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FAK反义寡聚脱氧核苷酸对FN诱导Hela细胞MMP-2表达的影响被引量：4: 2004年; 目的:利用反义核酸技术探讨纤黏连蛋白(fibronectin, FN)诱导Hela细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)基因表达的机制。方法:无血清培养Hela细胞,以不同浓度及作用时间的FN诱导Hela细胞中MMPs基因表达, 并用反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)封闭焦点黏着激酶(focal adhesion kinase,FAK), 用酶谱分析方法检测MMPs的活性。结果:FN浓度为0 μg/mL时,Hela细胞无MMP蛳2基因表达;FN浓度为5 μg/mL^10 μg/mL、作用时间为12 h,MMP蛳2活性最大;当在培养液反义ODN后,MMP蛳2活性明显降低。结论:MMP蛳2基因表达与FN的浓度以及作用时间有关;FN可通过其整合素受体的信号转导通路启动Hela细胞中MMP蛳2基因表达、降解ECM,从而促进肿瘤的浸润和转移。; 班莺于晓光赵丹丹林平徐华锋邹海峰刘洋; 关键词：寡聚脱氧核苷酸

FN诱导Hela细胞MMP-2表达机制的研究: 目的研究纤粘连蛋白(fibronectin,FN)对Hela细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)表达的影响及机理.方法无血清培养Hela细胞,以FN作为细胞外基...; 班莺; 关键词：寡聚脱氧核苷酸纤粘连蛋白基质金属蛋白酶; 文献传递

重组人α降钙素基因相关肽的克隆与表达(英文): 2004年; 通过PCR方法从人类基因组中扩增出编码hαCGRP的片段,将该片段定向克隆到pET-32a(+)载体上,构建pET-hαCGRP重组质粒。转化E.coli JM109菌株,利用酶切和测序方法筛选后,经IPTC诱导再转化E.coli BL21trxB(DE3)pLYsS菌株。SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物,最后通过扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验来检测重组hαCGRP扩张血管的活性。结果表明,重组质粒含hαCGRP成熟肽编码基因序列(111bp),符合预想结果;表达出21 kD的融合蛋白,且主要以可溶性形式存在,其粗提物具有扩张血管能力。重组hαCGRP的成功表达为下一步纯化及研制基因工程药物奠定了重要基础。; 赵丹丹于晓光班莺徐华锋林平邹海峰刘宇; 关键词：PCR 人类基因组融合蛋白克隆基因工程

重组人α降钙素基因相关肽在大肠杆菌中表达条件的优化(英文): 2003年; 为提高人α降钙素基因相关肽(hαCGRP)在大肠杆菌中的表达量,研究了本室构建的pET hαCGRP重组质粒在E.coliBL21trxB(DE3)pLysS宿主菌中的表达条件.经SDS PAGE分析和YLN2000凝胶影像分析结果表明,重组菌以LB为培养基,氨苄青霉素浓度为50mg/L,开始诱导时的菌体密度为OD600=0.6～0.8,所加IPTG的浓度为0.75mmol/L,37℃摇床180±5r/min振荡诱导培养4h时,可获得高效表达的hαCGRP融合蛋白.重组蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的70%～80%;它主要以可溶性形式存在,为下一步纯化工作提供了方便.; 赵丹丹于晓光班莺邹海峰林平徐华锋; 关键词：大肠杆菌 SDS-PAGE分析

纤粘连蛋白诱导Hela细胞黏附及MMP-2基因表达被引量：3: 2004年; 目的　观察纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)诱导的Hela细胞的黏附及基质金属蛋白酶 (matrixmetalloprotein ases,MMPs)基因的表达 ,探讨恶性肿瘤细胞侵袭、转移发生的机制。方法　无血清培养Hela细胞 ,以FN作为细胞外基质 (extracellularmatrix ,ECM)成分 ,用MTT法检测Hela细胞的黏附率及光镜下计数Hela细胞的铺展率并观察Hela细胞形态的变化 ;用明胶酶谱法检测MMPs的活性。结果　无FN作用的Hela细胞不发生黏附及铺展 ,亦无明显MMPs基因表达 ;当纤粘连蛋白浓度为 5～ 1 0 μg ml时 ,黏附率及铺展率最大 ;黏附的Hela细胞启动MMP 2基因的表达 ,纤粘连蛋白浓度为 5～ 1 0 μg ml时 ,MMP 2活性最大。结论　FN可诱导Hela细胞黏附 ,进而引发一系列细胞内信号转导机制 ,启动MMP 2基因表达。; 班莺于晓光赵丹丹林平徐华锋邹海峰; 关键词：纤粘连蛋白 HELA细胞细胞黏附 MMP-2基因基因表达

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班莺