石煊雯
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 诺加霉素发酵条件优化及其生物合成基因snogE、snogZ失活突变株的构建
- 诺加霉素（nogalamycin）是于1965年被发现由黑胡桃链霉菌Streptomycesnogalater发酵产生的重要的蒽环类抗生素之一。对多种肿瘤细胞具有强抑制活性，且有抗革兰氏阳性菌作用。目前国内尚无诺加霉素发...
- 石煊雯
- 关键词：发酵优化糖基转移酶基因中断同源重组
- 文献传递
- 产诺加霉素链霉菌中失活snogA基因的研究
- 2014年
- 诺加霉素是重要的蒽环类抗肿瘤抗生素,由黑胡桃链霉菌ATCC27451发酵产生。本研究从诺加霉素产生茵中克隆得到560 bp的氨基甲基化酶(snogA)编码基因片段,并将其插入基因整合型质粒pKC1139的多克隆位点,构建得到基因中断质粒pLMX-3-58。通过接合转移和同源重组,构建得到氨基甲基化酶编码基因被中断的重组菌株mLMX-3-59。基因重组突变株基因型验证结果表明,中断质粒以正确方式整合入基因组,将氨基甲基化酶编码基因中断。发酵验证结果表明,重组菌株发酵产物中不含有诺加霉素。本研究表明sngA基因在诺加霉素生物合成途径中是必需的。这为进一步阐明诺加霉素生物合成途径和组合生物合成改造诺加霉素提供了参考。
- 李梦茜刘伟石煊雯李继安陈代杰邵雷
- 关键词：同源重组基因失活
- 糖基转移酶编码基因snogE中断对诺加霉素生物合成的影响被引量：1
- 2013年
- 为了考察基因snogE中断对诺加霉素生物合成的影响,比对多种糖基转移酶的氨基酸序列,并克隆与已知蒽环类抗生素糖基转移酶序列同源性最高的snogE编码基因片段,构建基因中断质粒pSXW-2-62。利用接合转移的方法将其转入产诺加霉素的胡桃链霉菌中并发生同源重组,得到重组菌株mSXW-2-71,验证突变株基因型与发酵产物。结果表明,基因中断质粒以正确方式整合入基因组,中断了snogE基因;在突变株发酵产物中无法检测到诺加霉素产生。snogE基因编码的糖基转移酶在诺加霉素的生物合成途径中是必需的。
- 石煊雯李梦茜李航李继安陈代杰邵雷
- 关键词：糖基转移酶基因中断同源重组
- 糖基转移酶NogD基因敲除对诺加霉素合成的影响
- 本文构建了同框敲除质粒plw-dNogD,利用接合转移的方法将其转入黑胡桃链霉菌Streptomycesnogalater ATCC27451.通过同源重组双交换的方法敲除了糖基转移酶基因NogD内部223个氨基酸,松弛...
- 刘伟石煊雯李继安陈代杰邵雷
- 关键词：制药工程基因敲除同源重组糖基转移酶
- 文献传递
- 产诺加霉素链霉菌摇瓶发酵条件的研究被引量：2
- 2013年
- 诺加霉素是由黑胡桃链霉菌Streptomyces nogalater产生的结构复杂的蒽环类抗生素,具有较强的抗肿瘤活性。该文对实验室保藏的Streptomyces nogalater ATCC 27451进行菌种选育,得到了一株发酵效价高,遗传稳定的高产菌株。通过摇瓶培养,从发酵培养基和培养条件两方面进行发酵工艺的优化。培养基方面,从单一碳源,单一氮源的最佳种类和组合的筛选,到前体氨基酸以及油的添加进行尝试;培养条件方面,考察了温度,pH,装量,放瓶时间等因素,最终获得的最佳培养基和培养条件,与出发初始菌株和初始培养条件相比,从最初的发酵产量0.048 g/L提高到了0.312 g/L,最终发酵单位提高了6.5倍。这些工作为我们以后大规模的发酵诺加霉素奠定了基础。
- 刘伟石煊雯李梦茜李继安陈代杰邵雷
- 关键词：蒽环类抗生素抗肿瘤抗生素菌种选育培养基优化摇瓶发酵
