谈意隽
- 作品数：6 被引量：51H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- T7噬菌体表达巨细胞病毒PP65蛋白抗原的初步研究
- 2006年
- 目的利用噬菌体展示技术构建巨细胞病毒基质蛋白PP65的抗原,初步评价其抗原性。方法PP65的基因片段经酶切后,与T7噬菌体的基因组相应酶切位点结合,借助包装蛋白组装成为完整的噬菌体。PP65目的蛋白以融合蛋白的形式表达在T7噬菌体的头蛋白部位,每个噬菌体颗粒表面可表达5～15个拷贝。噬菌体可以在宿主细胞中快速繁殖,并且能够迅速裂解宿主细胞,使目的蛋白的富集达到很高的效率。人巨细胞病毒基质蛋白PP65可以激发机体强烈的免疫反应,运用T7噬菌体载体展示系统表达PP65的部分肽段,扩增噬菌体,以SDS-PAGE电泳和western-blot鉴定所表达的抗原特性。结果获得了重组T7-PP65噬菌体,通过鉴定,噬菌体表达在其头蛋白上的PP65抗原可以被天然PP65的单克隆抗体所识别。结论噬菌体展示技术可以有效地进行病毒蛋白抗原的表达,为抗原筛选和疫苗的研制提供科学依据。将PP65表达在T7噬菌体表面,可以研究其免疫原性及评估其作为疫苗的可能性。
- 谈意隽周彩存唐亮刘岽曾宪卓孙宏彬张钥季育华
- 关键词：噬菌体展示巨细胞病毒PP65抗原表位
- 病毒疫苗效能评价方法的研究进展被引量：2
- 2005年
- 病毒疫苗是通过激发机体的细胞免疫和体液免疫的能力 ,以及启动受染细胞的凋亡机制 ,进而抑制相应病毒的增殖扩散与致病。那么 ,对于病毒疫苗效能的评价也面临上述机制的再现与验证。所以 ,关于评价病毒效能的方法学研究发展很快。本文对新近有关评价病毒疫苗效能的方法学研究进展作了综述。
- 谈意隽季育华
- 关键词：病毒疫苗致病细胞免疫体液免疫凋亡机制毒效
- 肿瘤坏死因子α启动子基因多态性与巨细胞病毒感染所致婴儿肝炎综合征的关系被引量：1
- 2005年
- 目的探讨血清肿瘤坏死因子α(TNFα)水平及TNFα启动子基因多态性与巨细胞病毒(CMV)感染所致婴儿肝炎综合征(NHS)的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清TNFα水平,同时应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TNFα启动子基因多态性。结果在NHS患儿中,TNFα基因启动子区-308 G-A单碱基突变频率明显高于健康人群(P<0.01),在NHS患儿母亲中的突变频率也明显高于健康人群(P<0.01),在NHS患儿与NHS患儿母亲中的突变频率差异无显著性。NHS患儿血清TNFα水平[(1 164.00±576.00)pg/m l]显著高于正常同龄婴幼儿[(5.22±2.24)pg/m l,P<0.001];NHS患儿母亲血清TNFα水平[(822.60±506.00)pg/m l]显著高于正常健康成年人[(14.90±8.20)pg/m l,P<0.001],各组内TNFα基因型间TNFα水平比较差异均无显著性(P>0.05)。结论TNFα的基因启动子区-308单碱基多态性可能与NHS的易感性、发病及致病相关。
- 彭奕冰王枕亚孙宏斌张王月谈意隽郭红梅季育华
- 关键词：肿瘤坏死因子ΑNHS基因多态性
- 乳胶凝集法检测小儿急性胃肠炎粪便中轮状病毒抗原
- 2004年
- 刘瑛谈意隽沈霞
- 关键词：轮状病毒急性胃肠炎乳胶凝集法抗原腹泻脱水性
- 人巨细胞病毒pp65核酸疫苗的构建、表达与动物免疫效应被引量：1
- 2005年
- 构建真核重组表达质粒PVAX1-pp65,通过对其表达产物的鉴定和免疫小鼠实验,探讨PVAX1-pp65载体对诱导免疫应答的效果及方式。用已构建的原核表达载体pp65-pet32a,经酶切后与DNA疫苗载体PVAX1连接,构建HCMVpp65核酸疫苗(PVAX1-pp65)。用脂质体法将其转染293细胞,经间接免疫荧光、免疫印迹试验来验证其表达的产物。同时,免疫小鼠后取其脾脏细胞,经流式细胞仪检测其CD4+和CD8+T细胞;并利用MTT法测定免疫小鼠的T细胞对ConA和重组pp65蛋白刺激后的增殖活性。结果显示构建的真核表达载体PVAX1-pp65,经测序验证其序列正确。体外转染实验结果表明转染重组质粒的细胞胞浆内呈现与特异性pp65单克隆抗体反应的颗粒状荧光产物,免疫印迹试验也显示重组质粒转染的细胞裂解物中有pp65蛋白条带。另外,免疫小鼠脾CD8+T细胞的含量明显高于对照组;免疫鼠脾细胞对重组pp65抗原蛋白的刺激后增殖反应明显。综上结果证实,成功地构建了HCMVpp65核酸疫苗,并能有效地表达,表达的蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。HCMVpp65DNA疫苗可诱导小鼠产生针对HCMV的特异性细胞免疫应答,可作为一种有应用前景的核酸疫苗进一步深入研究。
- 张玥孙宏彬谈意隽季育华
- 关键词：人巨细胞病毒PP65核酸疫苗细胞免疫
- 肺炎支原体IgM抗体检测在小儿肺炎诊断中的应用价值被引量：47
- 2002年
- 为探讨低效价颗粒凝集SERODIAS—MYCO Ⅱ试剂盒检测肺炎支原体-IgM抗体在小儿肺炎诊断中的应用价值,采用SERODIAS-MYCO Ⅱ试剂盒对146例疑似支原体肺炎患儿和36例非支原体肺炎患儿的血清,进行MP-IgM抗体检测,并与传统冷凝集试验进行比较。结果显示SERODIA-MYCO Ⅱ试剂盒有明显的特异性和敏感性,具有操作简便、快速等优点。因此,建议将SERODIAS-MYCO Ⅱ试剂盒列为支原体肺炎实验室诊断的常规检查。
- 庞菊川谈意隽刘瑛沈霞
- 关键词：肺炎支原体IGM抗体小儿肺炎冷凝集试验
