袁哲
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅自然科学基金国家自然科学基金辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺癌条件培养液对人脐血来源的间充质干细胞增殖及其磷酸化p38MAPK表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨肺癌A549细胞条件培养液对人脐血间充质干细胞(umbilical cord blood-mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)增殖特性以及磷酸化p38有丝分裂原激活蛋白激酶(phospho-p38 mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK)表达的影响。方法:建立人脐带血来源的原代UCB-MSCs培养体系,将UCB-MSCs分成对照组(用UCB-MSCs培养液培养)、低浓度条件培养液组(用50%A549细胞条件培养液和50%UCB-MSCs培养液培养)和高浓度条件培养液组(用100%A549细胞条件培养液培养),MTT法和细胞划痕愈合实验检测各组细胞的增殖和迁移情况,FCM法检测各组细胞的细胞周期改变,蛋白质印迹法检测各组细胞p-p38MAPK蛋白的表达情况。结果:成功分离和培养了UCB-MSCs。与对照组细胞比较,低浓度条件培养液组和高浓度条件培养液组细胞的增殖和迁移能力明显增强(P<0.05);高浓度条件培养液组G0/G1期细胞所占比例低于对照组,而G2/M期细胞所占比例高于对照组(P均<0.05),低浓度条件培养液组和高浓度条件培养液组S期细胞所占比例高于对照组(P<0.05);低浓度条件培养液组和高浓度条件培养液组UCB-MSCs p-p38MAPK蛋白的表达水平明显上调(P<0.05)。结论:肺癌A549细胞条件培养液能促进人UCB-MSCs的增殖和迁移,且能上调其p-p38MAPK蛋白的表达水平。
- 袁哲王哲王秋实
- 关键词：脐血细胞增殖P38丝裂原活化蛋白激酶类
- UC-MSC经PI3K/AKT信号通路影响人肺腺癌A549细胞的凋亡和增殖被引量：7
- 2019年
- 目的:探讨人脐带来源间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cell, UC-MSC)经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制。方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养,用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型。收集UC-MSC培养上清,建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株的体外间接共培养体系。采用CCK-8法检测A549细胞增殖率,通过Annexin V/PI染色流式细胞术检测A549细胞的凋亡率,通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布;qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平;Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平。结果:人脐带组织分离培养3周后,可见纤维状细胞铺满培养瓶,平行排列或呈旋涡状生长。流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105,不表达CD45和HLA-DR。UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株在体外间接共培养后,与对照组比较,A549细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高,其细胞周期明显停滞在G1期(均P<0.01)。PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1和Bcl-2转录下调、BAX的转录上调(均P<0.01);UCMSC条件培养基培养的A549细胞总AKT水平不变,p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降(P<0.01)。结论:UC-MSC明显影响肺腺癌A549细胞的增殖和凋亡能力,细胞周期停滞在G1期,其主要作用机制是UC-MSC抑制A549细胞PI3K/AKT信号通路,为探索UC-MSC临床应用的安全性和有效性提供实验依据。
- 袁哲吴思梦王亚君王思亮朱喜科
- 关键词：肺腺癌A549细胞PI3K/AKT信号通路
- 1727例公共库脐带血的质量分析报告——附23份库存脐血库解冻质控结果
- 2012年
- 目的评估库存脐带血的质量,同时对比评估脐血库用于质控的血样是否能够正确的反应实际血袋内标本的干细胞的活性和数量。方法通过分析2009～2010年入存的1727份合格入库超过1年的脐带血入库前检测的指标的相关性分析,判断入库细胞总数的影响因素,以及与CD34+总数,CFU-C的相关性。对冷冻超过24个月的23份脐带血进行解冻评估,分析对比解冻前后血袋内、冻存管和附管的细胞数,有核细胞总数、CD34+、CFU-GM、以及活细胞变化。
- 王秋实吴思梦袁哲马良艳王哲段小晶张晋王殿昌
- 关键词：脐血库脐带血质控结果有核细胞
- 1727例公共库脐带血的质量分析报告--附23份库存脐血库解冻质控结果
- 本研究是为了评估库存脐带血的质量,同时评估脐血库用于质控的血样是否能够正确的反应实际血袋内标本的干细胞的活性和数量.分析2009 年-2010 年期间按照Rubinsten 的建立的标准分离入存的1727 份合格脐带血,...
- 王秋实张成普吴思梦袁哲马良艳王哲段小晶张晋王殿昌刘学勇
- 影响脐带血采集质量的相关性因素分析被引量：1
- 2018年
- 目的回顾性分析影响脐带血采集质量的母婴因素和采集处理因素。方法记录389份脐带血的采集量、母亲年龄、孕龄、新生儿体重、分娩方式、新生儿性别、胎次及脐带血采集至计数间隔以及采集方式。用KX-21型全自动血液分析仪进行细胞计数并计算有核细胞总数(TNC)。采用Pearson相关和Spearman秩相关进行相关性分析,采用t检验、Mann-Whitney U检验、方差分析及Kruskal-Wallis H检验进行分组比较,分析影响脐带血采集量和TNC的相关因素。结果脐带血采集量与TNC显著相关(r=0.723,P <0.001),脐带血采集量大于80 ml时的TNC显著高于低体积者。在母婴因素中,母亲年龄与采集量及TNC差异均无统计学意义;孕龄与采集量负相关(r=-0.119,P=0.019),而与TNC正相关(r=0.138,P=0.007),足月儿脐带血的TNC显著高于早产儿(P=0.038);婴儿出生体重与采集量及TNC均正相关(r=0.236,P <0.001;r=0.275,P <0.001),体重较大婴儿脐带血的采集量和TNC均显著高于体重较小者(P <0.001);剖宫产的脐带血采集量虽高于阴道分娩(P <0.001),但其TNC不及阴道分娩;男婴与女婴在脐带血采集量和TNC之间无显著差异。在采集处理因素中,脐带血采集至计数的时间间隔与采集量及TNC均无显著相关。结论为提高脐带血的保存质量,应侧重选择胎儿体重较大、经阴道分娩的产妇作为脐带血供者,实验室应首先处理采集量较大的脐带血。
- 张晋袁哲
- 关键词：脐带血有核细胞影响因素
- 1727例公共库脐带血的质量分析报告——附23份库存脐血库解冻质控结果
- 王秋实吴思梦袁哲马良艳王哲段小晶张晋王殿昌
- 1727份公共库脐带血的质量分析——附23份库存脐带血干细胞解冻质控分析被引量：3
- 2014年
- 目的评估公共库存脐带血造血干细胞的质量及脐血库用于质控的血样是否能够正确反应实际血袋内的脐带血造血干细胞的活性和数量。方法分析2009年1月-2010年12月按照Rubinsten标准分离入库保存的1 727例合格脐带血造血干细胞,通过流式细胞术和集落培养法计算造血干细胞数量,血细胞计数仪计数细胞数量、应用气相液氮系统深低温冷冻造血干细胞。分析入库细胞总数(TNC)的影响因素,以及与CD34+总数、集落形成单位(CFU-C)总数的相关性;对冷冻时间>24个月的23份脐带血造血干细胞解冻后,分析解冻前后血袋、冷冻麦管内和冻存管内的细胞数、CFU-C产率、CD34+百分比、活细胞比率,并推算血袋内TNC、CD34+细胞数、CFU-C总数。结果1 727份脐带血平均血量为(96.62±20.41)m L,入库TNC、CD34+总数、CFU-C总数分别为(9.88±2.54)×108个、(2.76±1.85)×106个、(11.05±7.72)×105个,CD34+总数和CFU-C总数与TNC相系数均为0.49,CD34+百分比与CFC产率相关系数为0.80。23份解冻脐带血冷冻前后血袋、冷冻管和冷冻麦管内WBC(×109/L)分别为28.03±8.01、22.55±6.56、20.43±5.23,TNC(×108)为10.74±3.33、58±2.90、7.78±2.28、7.97±2.73、台盼兰拒染率(%)99.0±0、83.04±6.21、78.9±6.56、80.43±6.01(P<0.01);冷冻前和解冻后血袋、冷冻管,冷冻麦管的CFU-C产率(/105)分别为159.9±45.8、149.2±37.4、91.6±35.8、155.0±41.2,冷冻管内CFU-C产率明显下降(P<0.05);冷冻前和解冻后血袋、冷冻管,冷冻麦管的CFU-C总数(×105)分别为159.9±45.8、149.2±37.4、91.6±35.8、155.0±41.2,解冻后冷冻管内CFU-C总数下降明显(P<0.05);血袋、冷冻管和麦管内的小细胞数量(×108)分别为3.92±1.40、3.95±1.77、3.86±1.46、4.05±1.52,CD34+总数(×106)为3.23±1.84、3.02±1.88、3.12±1.85、3.62±3.07。结论公共库入库的1 727份脐带血符合国际通用标准;解冻后检测分析发现,脐带血冷冻后丢失的细胞以成熟的粒细�
- 王秋实马良艳张晋佟海侠王殿昌段小晶吴思梦袁哲王哲刘学勇
- 关键词：人脐带血细胞总数
- 糖基化终末产物对真皮成纤维细胞细胞核因子κB活化的影响普罗布考的保护作用
- 2014年
- 目的研究糖基化终末产物(AGEs)对真皮成纤维细胞(Fb)细胞核因子κB(NF-κB)活化的影响及普罗布考的保护作用。方法体外分离培养Fb,分为对照(Con)组、AGE-BSA组及普罗布考干预(Probucol)组。水溶性四唑盐(WST)法检测细胞增殖,免疫荧光染色检测NF-κB的活化、实时定量PCR检测MCP-1mRNA表达。结果与Con组相比,AGE-BSA组细胞增殖能力减退,NF-κB表达增加,细胞MCP-1mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01);与AGE-BSA组相比,Probucol组细胞增殖能力增强,NF-κB表达下降,细胞MCP-1mRNA表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论普罗布考对AGE-BSA诱导的Fb的保护作用可能是通过促进Fb增殖,抑制NF-κB活化及减低MCP-1表达来实现的。
- 王哲袁哲王秋实
- 关键词：成纤维细胞核因子ΚB
