熊智强
- 作品数：32 被引量：103H指数：6
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 链霉菌降解角蛋白的生化机制研究被引量：12
- 2006年
- 对弗氏链霉菌S-221变种降解角蛋白的生化机制进行了初步研究。该菌在角蛋白底物作用下诱导产生角蛋白酶。它是一种复合蛋白酶,含有二硫键还原酶和多肽水解酶等多种酶活性组分。硫酸钠、亚硫酸钠和巯基乙醇对角蛋白酶具有强烈的激活作用,其主要表现作用于角蛋白酶中的二硫键还原酶。亚硫酸钠在0·01mol/L浓度下不仅作用于二硫键还原酶,而且还作用于多肽水解酶。硫代硫酸钠对二硫键还原酶有强烈的抑制作用。角蛋白酶降解羽毛角蛋白首先是角蛋白酶中的二硫键还原酶使角蛋白中二硫键裂解产生变性角蛋白,然后变性角蛋白在多肽水解酶的共同作用下逐步水解成多肽、寡肽和游离氨基酸,使角蛋白彻底降解。在角蛋白降解过程中,角蛋白中的硫也随之转化成巯基化合物,H2S和硫酸盐3种含硫化合物存在于降解产物中。
- 黄林熊智强蔡华静郭美锦涂国全
- 关键词：角蛋白酶生化机制
- 黄海海域沉积物和庐山土壤样品中放线菌的分离、活性及生物多样性研究被引量：2
- 2015年
- 本研究采用均匀实验设计优化预处理条件来分离黄海海泥和庐山土壤样品中的放线菌。通过均匀实验得到最优的预处理条件为湿热50℃处理20 min,不进行超声处理以及添加苯酚。经过形态排重后,从海泥和庐山样品中分离得到86株和11株不同表型的放线菌。通过进一步的分子生物学鉴定,海泥中的86株放线菌分别属于3个不同的属,而庐山样品的11株分别属于4个不同的属。对这97株放线菌进行抗菌实验发现,18.5%的菌株对大肠杆菌有抑菌活性,7.2%的菌株对枯草芽孢杆菌有抑菌活性,但对酿酒酵母都无抑菌活性。
- 王燕萍熊智强杨靖亚王勇
- 关键词：放线菌海泥
- 高效合成萜类化合物的重组大肠杆菌底盘细胞及其制法和应用
- 本发明涉及一种高效合成萜类化合物的重组大肠杆菌底盘细胞及其制法和应用。具体地，本发明对大肠杆菌内源2‑C‑甲基‑D‑赤藻糖醇‑4‑磷酸(MEP)前体途径进行改造，利用改造后的大肠杆菌底盘细胞进行萜类化合物的高效生物合成，...
- 王勇熊智强李诗渊汪建峰
- 文献传递
- 链霉菌702生物活性物质抑菌的致死浓度和致死时间的测定被引量：2
- 2005年
- 通过对链霉菌702所产生物活性物质和纳他霉素及Nisin分别对黑曲霉、青霉、绿色木霉、枯草芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、产朊假丝酵母、啤酒酵母的抑制作用研究,试验结果得出链霉菌702所产生物活性物质对各种指示菌的半致死浓度和半致死时间,证明链霉菌702所产生物活性物质抑制效果比纳他霉素及Nisin强。试验结果为链霉菌702所产活性物质应用提供了有益的试验数据。
- 蔡华静熊智强涂国全
- 关键词：纳他霉素NISIN
- 3种药用植物内生真菌的多样性分析及产生物碱菌株的筛选被引量：3
- 2013年
- 目的探究药用植物蛇足石杉、曼地亚红豆杉和南方红豆杉内生真菌的多样性,以及从中筛选产生物碱的内生真菌。方法用传统的表面灭菌和组织剪切法处理植物样品,通过加有抗细菌抗生素的真菌培养基分离和富集植物内生真菌。根据内生真菌的表型特征和ITS序列,对其进行分类和多样性分析,并用Neighbour-Joining的方法构建系统进化树。利用Dragendorff试验检测各内生真菌的发酵液,筛选具有产生物碱潜力的菌株。结果从3种植物中共分离到764株内生真菌,挑选出具有代表性表型特征的菌株83株,对ITS序列进行比对和多样性分析表明,这些菌株分布于子囊菌门(Ascomycota)的3个纲、18个属。最后,采用Dragendorff试验从这83株真菌中筛选出青霉菌属(Penicillium)B14菌株具有产生物碱的潜力。讨论三种药用植物含有丰富多样的内生真菌分布。采用Dragendorff试验检测发酵液中的生物碱,该方法快速简便,能有效提高筛选速率,可应用于产生物碱微生物的高通量筛选。
- 杨迎迎熊智强王勇
- 关键词：药用植物内生真菌多样性生物碱
- 复杂天然产物合成人工生物系统的设计与构建被引量：1
- 2013年
- 天然产物是人类疾病预防和治疗药物的最重要来源。合成生物学技术的蓬勃发展为天然产物的开发注入了全新的活力。文中重点介绍了如何利用合成生物技术进行复杂天然产物合成人工生物系统的设计与构建,包括与此相关的生物元件理性设计、生物元件挖掘、途径装配与集成,模块的组装与系统的适配等内容。
- 汪建峰蒙海林熊智强王勇
- 关键词：合成生物学
- 一株真菌所产环缩酚酸肽类化合物的分离和鉴定
- 2014年
- 对一株真菌ZME及其所产的次级代谢产物进行分离鉴定。通过形态观察和ITS测序对真菌ZME进行菌株鉴定,并对其发酵液上清液和菌丝体分别用乙酸乙酯和甲醇萃取;萃取后的有机试剂粗提物经硅胶柱层析和半制备HPLC分离纯化;纯化后的各组分利用光谱分析进行结构解析。结果表明,真菌ZME初步判断属于Beauveria felina。对这株真菌次级代谢物结构解析,共鉴定5个化合物Isaridin B、Isaridin A、Roseocardin、Roseotoxin B和Destruxin B,这5个化合物均为环缩酚酸肽类化合物,其中Roseocardin具有抗细菌活性。
- 张明娥熊智强刘巧霞杨迎迎王勇
- 一种提高大肠杆菌异源合成聚酮类化合物的方法和用途
- 本发明涉及一种提高大肠杆菌异源合成聚酮类化合物的方法和用途。通过来弱化宿主菌中sucC、talB等72个基因的表达，显著提高大肠杆菌异源合成聚酮类化合物的产量，最高产量提高率可达到60％以上。红霉素是目前聚酮类化合物生物...
- 王勇熊智强宋书杰刘巧霞汪建峰
- 文献传递
- 利用合成调控RNA技术提高大肠杆菌异源合成红霉素前体6-脱氧红霉内酯B产量被引量：1
- 2015年
- 红霉素为代表的聚酮类化合物已经成功的在大肠杆菌中实现了异源合成,但其产量仍然较低（仅-10 mg/L）。本研究基于大肠杆菌全基因组代谢模型iAF1260,利用通量平衡分析预测了红霉素母核6-脱氧红霉内酯（6-Deoxyerythronolide B,6-d EB）生物合成的关键靶点,通过合成调控RNA技术（Synthetic small regulatory RNAs,sRNAs）对预测的靶点进行验证。结果表明,以弱化lsrC（编码LsrABC转运蛋白）和ack A（编码乙酸激酶蛋白）为代表的关键靶点改造可以显著提高6-d EB异源合成,提高幅度可达48.7%。通过弱化靶点的组合,进一步改善了6-d EB的异源合成,产量最终可达22.8 mg/L,比出发菌株产量提高59.9%。本研究发现和确认了6个有效的调控靶点,最终成功地改善了6-d EB在大肠杆菌中的异源合成。研究表明,通量分布比较分析结合sRNAs技术是一种有效的方法提高6-d EB异源合成,也为改善其他代谢产物的异源合成提供了可供借鉴的研究思路。
- 宋书杰熊智强王勇
- 关键词：大肠杆菌
- 链霉菌702菌株所产抗真菌单体组分DZP-8和DZP-9的分离纯化与制备被引量：6
- 2011年
- 用乙醇浸提链霉菌702菌株发酵液,滤液真空浓缩成油状物,再用乙酸乙酯萃取,萃取液真空浓缩成浸膏,浸膏通过硅胶柱层析,以氯仿与甲醇不同配比进行梯度洗脱,收集含抗真菌活性物质馏分洗脱液,进行真空浓缩至干燥为抗真菌活性物质粗品。粗品通过制备型HPLC仪进一步分离纯化,用乙腈∶水∶TFA不同浓度进行梯度洗脱,按单组分保留时间收集不同馏分洗脱液,将洗脱液冻干成抗真菌活性单体组分样品。抗菌活性和单组分样品纯度检测分别用管碟法检测对黑曲霉的抑菌活性和分析型HPLC。结果表明,含抗真菌活性单位10 000 mg/L发酵液200 L经乙醇浸提液浓缩后得到含抗真菌活性单位22 500 mg/L的油状物80 L,浸提率为90%;80 L油状物经乙酸乙酯萃取浓缩得含抗真菌活性单位120 000 mg/L的12 L浸膏,萃提率为80%。500 g浸膏经硅胶柱层析,获得含抗真菌活性单位达750 mg/g的粗品48.0802 g。粗品经制备型HPLC仪获得纯度分别达到99.47%和90.28%的抗真菌单组分DZP-8和DZP-9。
- 魏赛金熊智强张智平涂晓嵘何建涂国全
- 关键词：链霉菌702分离纯化
