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BALB/c小鼠巨细胞病毒性心肌炎模型的特征被引量：7: 2008年; 目的:探讨BALB/c小鼠巨细胞病毒(MCMV)性心肌炎模型的特征。方法:60只4周龄BALB/c小鼠随机分成2组:实验组(36只,MCMV腹腔注射)和对照组(24只,3T3细胞裂解液腹腔注射)。在注射后3、7、14、21、28、35、42、49、56、63和70 d,记录心电图,测血清抗心肌β1受体抗体,分批处死小鼠行心肌病理、免疫组化和MCMV DNA检测。结果:实验组心肌炎累积发病25只(25/36,69.4%),死亡4只(4/36,11.1%);心肌炎急性期心肌呈现弥漫性炎性细胞浸润和灶性心肌细胞变性坏死,慢性期心肌间质散在炎性细胞浸润,急慢性期心肌炎病理积分均在2分或以下;免疫组化示急性期心肌IL-1β和TNF-α蛋白强阳性表达。实验组心律失常累计发生率达50.0%,可出现各种心律失常,急性期以窦性、房性心律失常和传导阻滞为主,慢性期以室性和房性心律失常为主。实验组3-7 d时心肌组织可检测到MCMV DNA片段,14-70 d时则不能检测到。实验组前5周血清抗β1受体抗体滴度为0,第6-10周明显升高;对照组前7周该抗体滴度为0,第8-10周轻微升高。结论:MCMV心肌炎并不严重,心肌细胞变性坏死具有局灶性和散在性特点,可出现各种心律失常;心肌炎早期病变和心律失常的发生可能与病毒感染直接损伤有关,慢性期病变和心律失常的发生则可能与抗β1受体抗体的作用有关。; 陈志坚廖玉华唐省三高翔刘坤田苗王敏董继华; 关键词：巨细胞病毒小鼠 BALB/C 心肌炎

病毒感染大鼠心室肌细胞钙通道基因表达及功能改变的研究被引量：2: 2005年; 目的研究大鼠心室肌细胞感染柯萨奇病毒B3(CVB3)后L型钙通道mRNA表达量及其电生理特性的变化。方法用CVB3感染培养的SD大鼠心室肌细胞,采用半定量逆转录-聚合酶链式反应技术,检测病毒感染心室肌细胞L型钙通道各亚单位mRNA表达量的变化;用全细胞膜片钳技术,观察病毒感染前后心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的变化。结果病毒感染组心室肌细胞L型钙通道α1和β亚单位mRNA的表达量显著高于正常对照组(400±007vs221±041,P<001;206±006vs122±030,P<005),而α2/δ亚单位mRNA表达量的改变不明显(412±019vs413±027,P>005);感染组细胞ICa-L的平均电流密度明显大于正常组细胞[(-866±099)pA/pFvs(-697±175)pA/pF,P<001],且前者的电流-电压曲线下移,峰电流密度增加2574%(P<005)。结论CVB3感染心室肌细胞后,使其L型钙通道α1和β亚单位mRNA的表达量增加,ICa-L增大,可能是病毒感染导致心肌出现异常电生理活动的细胞和分子机制之一。; 田苗黄淑君廖玉华董继华王敏郭和平唐明; 关键词：柯萨奇病毒感染钙通道逆转录聚合酶链反应膜片钳术基因表达

抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道亚单位抗体的制备与验证被引量：2: 2005年; 目的:用人工合成的大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的抗原表位短肽免疫家兔,产生可识别该通道不同亚单位的特异性抗体,并进行验证.方法:从大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的氨基酸序列中筛选出三段短肽,进行人工合成.用化学合成的多肽与破伤风类毒素(TT)以戊二醛法连接,并以此作为抗原免疫家兔制备抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道的免疫血清,经分离纯化获得抗体.抗体的验证通过ELISA,Western blot,免疫荧光组织化学技术进行检测.结果:所制备的抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道α1c、β2和α2/δ亚单位的抗体滴度分别为1:51 200～1:102 400、1:1 280和1:1 280,3个抗体结合到大鼠心肌细胞膜蛋白的分子量分别为235、89和162 kD.免疫荧光组织化学实验显示,抗体均能特异性的结合在培养大鼠心室肌细胞膜上.结论:所制备的抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道亚单位抗体能特异性识别大鼠心室肌细胞膜上L-型钙通道的不同亚单位.; 涂丹娜廖玉华田苗王敏; 关键词：心室肌细胞 L-型钙通道抗体

BALB/c小鼠巨细胞病毒性心肌炎的特征: 目的探讨BALB/c小鼠巨细胞病毒(MCMV)性心肌炎模型的特征。方法60只4周龄BALB/c小鼠随机分成2组:实验组(36只,MCMV腹腔注射)和对照组(24只,3T3细胞裂解液腹腔注射)。在注射后3、7、14、21、...; 陈志坚廖玉华唐省三高翔刘坤田苗王敏董继华; 文献传递

人Kv1．5通道基因转染人胚胎肾细胞的研究: 2007年; 目的建立表达人Kv1.5通道的细胞模型。方法采用Lipofactamine 2000脂质体将人Kv1.5通道基因转染人胚胎肾细胞(HEK293),通过荧光显微镜和全细胞膜片钳技术观测人Kv1.5通道基因的表达。结果pcDNAHKv1.5真核表达载体转染HEK293细胞2d后,荧光显微镜可观察到人Kv1.5通道表达;3d后全细胞膜片钳技术记录到人Kv1.5通道基因编码的通道电流。结论pcDNAHKv1.5真核表达载体转染HEK293细胞为人Kv1.5通道的研究提供了良好的真核细胞表达系统和细胞模型。; 刘坤高翔田苗刘金平张昌伟水志刚陈志坚廖玉华; 关键词：转染

人Kv1.3通道基因转染人胚胎肾细胞的研究: 2007年; 目的:建立表达人Kv1.3通道的细胞模型,为临床研究提供帮助。方法:Lipofactamine2000脂质体将人Kv1.3通道基因转染人胚胎肾细胞(HEK293),通过荧光显微镜和全细胞膜片钳技术观测人Kv1.3通道基因的表达。结果:pcDNAHKv1.3真核表达载体转染HEK293细胞2 d后,荧光显微镜可观察到人Kv1.3通道表达;3 d后全细胞膜片钳技术记录到人Kv1.3通道基因编码的通道电流。结论:pcDNAHKv1.3真核表达载体转染HEK293细胞为人Kv1.3通道的研究提供良好的真核细胞表达系统和细胞模型,有利于指导治疗自身免疫性疾病新药的开发。; 刘坤高翔蔡华华田苗陈志坚廖玉华; 关键词：转染

柯萨奇病毒B3感染培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道mRNA表达的变化被引量：1: 2003年; 目的:观察柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道mRNA表达的影响。方法:用柯萨奇病毒B3感染原代培养新生大鼠心室肌细胞,合成大鼠心室肌细胞L-型钙通道各亚单位引物,通过逆转录-聚合酶链反应技术,以β-actin为内参照,测量钙通道各亚单位mRNA表达量在病毒感染前后的变化。结果:病毒感染组心室肌细胞L-型钙通道α_1(4.00±0.07 vs 2.21±0.41,p<0.01),β(2.06±0.06 vs 1.22±0.30,p<0.05)亚单位mRNA表达量较正常对照组显著增加,而α2/δ(4.12±0.19 vs 4.13±0.27,P>0.05)亚单位mRNA表达量变化无统计学意义。结论:柯萨奇病毒B3感染心室肌细胞钙通道mRNA表达量增加,可能是病毒介导心室肌细胞L-型钙电流变化的分子基础。; 黄淑君田苗廖玉华; 关键词：柯萨奇病毒B3 心室肌细胞 L-型钙通道

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田苗

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