王向明
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 纤维素结合域的研究进展被引量：8
- 2008年
- 纤维资源是生物界最为丰富的有机碳源,有效酶解植物纤维资源对于减缓能源枯竭和食品危机具有重要意义。然而,天然纤维素结构上的复杂多样性为酶的攻击和可及带来巨大困难。为了克服这一问题,自然界中能够利用纤维原料的酶大多由相对独立的两种结构域、催化结构域(CD)、纤维素结合结构域(CBM)组成。其中,CBM有助于酶与不溶性底物的结合,在纤维原料酶解中具有重要作用。CBM所具备的特殊的底物特异性不仅对于提高酶与纤维的可及度,增强纤维素酶解效率,揭示纤维素酶解机制具有重要意义,而且应用在基因工程产品的分离纯化,酶制剂的品质改善及细胞固定化等领域也有很好的发展前景。本文就近年来CBM的研究现状及其发展前景进行了综述。
- 欧阳嘉李鑫王向明严明徐琳
- 关键词：纤维素结合域纤维素酶特异性
- 里氏木霉木聚糖酶XYN II基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量：8
- 2007年
- 采用RT—PCR方法克隆到里氏木霉RutC-30木聚糖酶（XYNⅡ）的cDNA序列。测序结果表明，XYNⅡ的cDNA基因开放阅读框长度为669bp，编码223个氨基酸，N端1～19个氨基酸为潜在的信号肽序列，删去潜在信号肽序列，将里氏木霉木聚糖酶的基因（xynⅡ）构建到巴斯德毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K上，线性化后电击转化到巴斯德毕赤酵母中，经G418筛选和PCR鉴定后的转化子用1％的甲醇进行诱导，对重组木聚糖酶活检测显示该基因能在毕赤酵母中表达有生物活性的XYNⅡ并分泌到胞外。发酵液中的酶活在诱导培养60h达到1．45IU／mL，最适酶解温度为50℃，最适pH值为6．0。
- 欧阳嘉王向明张清严明许琳
- 关键词：里氏木霉木聚糖酶毕赤酵母分泌表达
- 里氏木霉木聚糖酶基因xyn2的克隆与表达
- 采用RT-PCR技术，从里氏木霉QM9414 mRNA中扩增出木聚糖酶基因xyn2，并与质粒pYX212相连，构建了组成型表达载体pYX212-xyn20将此重组质粒转化入酿酒酵母菌株YPH499。在培养基中添加不同碳源...
- 王向明欧阳嘉严明许琳
- 关键词：RT-PCR技术酿酒酵母克隆表达木聚糖酶基因重组质粒
- 文献传递
- 里氏木霉木聚糖酶基因XYN2的克隆与表达被引量：5
- 2007年
- 采用RT-PCR(reverse-transcription PCR assay)技术,从里氏木霉QM9414 mRNA中扩增出木聚糖酶基因XYN2,并与质粒pYX212相连,构建了组成型表达载体pYX212/XYN2.将此重组质粒转化入酿酒酵母菌株YPH499进行表达.分析了不同碳源、温度、摇瓶转速、初始pH对其产酶的影响.实验结果表明,最佳碳源是葡萄糖,最佳转速是260 r/min,最佳初始pH是6.0.优化重组菌的发酵条件后得到的最大酶活为0.55 IU/mL.
- 王向明欧阳嘉严明许琳
- 关键词：RT-PCRTRICHODERMAREESEI酿酒酵母
