莫桂玲
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 供职机构:暨南大学药学院更多>>
- 发文基金:国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- sRAGE胞外段—IgG Fc融合蛋白对大鼠糖尿病肾病的作用被引量:4
- 2010年
- 目的探讨可溶性人晚期糖基化终末产物受体胞外段—IgG Fc(sRAGE-IgG Fc)融合蛋白对糖尿病(DM)大鼠的肾脏保护作用。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病(DN)组、洛汀新组、sRAGE-IgGFc 4 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 6 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 9 mg/kg组各10只。以左肾切除、高糖、高脂饲养及注射链脲佐菌素方法 ,建立DN模型。检测各组非空腹血糖(FPG)、胰岛素(INS)、血脂、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAER)等,观察其肾组织变化。结果与DN组比较,sRAGE-IgG Fc用药组、洛汀新组的Scr、BUN、Ccr、UAER等指标均明显降低,肾脏病变不同程度地减轻(P均<0.01);除正常对照组外,其他组间FPG、INS、血脂改变无统计学意义(P均>0.05)。说明sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏保护作用具有剂量依赖性。结论 sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏有明显保护作用,其功能与洛丁新相当。
- 张璟莫桂玲苏志坚许华郑青
- 关键词:融合蛋白
- hsRAGE-IgG Fc融合蛋白的表达及其生物学活性
- 2010年
- 将编码人可溶性晚期糖基化终产物受体-免疫球蛋白G Fc段(hsRAGE-IgG Fc)融合蛋白的DNA片段克隆到大肠杆菌表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并表达。SDS-PAGE分析表明其表达形式为包涵体,相对分子质量约为66kDa,表达量占菌体总蛋白的38.4%。经复性后,获得纯度为96.6%的融合蛋白,得率约为29.5mg/L。经Western印迹法鉴定,该融合蛋白可与sRAGE抗体产生阳性反应。同时,hsRAGE-IgG Fc融合蛋白可以显著抑制晚期糖基化终产物(AGE)引起的ECV-304细胞NF-κB p65表达的上调,其活性与hsRAGE相似。
- 张璟莫桂玲张庆友苏志坚许华黄亚东郑青
- 关键词:免疫球蛋白GFC段融合蛋白
- 人可溶性晚期糖基化终产物受体的酵母表达及其生物活性分析
- 2011年
- 将人可溶性晚期糖基化终产物受体(human soluble Receptor for advanced glycation end product,hsRAGE)cDNA插入巴斯德毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA,构建重组表达载体pGAPZαA-hsRAGE,并转化到毕赤酵母X-33中,利用含抗生素Zeocin的YPD平板筛选重组子。重组菌株在甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAP)启动子的调控作用下,进行组成型分泌表达,在发酵液中获得了相对分子质量约45 kD的重组蛋白。摇瓶发酵结果表明,在发酵温度30℃、pH6.0、发酵时间72 h时重组蛋白表达占发酵上清液总蛋白68.4%。Western blotting显示,重组蛋白能够被相应抗体所识别。纯化后的重组hsRAGE具有与AGEs相互结合的活性,并能够显著地抑制AGEs诱导的人血管内皮细胞系ECV-304细胞NF-κB信号通路中NF-κB/p65基因的表达。
- 张波张璟张庆友莫桂玲苏志坚杨鹏辉徐单单郑青
- 关键词:毕赤酵母组成型表达纯化信号通路