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赵乐然: 作品数：10 被引量：30H指数：4; 供职机构：天津医科大学总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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D型沙眼衣原体质粒蛋白pgp3的克隆、表达、鉴定及其免疫原性初探被引量：5: 2014年; 目的获得D型沙眼衣原体质粒蛋白pgp3基因及其蛋白，并鉴定其免疫原性。方法PCR扩增目的基因，将其定向插入原核表达载体pGEX-6P-1中，连接产物转化入大肠埃希菌DH5c~，提取质粒进行酶切、测序、PCR鉴定。再将重组质粒转化人大肠埃希菌BL21并诱导表达，Western印迹鉴定目的蛋白，谷胱甘肽巯基转移酶（GST）磁珠纯化pgp3-GST融合蛋白。用纯化后的蛋白免疫新西兰家兔，Western印迹检测抗体与pgp3蛋白的结合，酶联免疫吸附试验（ELISA）测定抗体效价。结果克隆目的基因序列长度为795bp，与基因库中一致，Western印迹显示目的蛋白相对分子质量为54000，并得到纯化蛋白。所得兔血清可识别pgp3蛋白，ELISA检测多克隆抗体效价达1：25600。结论成功表达具有强免疫原性的pgp3-GST融合蛋白，为进一步研究奠定基础。; 孔杰孙毅娜赵乐然肖萌王敬李卓然刘原君刘全忠; 关键词：衣原体沙眼重组融合蛋白质类免疫法

M13-IN5重组噬菌体对沙眼衣原体的抑制机制: 2022年; 目的探索重组M13-IN5噬菌体抑制沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)生长作用的机制。方法通过噬菌斑法测定M13-IN5噬菌体的滴度;CCK-8法检测M13-IN5噬菌体和青霉素对HeLa细胞的毒性作用;将不同滴度的M13-IN5噬菌体与50 U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后,通过免疫荧光计数包涵体数量;将滴度为10^(7)pfu/mL M13-IN5噬菌体与50 U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后进行子代感染力实验;采用定量逆转录PCR检测两组干预后CT_046、CT_111、CT_395、CT_443、CT_666、CT_823基因的转录变化,未干预沙眼衣原体感染组为阳性对照。两样本均数间比较采用t检验,多组样本均数间比较采用单因素ANOVA方法,多个样本间两两比较采用Bonferroni校正。结果滴度≤10^(9)pfu/mL的M13-IN5噬菌体以及50 U/mL的青霉素对HeLa细胞无毒性作用,10^(7)pfu/mL M13-IN5噬菌体与50 U/mL青霉素干预后,48 h形成的包涵体数量无明显区别,抑制率分别为19.62%和21.09%(P>0.05);M13-IN5噬菌体组干预形成的子代包涵体数量较青霉素干预组减少20.26%(P<0.05)。CT_046、CT_443在两个干预组转录水平均下降,M13-IN5噬菌体组较青霉素组下降明显(P<0.05);M13-IN5噬菌体干预组CT_666转录水平下降(P<0.05),青霉素干预组无变化(P>0.05);青霉素干预组压力应答基因CT_111、CT_395、CT_823转录水平增高(P<0.05),M13-IN5噬菌体干预组以上基因转录水平无变化(P>0.05)。结论重组M13-IN5噬菌体对沙眼衣原体的抑制作用强于青霉素,CT_046、CT_443、CT_666基因是重组噬菌体抑制沙眼衣原体生长的作用靶点。; 王江懿尤聪赵乐然王梅魏世娟练婷婷邵丽丽刘全忠; 关键词：沙眼衣原体青霉素

泌尿生殖道沙眼衣原体感染检测方法的进展: 2023年; 泌尿生殖道沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染是世界范围内严重的性传播疾病。Ct感染的早期诊断和治疗在控制疾病方面发挥着重要作用,本综述总结了Ct感染检测方法的发展变化,讨论了泌尿生殖道Ct感染各种检测方法的优势和劣势,其中近几年新兴的组学技术有望成为Ct感染检测的新手段。对组学方法进行优化很有必要,尤其应致力于将组学技术优化发展成为一种快速准确的即时检测方法,使其适应于各种检测环境从而更加有效地进行患者管理和疾病控制。; 赵乐然尤聪刘全忠; 关键词：沙眼衣原体泌尿生殖道感染组学技术

沙眼衣原体异常网状体在体外不同诱导条件下的变化特点及可能机制被引量：2: 2022年; 沙眼衣原体泌尿生殖道持续感染可能导致女性盆腔炎、异位妊娠和输卵管性不孕,男性尿道炎、附睾炎等诸多并发症,是国内外疾病控制的热点和难点。近年来,国内外研究表明沙眼衣原体异常网状体可能是导致持续感染的重要原因之一。本综述通过不同体外条件下诱导的沙眼衣原体异常网状体,分析其基因组学及蛋白质组学特征,以期确立异常网状体在治疗抵抗中发挥的重要作用。对异常网状体相关因素的识别,为亚临床难治性慢性感染的检测提供新的诊断目标,是找到治疗沙眼衣原体感染并发症的适当方法的先决条件,对于识别后基因组时代的新靶点至关重要。; 王梅尤聪王江懿赵乐然邵丽丽刘全忠; 关键词：沙眼衣原体基因组学蛋白质组学

两种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体的比较被引量：6: 2014年; 目的比较两种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。方法收集2012年3月-2013年3月性病门诊1240例就诊者的宫颈或尿道分泌物标本,分别应用沙眼衣原体抗原检测法(胶体金法)、聚合酶链式反应法(PCR)检测沙眼衣原体感染,并以细胞培养法作为诊断金标准,比较两种检测方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果在1 240例临床标本中,PCR法检测出阳性标本54例,与金标准相符22例,而胶体金法检出阳性标本41例,仅6例与金标准相符,PCR法在敏感性(84.62%)、特异性(97.36%)、阳性预测率(40.74%)及阴性预测率(99.66%)方面均较胶体金法有明显优势,差异有统计学意义(P<0.01)。结论针对性病门诊筛查诊治泌尿生殖道沙眼衣原体,PCR法比传统胶体金法检测具有较高敏感性、特异性、阳性预测率及阴性预测率,在符合技术开展条件下可作为临床应用。; 赵乐然刘原君王敬刘全忠; 关键词：沙眼衣原体泌尿生殖道 PCR 胶体金法细胞培养法

2006年至2010年天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体感染治疗效果的临床分析被引量：5: 2017年; 目的了解泌尿生殖道沙眼衣原体感染常用药的治疗效果及其5年的变化。方法2006年至2010年在天津医科大学总医院性病门诊确诊的泌尿生殖道沙眼衣原体感染者，经阿奇霉素、米诺环素、莫西沙星、克拉霉素治疗后并完成3次随访的患者2 809例，用科克阿米蒂奇趋势检验方法分析4种抗菌药物随着时间推移治疗效果的变化趋势。结果2006至2010年，阿奇霉素的治愈率分别为76.70%（79/103）、74.19%（92/124）、74.13%（106/143）、71.43%（100/140）和70.77%（92/130）；米诺环素分别为75.31%（61/81）、64.67%（97/150）、66.53%（159/239）、65.05%（188/289）和63.03%（104/165）；莫西沙星分别为88.82%（167/188）、86.23%（119/138）、82.96%（185/223）、81.19%（233/287）和81.03%（158/37）；克拉霉素分别为82.93%（34/41）、80.49%（33/41）、79.25%（42/53）、78.18%（43/55）和75.00%（18/24）。科克阿米蒂奇趋势检验示莫西沙星对泌尿生殖道沙眼衣原体的治愈率呈明显逐年下降趋势（P〈0.05），阿奇霉素、米诺环素和克拉霉素的下降趋势不明显（均P〉0.05）。结论莫西沙星的治愈率较高，但有逐年降低的趋势；阿奇霉素次之，米诺环素治愈率较低，但较稳定。克拉霉素病例数少，尚待观察。; 邵丽丽展小飞孔杰赵乐然齐蔓莉王惠平王树椿刘全忠; 关键词：生殖道感染抗生素疗效

婴幼儿的沙眼衣原体感染被引量：8: 2016年; 沙眼衣原体（chlamydia trachomatis,CT）是目前国内外最常见的性病病原体,其与多种疾病关系密切。成年人感染后大多临床症状轻,病情隐匿,迁延难愈。由于缺乏妊娠期常规筛查手段,新生儿和婴幼儿均具有感染CT的高风险。母亲孕期感染后多无明显症状,如不及时治疗,不但可造成不孕、异位妊娠、早产、流产、死胎等,还可在孕期或分娩时造成胎儿感染,且分娩后又可通过密切接触传播给婴儿。CT感染主要引起新生儿包涵体结膜炎、婴儿肺炎,部分CT的原体可通过泪腺进入鼻咽部及下呼吸道,从而延至生后6周~6个月发生慢性肺部炎症。本文主要讨论婴儿CT感染的生物学特征、流行病学特征,及其所致疾病包括新生儿包涵体结膜炎、婴幼儿肺炎、阴道炎和中耳炎的临床表现、诊断和治疗等。这些感染部位的炎症都是来自感染CT的孕妇,即为母婴之间的垂直感染。但不包括水平的间接感染,亦不包括由CT的A,B,C型引起的包涵体结膜炎,也不包括肺炎衣原体引起的肺炎。; 赵乐然陈丽; 关键词：沙眼衣原体母婴传播新生儿肺炎阴道炎中耳炎

头孢曲松治疗神经梅毒的系统性评价和Meta分析: 2023年; 目的:系统评价头孢曲松治疗神经梅毒的疗效。方法:计算机检索PubMed、The Cochrane Library、Web of science、Embase、Clinictrials.gov、知网、维普及万方数据库。检索自建库起至2022年2月关于头孢曲松对比青霉素治疗神经梅毒的对照研究,筛选纳入文献后提取资料并进行质量评价,利用RevMan5.4统计软件进行Meta分析。结果:共检索到10篇文献,621例患者。Meta分析结果示:头孢曲松与青霉素治疗神经梅毒在总血清有效率[RR=1.16,95%CI(0.92,1.47),P=0.22]、6个月血清有效率[RR=1.03,95%CI(0.77,1.39),P=0.82]、12个月脑脊液转阴率[RR=1.06,95%CI(0.85,1.33),P=0.61]、18个月脑脊液转阴率[RR=0.97,95%CI(0.86,1.10),P=0.66]方面差异均无统计学意义;头孢曲松组临床症状改善率方面明显优于青霉素组[RR=1.31,95%CI(1.18,1.46),P<0.00001],复发率低于青霉素组。两组均未报告严重不良反应。结论:头孢曲松治疗神经梅毒的疗效并与青霉素相当,当青霉素应用受限时,可作为其替代治疗方案,但这仍需大样本随机对照试验证明。; 张心悦尤聪赵乐然王江懿王梅刘全忠; 关键词：神经梅毒 META分析头孢曲松青霉素

VP1Cm—一种对沙眼衣原体高效抑制蛋白的构建被引量：1: 2020年; 目的设计构建针对沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)具有高效抑制作用的重组蛋白,为衣原体治疗抵抗探索新的解决方法。方法通过生物信息学方法设计VP1Cm蛋白的基因序列。应用基因合成的方法构建重组质粒VP1Cm-pET28a(+)并转化至大肠杆菌中。用带Ni^+的亲和树脂纯化蛋白,梯度透析复性蛋白。CCK8法测定重组蛋白对Hela细胞的毒性作用。将豚鼠嗜衣原体噬菌体PhiCPG1衣壳蛋白VP1、截短蛋白VP1C、蛋白VP1Cm、杆菌肽和磷酸盐缓冲溶液(PBS)分别与E型Ct标准株于室温下预孵育3 h后接种至Hela细胞,同时设置Ct感染对照组。48 h后免疫荧光染色计数包涵体。多组样本均数间比较用单因素ANOVA分析,两样本均数间比较用Bonferroni检验。结果成功表达并纯化出蛋白VP1Cm。在相同浓度时,PhiCPG1衣壳蛋白VP1、截短蛋白VP1C和蛋白VP1Cm对Ct的抑制率分别为76.20%、85.13%和90.01%。结论经设计过的蛋白VP1Cm对Ct的抑制效果优于PhiCPG1衣壳蛋白VP1及其功能结构域截短蛋白VP1C。; 陈晗赵乐然尤聪孔杰邵丽丽刘全忠; 关键词：沙眼衣原体 VP1

沙眼衣原体质粒蛋白pgp3多克隆抗体的制备及鉴定被引量：3: 2014年; 目的表达并纯化D型沙眼衣原体质粒蛋白pgp3，制备鼠源性多克隆抗体。方法诱导表达pgp3蛋白，经谷胱甘肽-S-转移酶（GST）磁珠纯化后免疫BALB／c小鼠，制备多克隆抗体，Western印迹、细胞免疫荧光鉴定抗体的特异性，间接ELISA法测定抗体效价。结果得到纯化的pgp3蛋白，获得鼠源性多克隆抗体，经Western印迹和细胞免疫荧光鉴定抗体可特异性结合pgp3蛋白，ELISA测定所得抗体效价为1：819200。结论成功制备具有高效价、高特异性的抗pgp3多克隆抗体。; 孔杰孙毅娜赵乐然肖萌王敬马璟玥刘原君刘全忠; 关键词：质粒

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