温崇庆 作品数:55 被引量:244 H指数:10 供职机构: 广东海洋大学水产学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技厅农业攻关项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
水产养殖用蛭弧菌类生物制剂的检测 被引量:10 2009年 通过双层平板法以不同细菌为宿主测定了8个厂家蛭弧菌类生物制剂的噬斑含量及噬斑分离物的宿主裂解范围;以3对靶向不同类群蛭弧菌类生物的特异引物对各产品及其噬斑分离物进行了PCR检测;对两株代表性蛭弧菌分离物的16S rRNA基因进行了测序,并通过构建蛭弧菌科进化树分析了它们的系统地位。结果表明,被检测的8个蛭弧菌类生物制剂中有6个质量明显不合格,仅两个样品被蛭弧菌科特异引物检测为阳性,被双层平板法证实有噬斑出现。其中一个样品JSF中存在两种形态和宿主范围不同的噬斑分离物,且不同宿主菌计数结果存在明显差异。16S rRNA基因序列分析表明这两种噬斑分离物JSF1和JSF2,分别属于蛭弧菌科的类群1(噬菌蛭弧菌)和未定种的类群5。但另一样品的噬斑分离物则被证实为非蛭弧菌类生物。 温崇庆 薛明 张金燕 黄瑜 周世宁关键词:水产养殖 微生物制剂 RRNA基因 基于分离培养和高通量测序分析一种自然发酵饲料的微生物组成 2023年 为揭示一种对虾养殖用自然发酵饲料的微生物组成,通过MRS、营养肉汤(NB)、豆芽汁(BSJ)平板分别计数其微生物含量,并对分离代表菌株16S rRNA或5.8S-ITS基因进行测序分析和鉴定;分别利用高通量测序16S rDNA V4区和ITS2区研究发酵饲料细菌和真菌菌群的多样性。分离培养结果表明:MRS、NB和BSJ平板对发酵饲料乳酸菌、细菌和酵母菌的计数结果分别为4.80×10^(7)、5.00×10^(6)、3.95×10^(6) cfu/g;从分离代表菌中鉴定出3种芽孢杆菌,4种分别属于慢生乳杆菌属、宿主关联乳杆菌属、干酪乳酪杆菌属和黏液乳杆菌属的乳酸菌,以及1种酵母菌库德毕赤酵母。高通量测序分析表明:乳杆菌科在发酵饲料细菌群落中占绝对优势,并包含20个分类操作单元(OTU)和9个属,其中乳杆菌属和黏液乳杆菌属相对丰度分别为66.95%和3.36%;假单胞菌科、依格纳季氏菌科和微杆菌科分别为第2、第3和第4优势科,其下的假单胞菌属、食肉蝇单胞菌属、假棍状杆菌属相对丰度分别为11.81%、10.16和3.58%;真菌群落中毕赤酵母科占绝对优势,其次为丝孢酵母科,两者分别完全由毕赤酵母属和丝孢酵母属构成,相对丰度分别为85.73%和12.54%。综上,该自然发酵饲料中富含乳酸菌、芽孢杆菌和毕赤酵母等有益活菌,且乳酸菌种类丰富。 梁国健 洪居恳 丁茂昌 薛明 陈伟哲 梁华芳 温崇庆关键词:发酵饲料 高通量测序 酵母菌 芽孢杆菌 Cd^2+和Hg^2+对波纹龙虾的急性毒性 被引量:1 2020年 采用毒理学方法,在水温28.0~29.0℃下于0.5 m^3的圆形玻璃钢桶中,用氯化镉和氯化汞配成不同质量浓度的Cd^2+和Hg^2+试验溶液,研究Cd^2+和Hg^2+对体质量49.10~52.10 g波纹龙虾的毒性,用直线内插法求得Cd^2+和Hg^2+的半致死质量浓度及安全质量浓度。试验结果显示,Cd^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是2.5169、1.3378、1.0445、0.9500 mg/L,安全质量浓度为0.0095 mg/L;Hg^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是0.0560、0.0333、0.0246、0.0227 mg/L,安全质量浓度为0.000227 mg/L。Hg^2+对波纹龙虾的毒性作用强于Cd^2+的毒性作用。 梁华芳 卓宏标 廖永岩 洪桂鑫 温崇庆关键词:重金属离子 毒性 安全质量浓度 高通量测序分析DNA提取引起的对虾肠道菌群结构偏差 被引量:30 2016年 【目的】通过高通量测序技术,评价不同DNA试剂盒提取引起的对虾肠道菌群结构偏差,了解健康凡纳滨对虾肠道菌群结构特征。【方法】分别以细菌、粪便和组织DNA试剂盒3次重复提取凡纳滨对虾肠道总DNA(分别编号为SIB,SIS和SIT),检测DNA含量、纯度及其16S r DNA V4区可扩增性,进一步采用Illumina Mi Seq高通量测序比较SIB和SIS样品菌群组成和多样性。【结果】细菌试剂盒提取的虾肠总DNA效果最好,粪便试剂盒次之,而组织试剂盒所提DNA含量低且难以被扩增。从SIB和SIS样品分别获得52151±5085和55296±5147条有效序列,同一(46800条)测序深度下,SIS样品OTU(operational taxonomic unit)数量和Shannon多样性指数均显著高于SIB的,而SIB样品间OTU重复性则优于SIS样品间的。从SIB和SIS样品鉴定的优势门一致,均包括变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、浮霉菌门(Planctomycetes)、放线菌门(Actinobacteria)和蓝细菌门(Cyanobacteria),但不同分类水平上绝大多数优势菌群丰度在两种样品间差异明显。【结论】高通量测序分析表明对虾肠道菌群结构因DNA提取方法不同而呈现显著偏差;本研究健康凡纳滨对虾肠道核心菌群主要由发光杆菌属(Photobacterium),乳球菌属(Lactococcus),弧菌属(Vibrio),Aliivibrio和3个分类未定属构成。 温崇庆 何瑶瑶 薛明 梁华芳 董俊德关键词:DNA提取 凡纳滨对虾 肠道菌群 高通量测序 胶红酵母分离鉴定及其对凡纳滨对虾幼体存活和变态的影响 被引量:2 2021年 用平板划线或稀释法从湛江的凡纳滨对虾、斑节对虾、翡翠贻贝、华贵类栉孔扇贝和褐蓝子鱼肠道中分离红酵母。根据形态和碳源利用特征进行分型,利用5.8S-ITS和26S rRNA基因测序分析鉴定代表菌株,通过间歇饥饿胁迫试验,比较代表菌株对凡纳滨对虾无节Ⅵ期到溞状Ⅱ期幼体存活影响,筛选出最优菌株,进而研究目标菌株从无节Ⅵ期开始以单次低剂量、单次高剂量、多次低剂量和多次高剂量,以及只在无节Ⅳ期(提前)以单次高剂量方式投菌对幼体存活和变态的影响。研究结果显示,分离得到19株海洋红酵母,根据形态和碳源谱分为6个类型(6株代表菌编号为RY1~RY6),其中RY2、RY3、RY4和RY5均为胶红酵母,RY1和RY6分别为双倒卵形红酵母和斯鲁菲亚囊担菌。间歇饥饿胁迫下,与对照组相比,菌株RY1~RY5均能显著提高溞状Ⅱ期幼体存活率,其中RY4又显著高于其他菌株(P<0.05)。不同投菌方式下RY4对溞状期幼体存活率无显著影响(P>0.05),但提前、单次和多次3个高剂量投菌组均能显著促进溞状幼体变态(P<0.05);且营养受限条件下,糠虾Ⅰ期幼体存活率和水体酵母菌含量呈正相关。综上可得,胶红酵母较普遍存在于湛江海产经济动物肠道;菌株RY4可显著提高凡纳滨对虾幼体饥饿胁迫下的存活;对虾育苗期间多次添加高剂量或在幼体早期如无节Ⅳ期单次添加高剂量RY4,可有效促进幼体变态与营养不足时的存活。 宁为民 温崇庆 黄雪敏 柳敬旺 陈杰世 吕杰伟 梁华芳 薛明关键词:凡纳滨对虾 幼体 存活 变态 盐度对多纹钱蝶鱼生长的影响 2023年 为研究盐度对多纹钱蝶鱼幼鱼生长的影响,用体质量1.26~1.38 g的多纹钱蝶鱼鱼苗进行不同盐度梯度试验,6个试验盐度分别为0(淡水)、5、10、15、20和25,试验时间40 d。结果表明:养殖前10 d,在淡水(盐度为0)中多纹钱蝶鱼幼鱼的存活率最低,仅80.00%。10 d后,所有试验组多纹钱蝶鱼幼鱼的存活率均为100%。这表明多纹钱鲽鱼幼鱼对低盐度环境的耐受性强。试验期间盐度10处理组多纹钱蝶鱼的终末体质量、质量增加率、特定生长率均最大,分别为(68.71±1.11)g、(5 310.23±134.24)%和(10.00±0.03)%;盐度0处理组多纹钱蝶鱼的终末体质量、质量增加率、特定生长率均最小,分别为(53.71±0.81)g、(4 096.09±165.26)%和(9.34±0.04)%。不同盐度对多纹钱鲽鱼幼鱼的饵料系数有显著影响,盐度10处理组饵料系数最低,与其他处理组差异显著(P<0.05)。由此可见,多纹钱蝶鱼幼鱼对盐度的适应能力强,可在淡水和海水中养殖,适宜的盐度为5~25,最适生长盐度为10。 孙榕泽 梁华芳 温崇庆 王潘姝 黄佳宇关键词:盐度 饵料系数 存活率 RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾相关免疫基因表达的影响 2023年 初步研究RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾(Panulirus homarus)相关免疫基因表达的影响,采用qPCR技术检测PhCatC 1/2、PhTlr 13、PhLys和Phβ-G基因的表达,并观察肝胰腺组织的变化情况。结果表明:注射PhCatC 1-dsRNA后,PhCatC2表达量比对照组显著下降(P<0.05),与对照组相比PhTlr 13基因表达量在前期呈现显著升高,后下降的趋势,PhLys和Phβ-G基因的表达量均随dsRNA干扰时效的增加而增加;沉默PhCatC 2基因后PhTlr 13和Phβ-G基因的表达量随dsRNA干扰时效的增加而增加,PhCatC 1基因表达量呈现下上调交替的趋势,PhLys基因表达量表现出先下调后上调的趋势。通过PhCatC 1/2基因沉默后的分析初步推测,波纹龙虾可能通过促进Toll样受体和溶酶体通路来参与免疫应答,得出PhCatC 1/2基因具有免疫功能。 梁妃爽 梁华芳 黄佳宇 王潘妹 温崇庆关键词:RNA干扰 健康和发病凡纳滨对虾仔虾菌群结构比较 为揭示凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)仔虾3天(postlarvae 3,P3)的患病个体菌群特征及可能病原,本研究从健康和发病苗池采集仔虾,检测其异养细菌和弧菌含量;分别以细菌试剂盒(Ba)和粪便... 黄雪敏 温崇庆 王立群 陈第省 何瑶瑶 梁华芳 薛明关键词:凡纳滨对虾 仔虾 发病 菌群 高通量测序 波纹龙虾蜕壳周期的呼吸排泄和血淋巴生理学 被引量:5 2019年 【目的】研究波纹龙虾(Panulirus homarus)蜕壳周期内呼吸排泄、血淋巴生化指标和免疫酶活力的变化。【方法】选取蜕壳后期(A 期和B 期)、蜕壳间期(C 期)和蜕壳前期(D0,D1,D2,D3期)的波纹龙虾测定耗氧率和排氨率,并测定血淋巴中的离子含量、总蛋白含量和血细胞数量及免疫酶活力。【结果】波纹龙虾的耗氧率和排氨率从蜕壳后期到蜕壳间期均显著降低。耗氧率在D0 期显著上升,而排氨率在蜕壳前期逐渐减少,在D3期达到最低水平。血清Ca^2+含量在D1 期最高,并显著高于A期(P < 0.05)。K^+含量在D1 期则最低,在蜕壳周期中整体变化不显著(P>0.05)。Mg^2+和无机磷(Phos)含量在蜕壳周期中也无显著变化(P > 0.05)。血淋巴总蛋白含量在蜕壳后大幅减少,至蜕壳间期又显著提升(P <0.05),但与蜕壳前期相比差异不显著(P > 0.05)。血细胞数量在D2 期最高,而 B 期最低,分别为4.22×10^7 和2.40×10^7 mL-1。酚氧化酶活力在蜕壳周期中呈先下降后上升的变化趋势,而一氧化氮合酶活力在A 期最低,在其他时期之间未发现显著性差异(P >0.05)。【结论】波纹龙虾的呼吸排泄、血淋巴生化指标和免疫酶活力与蜕壳周期密切相关。 卓宏标 郑秋耀 梁华芳 廖永岩 潘海洋 罗嘉俊 温崇庆波纹龙虾对亚硝酸盐胁迫响应的转录组学分析 被引量:1 2022年 为了探究波纹龙虾Panulirus homarus对亚硝酸盐的胁迫响应机理,采用转录组学测序分析方法,进行了正常养殖条件下波纹龙虾(体质量为39.00 g±5.31 g)肝胰腺和质量浓度为80 mg/L亚硝酸盐胁迫7 d的肝胰腺转录组比较研究。结果表明:转录组共筛选得到264个差异表达基因,其中,86个基因上调表达,178个基因下调表达;GO功能注释显示,被注释的差异表达基因主要与结合、催化和代谢等功能有关;KEGG通路富集分析显示,差异表达基因在黏着斑、白细胞跨内皮层迁移、胰岛素抵抗、紧密连接、淀粉与蔗糖代谢等通路中显著富集;随机挑选9个差异表达基因进行qRT-PCR验证,发现荧光定量结果与测序结果基本一致。研究表明,在亚硝酸盐胁迫下,通过GO和KEGG分析发现差异表达基因主要富集在能量代谢、生长和免疫等通路中,挖掘出的数据可为后续研究提供科学参考。 梁妃爽 梁华芳 卓宏标 孙榕泽 王潘妹 温崇庆关键词:转录组 差异表达基因