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王宏卫

作品数：13 被引量：48H指数：4
供职机构：第二军医大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 10篇医药卫生

主题

  • 7篇肝炎
  • 7篇肝炎病毒
  • 7篇病毒
  • 4篇庚型
  • 4篇庚型肝炎
  • 4篇庚型肝炎病毒
  • 4篇丙型
  • 4篇丙型肝炎
  • 4篇丙型肝炎病毒
  • 3篇疫苗
  • 3篇细胞
  • 3篇免疫应答
  • 3篇DNA疫苗
  • 2篇诱导免疫
  • 2篇诱导免疫应答
  • 2篇质粒
  • 2篇融合抗原
  • 2篇小鼠
  • 2篇免疫
  • 2篇抗原

机构

  • 10篇第二军医大学
  • 1篇复旦大学
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇南昌市第九医...
  • 1篇同济大学附属...
  • 1篇上海市徐汇区...
  • 1篇医学部

作者

  • 10篇王宏卫
  • 7篇戚中田
  • 6篇赵平
  • 3篇张珉
  • 3篇朱诗应
  • 2篇曹洁
  • 1篇李怀芳
  • 1篇郑颖
  • 1篇潘欣
  • 1篇谢南
  • 1篇王文平
  • 1篇赵奕文
  • 1篇卢洋
  • 1篇王建军
  • 1篇胡以平
  • 1篇刘彧
  • 1篇李建秀
  • 1篇廖小玲
  • 1篇胡卫江
  • 1篇高军

传媒

  • 2篇第二军医大学...
  • 2篇同济大学学报...
  • 1篇微生物学报
  • 1篇病毒学报
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇中国病毒学

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2004
  • 5篇2003
  • 2篇2002
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
庚型和丙型肝炎病毒的全长cDNA克隆在体内外的表达与复制(英文)被引量：1
2004年
目的 :研究 HGV和 HCV的复制和表达。 方法 :利用 HGV全长 c DNA克隆 (HGVqz)及 HCV1 a/ 1 b嵌合体 c DNA克隆分别构建表达质粒 p3.1 HGV和 p3.1 HCV并转染张氏肝细胞 ,以 HGVqz克隆建立 HGV转基因小鼠。分别应用 RT- PCR、免疫组化及 Western印迹分析病毒正、负链 RNA,蛋白表达和剪切。结果 :在转染 p3.1 HCV的张氏肝细胞及 HGV转基因小鼠某些组织中可检出相应病毒的负链 RNA,但在转染 p3.1 HGV的张氏肝细胞中未能检出 HGV负链 RNA。Western印迹在转染 p3.1 HCV的张氏肝细胞中检测到针对 HCV NS3蛋白、相对分子质量约 70 0 0 0的特异性条带 ,在 HGV转基因小鼠某些组织中检测到 2条特异性条带 ,相对分子质量约 4 2 0 0 0和 1 0 0 0 0 0 ,分别相当于 HGV E2蛋白及其剪切中间体。然而 ,在转染p3.1 HGV的张氏肝细胞中检测到针对 HGV E2蛋白的特异性条带 ,其相对分子质量约为 31 0 0 0 0 ,相当于 HGV整个前体蛋白。结论 :HGV的表达与复制在体内、外存在差异。细胞内某些特异性因子在病毒前体蛋白剪切中起重要作用 ,HGV和 HCV前体蛋白剪切所需宿主因子可能存在差异 。
王宏卫潘欣戚中田
关键词：庚型肝炎病毒全长CDNA克隆丙型肝炎病毒
鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析被引量：9
2003年
从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,Mg2 +浓度小于50mmol L时培养的重组菌经SDS PAGE和Westernblot检测能高水平表达HGVNS3蛋白。Mg2 +浓度升至 50mmol L时 ,NS3蛋白表达量明显降低。收集以 50mmol LMg2 +的培养基扩增的重组菌 ,灌胃接种C57小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子 ,为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。
王宏卫赵平张珉朱诗应戚中田
关键词：鼠伤寒沙门菌克隆活性镁离子庚型肝炎病毒表达质粒
超声联合SonoVue介导荧光蛋白质粒转染人胚肾293T细胞的研究被引量：2
2008年
目的探讨超声协同微泡造影剂SonoVue介导荧光蛋白质粒转染人胚肾293T细胞的方法。方法以不同的超声辐照时间、超声机械指数和不同浓度的微泡造影剂SonoVue的参数组合,将含有绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N1转染人胚肾293T细胞,接种于6孔板中,以荧光显微镜观察观察293T细胞中的绿色荧光蛋白表达情况并用流式细胞仪测算转染率。结果当微泡造影剂SonoVue浓度为40%、超声机械指数为1.0、辐照时间5 min时,质粒的转染率最高(28.11±1.63)%。结论超声联合微泡造影剂SonoVue能够作为载体介导质粒转染细胞,但需优化各项超声辐照的条件以达到最佳效果。
郑颖王文平赵平王宏卫赵奕文
关键词：超声微泡造影剂基因转染
口服型HCV融合抗原DNA疫苗在小鼠诱导免疫应答被引量：3
2003年
将编码一个外源信号肽、一个通用型辅助性T淋巴细胞抗原表位和HCV核心 包膜蛋白E2融合抗原基因的真核表达质粒pST CE2t(DNA疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7.将该重组菌口服接种BALB c小鼠 3次 .小鼠的抗HCV核心和E2抗体阳转率分别达 6 0 %和 70 % .体外以重组HCV核心或E2抗原刺激小鼠脾细胞 ,均使之发生明显的增殖反应 ,且小鼠脾细胞能有效杀伤表达HCV核心抗原的同系骨髓瘤细胞SP2 0 .这为研制高效免疫、成本低廉。
赵平张珉曹洁王宏卫戚中田
关键词：丙型肝炎病毒DNA疫苗融合抗原免疫应答
庚型肝炎病毒生物学特性及其与丙型肝炎病毒的比较研究
庚型肝炎病毒(hepatitis G virus,HGV)是新发现的经输血传播的单正链RNA病毒。HGV与黄病毒科的其它成员，尤其是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)，具有相似的基因组结构。HGV...
王宏卫
文献传递
携带HBV包膜大蛋白DNA疫苗的减毒沙门菌在小鼠诱导免疫应答被引量：10
2002年
探索一种简便、有效的乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫方法。将编码绿色荧光蛋白的真核表达质粒pEGFPN1转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,灌胃饲服BALB c小鼠 ,流式细胞术检测出小鼠脾细胞内表达的绿色荧光蛋白 ;构建编码HBV包膜大蛋白的DNA疫苗pCI S1S2S ,分别以SL72 0 7为载体的口服途径或直接肌肉注射途径免疫BALB c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应 ,结果表明两种免疫途径均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答 ,但口服途径诱导免疫应答的强度明显强于肌肉注射途径。口服携带HBVDNA疫苗的减毒伤寒沙门菌可能代表一种简便。
赵平王宏卫卢洋戚中田
关键词：DNA疫苗减毒沙门菌小鼠诱导免疫应答乙型肝炎病毒
庚型肝炎病毒全基因转基因小鼠的制备与遗传被引量：3
2002年
目的:利用显微注射方法产生整合庚型肝炎病毒(HGV)全基因的转基因小鼠,并研究HGV基因的遗传特性。方法:将含有HGV全长基因的载体线性化后,将目的基因DNA溶于显微注射用缓冲液,依常规方法进行显微注射,得到仔鼠后用PCR及基因组DNA Southern印迹法鉴定。阳性小鼠即为建立者(founder)小鼠,将founder小鼠与正常小鼠交配得到F代小鼠,随后将F1代阳性鼠与正常小鼠交配得到F2代小鼠。结果:共得到5只founder小鼠,其中4只与正常小鼠交配,得到F1代小鼠共41只,其中29只为阳性,阳性率为71％。F2代小鼠共21只,其中16只为阳性,阳性率为76％。结论:得到了整合有HGV全长基因的转基因小鼠,并证明HGV基因可以在转基因小鼠体内稳定传递。
胡卫江王宏卫戚中田李建秀胡以平
关键词：庚型肝炎病毒转基因小鼠遗传学动物模型
IL-12增强HBV融合抗原DNA疫苗在小鼠诱导的细胞免疫应答被引量：1
2003年
A plasmid(DNA vaccine)pSC-IL12,coexpressing hepatitis B virus(HBV)envelope-core fusion antigen and murine IL-12,was constructed.After the plasmid was transfected into COS7 cells,HBsAg and HBcAg were detected in cytoplasm,murine IL-12 was detected in supernatant.BALB/c mice were vaccinated intramuscularly with this construct or HBV envelope-core fusion antigen DNA vaccine pSC.Following twice immunizations,humoral and cellular immune responses of the mice were detected.Results showed that pSC-IL12 induced weaker antibody but stronger T lymphocyte proliferative response and cytotoxic T lymphocyte response than pSC did,which indicated that HBV fusion antigen and IL-12 coexpressing DNA vaccine may be more useful for therapy of hepatitis B.
赵平高军王宏卫曹洁戚中田
关键词：融合抗原白细胞介素12DNA疫苗细胞免疫应答
HCV 1a/1b型嵌合体能在HepG2细胞内复制与表达被引量：2
2003年
采用HCV 1a/1b嵌合体cDNA构建表达质粒转染HepG2细胞,以免疫组化和Western blotting检测HCV蛋白表达,RT-PCR检测HCV正、负链RNA,研究丙型肝炎病毒(HCV)1a和1b型嵌合体全长cDNA在HepG2细胞中的复制和表达。结果证明,转染细胞中检测到分子量约70kDa的HCVNS3蛋白,转染细胞连续传20代,仍能检测到HCV正、负链RNA。表明该HCV嵌合体可以在细胞中复制和表达,HCV 1b型的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)可以起始含1a型非编码区的病毒复制。HCV 5′端非翻译区第11、12、13、34和35位核苷酸改变可不影响其与核糖体结合。3′非翻译区9400,9403和9407位核苷酸改变,9435位缺失“A”,9409,9410位及9495,9496,9497位分别插入“TT”和“AAT”可不影响RORp的生物活性。本研究对阐明HCV复制和翻译机制有重要意义。
王宏卫赵平谢南张珉朱诗应戚中田
关键词：丙型肝炎病毒HEPG2细胞RNA聚合酶
siRNA抑制survivin的表达诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的研究被引量：4
2007年
目的筛选能有效抑制survivin基因表达的小干扰RNA(siRNA),探讨survivin基因抑制对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响。方法设计3段survivin siRNA靶位点,用PCR扩增siRNA表达框,与survivin-绿色荧光蛋白融合基因表达质粒共转染293T细胞,再构建有效siRNA的表达载体,转染卵巢癌SKOV-3细胞,分析sur-vivin基因的表达及细胞凋亡情况。结果筛选出了1段能高效抑制survivin表达的siRNA,能显著下调SKOV-3细胞内的survivin表达,并导致SKOV-3细胞凋亡。结论利用RNA干扰能有效抑制survivin基因表达并诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡,为进一步的靶向survivin分子的体内抗肿瘤研究奠定了基础。
王建军刘彧王宏卫廖小玲朱诗应李怀芳
关键词：SURVIVINRNA干扰细胞凋亡
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