 关键词：毕赤酵母细胞免疫

miR-195重组腺病毒表达载体构建及在细胞中的表达: 2008年; 目的:利用AdEasy系统构建miR-195的腺病毒表达载体,为研究miR-195的功能提供条件。方法:将miRNA-195前体序列从已构建的pcDNA-miR-195载体中克隆进穿梭载体pAdTrack-CMV,通过与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中高效同源重组,获得完整的重组腺病毒质粒。利用HEK293细胞包装并扩增重组腺病毒Ad-195。Ad-195感染肺癌细胞A549后,利用miRNA的定量RT-PCR技术检测Ad-195在细胞中表达miR-195情况。随后荧光素酶报告基因实验证明,Ad-195表达的miR-195能够作用于BCL2基因上预测的miR-195靶位点。结果:实时定量PCR检测显示,Ad-195感染肺癌细胞A549后,miR-195表达水平有显著的上调。结论:miR-195的腺病毒表达载体构建成功,能够用于在细胞内过表达具有生物学功能的miR-195。; 张浩明付汉江铁轶朱捷邢瑞云汪成富郑晓飞; 关键词：微RNA 腺病毒科质粒 A549

W316bp探针鉴定高、低产王浆西蜂DNA分子特异标记的研究被引量：14: 2001年; W31 6bp(bp ,basepair)是不同三品系高产王浆西蜂 (浙农大、平湖及萧山等意蜂 )以随机引物W ( 5’ CGGCCCCGGT 3’)通过RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) PCR扩增获得的一个共同的特异DNA片段 ,然后将此片段用地高辛配基标记成探针 ,再与高、低产浆西蜂的基因组DNA及PCR扩增产物分别进行斑点杂交及Southern杂交。结果W 31 6bp探针只与高产王浆西蜂的PCR扩增产物及其基因组DNA杂交。; 张雅娟蒋滢王尉平汪成富葛凤晨张大隆; 关键词：西蜂 SOUTHERN杂交斑点杂交 DNA分子标记

制备K700bp成探针与美意和平湖两品系西蜂RAPD-PCR扩增产物及它们基因组DNA分子杂交的研究被引量：10: 2000年; Ｋ７００ｂｐ是高产蜜西蜂引物Ｋ（５’－ＣＧＧＣＣＣＣＴＧＣ－３’），通过ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增出来的一个特有ＤＮＡ片段。然后将Ｋ７００ｂｐ制备成探针再与高、低产蜜西蜂的ＰＣＲ产物及它们的基因组进行杂交。结果Ｋ７００探针只与高产蜜西蜂的ＰＣＲ产物及其基因组杂交，证明Ｋ７００ｂｐ确实是高产蜜西蜂的一个特有ＤＮＡ片段。; 蒋滢沈伟华汪成富黄超群张大隆薛运波; 关键词：西蜂探针基因组DNA

3个八肽的胰岛素受体结合和体内生物活性: 1998年; 用固相方法合成了与胰岛素有关的3个八肽。在高浓度时，H－Phe－Phe－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH和H－Val－Gly－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH具有明显的胰岛素受体结合活力；而H－Val－Cys（SSO3-）－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH则无此活力，这表明前2个八肽在空间构象上与胰岛素受体结合部位有部分相似．然而．它们都没有明显的降血糖作用。; 汪成富黄超群张新堂; 关键词：多肽胰岛素受体生物活性

ColE2质粒复制增强片段的克隆: 2004年; 目的　研究ColE2质粒复制起始点下游能增强质粒复制的DNA片段enhancerⅡ的作用机制。方法　以pEC2 2为模板扩增出含ColE2ori enhancerⅡ的DNA目的片段 ,并将经双酶切的目的片断克隆到载体 pBlue scriptⅡSK+ 中。经限制性酶切凝胶分析、PCR鉴定、DNA测序 ,筛选出阳性重组质粒。结果与结论　该实验成功获得重组质粒pBluescriptColE2ori enhancerⅡ ,从而为下一步探索该片段增强复制作用的机制奠定了基础。; 胡继红汪成富; 关键词：DNA复制增强子克隆