袁媛
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 供职机构：河南农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：3
- 2013年
- 根据已报道的瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法从感病甜瓜中扩增得到长度为753 bp的CP基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-3上,获得重组载体pGexCP,在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了CCYV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,当CP蛋白浓度为2.5μg/mL时,血清效价高达5.12×105。Western blot分析表明制备的抗体检测CCYV侵染的甜瓜叶片得到特异性的条带,表明该抗体的特异性较好。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甜瓜病样的检测。本试验为CCYV的快速检测提供了重要的研究材料。
- 施艳袁媛孙虎古勤生刘珊珊王振跃
- 关键词：外壳蛋白基因原核表达抗血清
- 引起玉米粗缩病的水稻黑条矮缩病毒河南分离物的分子特征被引量：3
- 2015年
- 目前已报道的造成玉米粗缩病的病原有3种，分别是玉米粗缩病毒 （ Maize rough dwarf virus, MRDV），水稻黑条矮缩病毒（ Rice black-streaked dwarf virus, RBSDV ） 和南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus, SRBS- DV）。我国于1954年在新疆和甘肃发现该病，
- 刘瑞丽袁媛王振跃王英志袁虹霞张晓婷施艳李洪连
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒玉米粗缩病毒分子特征分离物ROUGH
- 甜瓜病叶CCYV积累量与叶片症状表现的相关性研究被引量：3
- 2012年
- 采集瓜类褪绿黄化病毒侵染的甜瓜叶片,通过半定量RT-PCR的方法分析了不同的症状表现与病毒量的相互关系.结果表明,症状表现为黄化和重花叶的甜瓜叶片病毒含量基本一致,症状表现为轻花叶的甜瓜叶片中病毒含量显著高于其他2种叶片.
- 袁媛赵特梁相志施艳
- 关键词：甜瓜叶片
- 瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：5
- 2013年
- 以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105。Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白。
- 施艳王振跃袁媛刘珊珊孙虎古勤生
- 关键词：甜瓜P22原核表达抗血清
