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沈月华: 作品数：39 被引量：156H指数：7; 供职机构：湖州市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：湖州市科技计划项目浙江省医药卫生科学研究基金湖州市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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2019年浙江省湖州市副溶血性弧菌病原学特征分析被引量：10: 2021年; 目的了解2019年浙江省湖州市副溶血性弧菌检出株的血清型别、毒力基因携带情况、抗生素敏感性以及分子分型特征。方法收集湖州市2019年分离到的92株副溶血性弧菌阳性菌株,并对其开展血清学试验、毒力基因检测、抗生素敏感试验和脉冲场凝胶电泳分子分型。结果病例源菌株主要血清型为O3∶K6,毒力基因型为tlh^(+)tdh^(+)trh^(-),食品源主要血清型为O2∶Kut,毒力基因型为tlh^(+)tdh^(-)trh^(-)。分离株对氨苄西林有很高的耐药性,耐药率达到90.22%(83/92);其次为庆大霉素和四环素。分子分型显示,经Not I酶酶切后,91株副溶血性弧菌产生81个PFGE带型,相似度达到85.00%以上的克隆系有16个。结论2019年湖州市副溶血性弧菌菌型多样性可能是疾病高发的原因之一。淡水产品和海水产品可能存在交叉污染,需加强相应监管。; 严伟沈月华徐德顺; 关键词：副溶血性弧菌病原学特征分子分型

HIV-1病毒载量检测在WB阴性病例诊断中的应用被引量：10: 2021年; 目的探讨艾滋病病毒(HIV)抗体蛋白印迹试验(WB)结果阴性标本的病毒载量检测情况,评价病毒载量试验对"HIV抗体阴性"病例随访诊断的价值。方法对2017-2019年34例筛查阳性、WB检测结果为HIV抗体阴性的样本,先用四代酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂和三代ELISA检测试剂进行检测,两种方法均阳性或一种方法阳性再进行WB检测,结果为阴性的样本两种补充实验同时进行,首先立即联系患者采集两支EDTA-K3抗凝血,分别于24小时内进行病毒载量和CD4+T淋巴细胞(简称CD4细胞)检测,然后于4周随访采集血清进行WB检测。结果34例WB检测结果阴性患者中,病毒载量<20拷贝/mL 12例,20~5000拷贝/mL 8例,>5000拷贝/mL14例;4周随访WB结果阳性10例,阴性11例,不确定13例;CD4细胞<200个/μL 4例,200~500个/μL 18例,>500个/μL 12例;其中1例接受过抗病毒药物治疗,其余均无抗病毒治疗史。病毒载量结果与抗体随访结果以及CD4细胞计数的相关性均一致。结论结合两种补充实验方法,23例阳转或需继续随访,为防止HIV感染者被遗漏,筛查阳性、WB检测结果阴性的疑难样本应立即检测病毒载量,以多种检测结果为依据,结合流行病学和临床资料综合判定才是最科学最准确的判定方法。; 朱晓娟吴晓芳徐德顺查赟峰沈月华; 关键词：病毒载量艾滋病病毒蛋白印迹试验

2010年-2021年浙江省湖州市手足口病病原监测及流行病学特征分析被引量：2: 2022年; 目的分析湖州市2010年-2021年手足口病病原特征和流行状况,为疫情防控提供参考依据。方法收集湖州市2010年-2021年各区县上送的临床诊断手足口病病例样本检测肠道病毒(enterorinus,EV)、肠道病毒71型(EV 71)、柯萨奇病毒A16型(Corxsackie vius A16,Cox A16)、柯萨奇病毒A6型(Cox A6)以及柯萨奇病毒A10型(Cox A10)核酸。结果4106份标本中肠道病毒核酸阳性2940份,阳性率为71.60%。不同型别阳性率依次为其他EV(27.47%)、Cox A16(18.87%)、Cox A6(12.86%)、EV 71(10.89%)和Cox A10(1.51%)。不同年份.不同季节手足口病病原特征出现动态变化,手足口病的发病高峰为每年的5月-7月,11月-12月又出现一个小高峰。男、女儿童手足口病阳性率分别为72.94%和69.63%,不同性别手足口病阳性率差异有统计学意义(Χ^(2)=5.334,P<0.05)。结论2010年-2021年湖州市手足口病病原存在多样性,病例分布呈现明显的季节性,感染人群主要以5岁以下儿童为主。应加强对手足口病病原特征的监测,有效防控手足口病疫情的发生。; 吴晓芳纪蕾查赟峰沈月华卢忠豪; 关键词：手足口病肠道病毒病原监测

多重荧光RT-PCR同时检测GⅠ型和GⅡ型诺如病毒方法的建立被引量：15: 2011年; 目的建立可同时检测GⅠ型和GⅡ型诺如病毒的双重荧光RT-PCR快速检测方法,并应用于临床标本的检测。方法使用针对GI型和GⅡ型诺如病毒各亚型代表株保守序列设计的特异性引物和TaqMan探针,通过调整引物、探针浓度优化最佳反应条件,建立一步法荧光RT-PCR快速检测反应体系。对该方法的灵敏度、特异性、稳定性进行评估,并对临床粪便标本进行检测,与已有的单重荧光RT-PCR方法进行比较。结果实验结果表明,该检测方法特异性强,对GⅠ型、GⅡ型诺如病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、甲型肝炎病毒进行检测,均无交叉反应;对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒核酸的最低检出限分别可达1pg/mL和10pg/mL,并且重复性好;对101份临床标本分别用已有的单重荧光RT-PCR和本文建立的多重荧光RT-PCR进行检测,结果显示本文建立的多重荧光RT-PCR方法对GⅠ型诺如病毒的检测能力优于前者。结论本研究建立的多重荧光RT-PCR方法能同时对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒进行快速检测,并且灵敏度高,特异性好,可用于感染性腹泻暴发中诺如病毒的快速检测。; 纪蕾韩建康吴晓芳徐德顺邱妤怡陈莉萍沈月华查赟峰; 关键词：诺如病毒

依赖核酸扩增技术在轮状病毒检测中的应用被引量：5: 2015年; 目的将一种新颖的核酸扩增技术—依赖核酸扩增技术(nucleic acid sequence-based amplification NASBA)应用于轮状病毒的快速检测与辅助诊断。方法根据美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)轮状病毒VP7基因保守序列设计引物,建立NASBA检测方法,进行特异性、灵敏度和重复性试验,以所建立方法和RT-PCR方法同时对108例临床病毒性腹泻患者粪便样本进行检测。结果所建立的NASBA方法对轮状病毒具有较好的稳定性和高度特异性,与诺如病毒等8种腹泻相关病毒均无交叉反应,灵敏度达5μg/L。108份粪便样本中,用RT-PCR方法检出轮状病毒阳性11份,用NASBA方法检出阳性样本13份。结论本研究应用的轮状病毒NASBA检测方法特异、灵敏、快速简便,适用于轮状病毒的日常监测和暴发疫情的应急诊断。; 徐德顺陈莉萍朱晓娟吴晓芳纪蕾沈月华; 关键词：轮状病毒

肠道病毒71型湖州分离株的遗传进化和重组分析被引量：2: 2016年; 目的对湖州市肠道病毒71型(EV71)进行基因特征及重组特点分析。方法对2011-2012年湖州市EV71分离株进行全基因组测序,并与其基因型及A组肠道病毒其他血清型的原型株进行全序列比对,使用Mega 4.0软件绘制系统进化树。然后利用Simplot 3.5.1软件进行相似性分析,对基因重组加以验证。结果 P1区系统进化分析显示,2011-2012年湖州市EV71株属于C4基因型的C4a亚型。P1、P2、P3区的系统进化和相似性分析证实湖州市分离株在非结构蛋白2B编码区存在EV71 C基因型和Cox A16、14、4型间重组。结论 2011-2012年湖州市EV71分离株为C4a亚型,与2004年以来中国大陆优势株流行趋势一致。EV71 C4基因型湖州市株存在型间重组现象。; 吴晓芳纪蕾徐德顺陈莉萍沈月华朱晓娟查赟峰; 关键词：肠道病毒71型系统进化分析

2013-2019年浙江省湖州市急性胃肠炎病例GⅡ.P7-GⅡ.6型诺如病毒基因特征分析被引量：4: 2021年; 目的分析2013—2019年浙江省湖州市急性胃肠炎病例诺如病毒基因特征,为疾病监测和防控提供参考。方法采用荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对2013年12月、2014年4、12月、2019年3月发生的4起学校/托幼机构急性胃肠炎患者送检粪便标本进行诺如病毒核酸检测。采用RT-PCR法对核酸阳性标本的多聚酶和衣壳蛋白部分区域进行扩增,并对扩增产物进行序列测定。利用在线分型工具和系统进化分析对病原序列进行基因特征分析。结果共计28份标本中分别有5、4、2、5份为GⅡ型诺如病毒核酸阳性,阳性率为57.1%(16/28)。4次疫情各有1份标本测序成功;在线分型和系统进化分支分析显示,4起疫情的病原均为GⅡ.P7-GⅡ.6重组型诺如病毒,但进化分支不同,其中2013年疫情标本检出GⅡ.P7-GⅡ.6c型;2014年2起疫情均为GⅡ.P7-GⅡ.6b型,2019年疫情中检出的GⅡ.P7-GⅡ.6a型。结论GⅡ.P7-GⅡ.6型重组型诺如病毒是引起湖州市2013—2019年4起急性胃肠炎暴发疫情的病原体,每年毒株存在一定基因进化分支的差异。鉴于该病毒在全球范围内具有持续和广泛的流行能力,应进一步加强对该型别重组型诺如病毒的监测。; 纪蕾刘光涛沈月华查赟峰徐德顺; 关键词：诺如病毒胃肠炎基因特征

2016年浙江省湖州市急性胃肠炎病例诺如病毒感染状况及其基因型别特征被引量：8: 2018年; 目的调查浙江省湖州市急性胃肠炎病例诺如病毒的感染状况、基因型别及其动态变化趋势。方法于2016年采集湖州市食源性疾病主动监测哨点医院的急性胃肠炎病例粪便标本。采用特异性引物探针,应用real-time RT-PCR对标本进行诺如病毒核酸检测。同时对阳性标本衣壳蛋白基因片段进行扩增和测序,结合在线分型工具和序列系统进化分析诺如病毒基因型别。结果 501份急性胃肠炎患者粪便标本检出诺如病毒阳性101份,阳性率20.16%,以GⅡ基因组为主(86.14%);男性检出率为20.75%(50/241),女性检出率为19.54%(51/260),差异无统计学意义。不同年龄段病例均检出诺如病毒,<5岁儿童检出率最高。诺如病毒感染全年均有发生,但6-9月呈低流行状态。2016年湖州市流行的诺如病毒基因型别多样,包括GⅡ.17、GⅡ.4 Sydney_2012、GⅡ.3、GⅡ.13、GⅠ.6、GⅡ.2、GⅡ.6、GⅠ.7共8种基因型别。GⅡ.17和GⅡ.4 Sydney_2012呈月份交替流行。结论湖州市急性胃肠炎病例诺如病毒基因型别多样,且呈交替流行现象,应进一步加强监测各型别诺如病毒在本地的流行范围及型别分布变化情况。; 纪蕾陈莉萍沈月华严伟吴晓芳徐德顺朱晓娟查赟峰; 关键词：诺如病毒胃肠炎基因分型

2018—2020年湖州市食源性疾病患者感染沙门菌耐药与分子分型研究: 2022年; 目的分析湖州市食源性疾病患者所分离沙门菌的血清型别、耐药状况以及分子分型特征,为沙门菌引起的食源性疾病防治提供科学依据。方法收集2018—2020年湖州市6家食源性疾病监测哨点医院分离到的105株阳性沙门菌株,采用玻片凝集法、微量肉汤稀释法和脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)法,分别进行血清学分型、抗生素最小抑菌浓度测定和分子分型。结果105株沙门菌主要是鼠伤寒沙门菌(37/105)和肠炎沙门菌(19/105)。沙门菌菌株对30种抗生素的耐药率为0%~70.48%,氨苄西林耐药率最高,达到70.48%(74/105),其次为四环素和多西环素,耐药率分别为67.67%(71/105)和65.71%(69/105)。分子分型显示,经XbaⅠ酶酶切后,105株沙门菌产生93个PFGE带型,各带型相似度28.50%~100.00%。结论湖州地区食源性沙门菌耐药情况严重,PFGE带型既有多样性,又具有优势带型。; 严伟查赟峰纪蕾沈月华吴丹青; 关键词：沙门菌食源性疾病耐药性脉冲场凝胶电泳分子分型

2018—2020年湖州市腹泻人群致泻大肠埃希菌流行特征及病原分析被引量：2: 2021年; 目的了解湖州市腹泻人群中致泻大肠埃希菌(DEC)的感染状况、主要毒力基因以及耐药情况。方法对2018—2020年各哨点医院腹泻患者粪便标本进行分离,采用多重荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法对DEC分离株进行毒力基因检测,用微量肉汤稀释法进行药敏试验。结果共检出DEC阳性病例293例,分离菌株294株。肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)占55.4%(163/294),肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)占29.6%(87/294),肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)占11.2%(33/294),肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)占3.4%(10/294),肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)占0.3%(1/294)。随机选取117株DEC对氨苄西林、萘啶酸、氨苄西林-舒巴坦、四环素进行耐药性检测,耐药率分别为70.9%、60.7%、53.8%、51.3%。多重耐药率达到55.6%。对亚胺培南、头孢他啶、阿莫西林-克拉维酸、头孢西丁的敏感率为99.1%、92.3%、92.3%和91.5%。DEC引起的腹泻发病高峰在7—8月,20~39岁为主要感染人群。结论湖州市腹泻人群感染DEC基因型别以EAEC和ETEC为主,存在多重抗生素耐药,病例分布呈现明显的季节性,感染人群以青壮年为主。; 吴晓芳陈莉萍严伟沈月华卢忠豪; 关键词：致泻大肠埃希菌毒力基因耐药

沈月华

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