赵家宽
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：吉林大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 肉鸽NDV吉林分离株的分离鉴定及其F基因的遗传进化分析
- 2013年
- 利用SPF鸡胚从吉林省某肉鸽养殖场送检的疑似新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染肉鸽体内分离获得1株病毒,通过电镜负染观察、血清学检查、RT-PCR检测以及病理组织学观察等方法对该株病毒进行系统的鉴定,电镜负染观察可见呈圆形、有囊膜的病毒粒子,且在囊膜表面有呈放射状排列的纤突;血清学检查结果显示,该病毒株可凝集鸡的红细胞,具有血凝性;RT-PCR扩增获得与预期目的基因片段大小一致的条带;病理组织学观察可见脑血管及神经胶质细胞周围间隙增大,呈典型的脑水肿变化。综合分析以上结果,证实该分离株为NDV,命名为NDV-cc-12。参照GenBank中NDV F基因的核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,利用RT-PCR成功扩增获得NDV-cc-12分离株F基因并对其进行序列测定。序列分析结果显示,获得的NDV-cc-12分离株F基因片段长为374bp,其裂解位点的氨基酸序列为112RRQKRF 117,符合NDV强毒株裂解位点序列特征。F基因的系统发育进化树结果表明,NDV-cc-12分离株与HLJ4-95毒株的亲缘关系较近,处于同一基因亚型上,属于基因Ⅵ型。
- 张頔周平唐博赵家宽毕经影杨占清丛彦龙赵魁高丰
- 关键词：新城疫病毒F基因遗传进化分析
- PHEV感染对树突状细胞的活化及其细胞疫苗免疫保护作用
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒（Porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus，PHEV）属于β冠状病毒属成员，其主要侵害3周龄以内的仔猪，临床上常常表现为两种类型，即呕吐、衰竭或...
- 赵家宽
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒树突状细胞免疫保护
- 文献传递
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及山东省猪血清抗体检测分析被引量：8
- 2014年
- 首先应用血凝抑制试验(HI)对从山东省部分地区采集的178份猪血清样品进行了猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)抗体检测。结果显示,这些猪群中HEV的HI抗体总体阳性率高达61.24%(109/178),说明HEV的感染较为普遍。同时,以纯化的病毒作为包被抗原,通过优化反应条件,成功建立了HEV抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。应用该ELISA方法对从山东地区猪血清中随机抽取的44份样品进行检测,结果显示,HEV抗体阳性率为72.73%(32/44);而HI抗体阳性率为56.82%(25/44)。两种检测方法的阳性符合率为92.00%。结果表明,建立的ELISA方法较HI方法敏感性高。
- 刘立卓赵家宽贺文琦兰云刚吕晓玲王桂花常灵竹赵魁高丰成子强靳朝
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒血凝抑制试验抗体调查
- 猪血凝性脑脊髓病毒刺激小鼠树突状细胞成熟及炎性因子分泌被引量：4
- 2015年
- 为了了解猪血凝性脑脊髓炎病毒(Procine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)感染机体后对树突状细胞(Dendritic cell,DC)的激活状况,以及DC在PHEV感染过程中参与免疫应答的能力,本试验分离了BALB\c小鼠骨髓细胞,并通过条件培养基诱导培养8d,获得纯度约77.69%的DC。将PHEV接种DC后,分别对其表面成熟标志分子CD40、CD80、MHCⅡ类分子以及分泌炎症因子的能力进行检测分析。结果显示,PHEV感染DC后T细胞共刺激分子CD40、CD80及MHCⅡ均有一定程度的上调,同时DC分泌细胞因子和趋化因子的能力显著增强,尤其IL-1β的mRNA表达量增高近10倍。经荧光定量PCR方法检测病毒刺激后DC模式识别受体的表达情况结果显示,TLR4和TLR9表达量变化不明显,TLR7的表达受到抑制;但Rig-I的表达量显著增加。结果表明,PHEV在体外能有效的活化DC并促使其成熟为有效的抗原提呈细胞,具有潜在的激活T、B淋巴细胞的能力。
- 赵家宽岳慧青张竞兰云刚田忠华高丰贺文琦
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒树突状细胞炎性因子模式识别受体
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒感染可激活脑内的小胶质细胞被引量：3
- 2015年
- 以猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)易感的BALB/c小鼠为实验动物模型,以小胶质细胞表面特异性标记物Iba1蛋白为检测对象,利用荧光定量PCR、Western-blot、免疫组化等方法,分别从基因转录水平、蛋白水平和组织学水平对PHEV感染后不同时间点小鼠脑内小胶质细胞的增殖、活化情况进行了检测分析。结果表明,与对照组相比,试验组小鼠脑组织内的Iba1基因转录水平、蛋白表达量均有升高,且都随着感染时间延长而增大。将采集的小鼠脑组织制作石蜡切片,免疫组化结果证实PHEV的感染激活了小胶质细胞,表现为细胞数量增多,呈聚集样分布;同时细胞形态变化也很明显,胞体变大并呈阿米巴状。上述试验证实PHEV感染小鼠后小胶质细胞发生了明显增殖、活化现象,为后期深入开展PHEV所致神经系统炎性损伤的机制研究奠定了基础。
- 唐志文赵家宽张竞兰云刚高丰贺文琦靳朝
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒小胶质细胞增殖活化
