王晚璞
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金云南省科技创新强省计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 表达神经营养因子Neurturin的骨髓间充质干细胞的构建及体外活性检测被引量：1
- 2012年
- 研究神经营养因子Neurturin(NTN)在由于神经元损伤而造成的神经退行性疾病中对神经元的保护和修复作用。利用重组腺病毒载体将NTN基因转入恒河猴骨髓间充质干细胞(rMSC),通过RT-PCR、IF及Western blot方法检测NTN的转录和表达,并采用鸡胚背根神经节体外培养实验和胚胎大鼠中脑多巴胺能神经元存活实验对NTN进行体外活性检测。结果表明NTN在rMSC中稳定表达和分泌,并具有体外生物学活性,为由于神经元损伤造成的神经退行性疾病的干细胞移植治疗奠定了一定的基础。
- 王晚璞孙茂盛李鸿钧谢天宏严敏周艳尹娜
- 关键词：重组腺病毒神经营养因子NEURTURIN活性检测
- 神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及其生物学活性研究
- 2009年
- 目的探讨Neurturin(NTN)基因转染Vero细胞后的表达情况,为恒河猴帕金森病(PD)基因治疗打下基础。方法将表达载体pcDNA3-hNTN转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对表达的人NTN蛋白进行了体外生物学活性测定。结果pcDNA3-hNTN质粒转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆且有目的蛋白hNTN表达,表达的hNTN在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的胚胎中脑多巴胺能神经元的存活。结论获得了能稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,其表达的hNTN对体外培养的中脑多巴胺能神经元具有保护作用,为移植并进行PD猴基因治疗动物实验打下了基础。
- 谢天宏马开利尹娜施锐王晚璞王文举严敏孙茂盛李鸿钧
- 关键词：NEURTURINVERO细胞生物学活性帕金森氏病
- 嵌合Neurturin在恒河猴脂肪间充质干细胞中的表达及定向诱导作用被引量：1
- 2012年
- 该研究通过重组腺病毒传递嵌合型Nerve growth factor(NGF)/Neurturin(NTN)至恒河猴脂肪间充质干细胞(rhesus adipose mesenchymal stem cells,rASCs)中,评价嵌合型NGF/NTN在诱导该细胞为神经元细胞中的作用,为进一步探讨ASC-NTN体内修复帕金森氏病猴模型潜能提供实验基础。用带有NGF/NTN嵌合基因的重组腺病毒感染rASCs,通过RT-PCR、免疫荧光及ELISA检测重组NTN在rASCs的表达及产物定位,在外源化学诱导剂协同作用下对rASCs进行诱导。rAd-NGF/NTN感染rASCs后检测到NGF/NTN转录产物,表达产物可分泌到细胞外,分泌出的NTN蛋白在体外能够促进鸡胚背根神经节长出神经突起,维持胎鼠中脑神经元的存活。rASCs在内外源性诱导因素诱导下可向神经元样细胞分化。利用rAd-NGF/NTN可将NGF-NTN传递至rASCs中并表达,rASCs能够被定向诱导为具有分泌NTN作用的神经元样细胞。这些研究结果为将来rASCs-NTN移植进入帕金森氏病猴模型进行帕金森氏病治疗提供了重要依据。
- 周艳孙茂盛李鸿钧王晚璞谢天宏
- 关键词：NEURTURIN脂肪间充质干细胞重组腺病毒体外活性帕金森氏病
