邬国军
- 作品数:49 被引量:154H指数:7
- 供职机构:中南大学湘雅医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省卫生厅科研基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药辅助基因femB的克隆和原核表达被引量:1
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌femB基因与甲氧西林高水平耐药密切相关,可能成为开发抗MRSA药物的新靶位.以金葡菌基因组DNA为模板,PCR扩增femB全长基因,所得片段与pGM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,阳性克隆以PCR、双酶切及测序鉴定.将鉴定正确的目的片段定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21后经IPTG诱导表达GST/FemB融合蛋白;采用SDS-PAGE及Western blot对融合蛋白进行鉴定.结果显示,重组质粒在宿主菌中获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为75 kD,该融合蛋白可与抗GST-tag抗体特异结合;表明femB基因的原核表达系统构建成功,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
- 邹明祥武文君李军邬国军张宁洁刘文恩范学工
- 关键词:金黄色葡萄球菌基因克隆融合蛋白
- 定量PCR技术被引量:3
- 1999年
- 聚合酶键反应(PCR)是模拟DNA体内复制过程,在体外将DNA片段加以人工扩增的技术。有许多因素都可以影响PCR的扩增效率,导致常规PCR的特异性不强,准确性不高,为此,大量学者设计了定量PCR技术,以克服各种因素对PCR扩增的干扰,从而提高PCR的特异性及准确性。本文对定量PCR技术进行了简要的综述。
- 邬国军
- 关键词:聚合酶链反应
- 人类巨细胞病毒感染对U251细胞HOXB1基因表达的影响被引量:6
- 2003年
- 目的 :通过研究人神经胶质瘤U2 5 1细胞株的HOX基因表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对U2 5 1细胞HOXB1基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。方法 :应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :U2 5 1细胞表达HOXB1基因 ;HCMV感染后 ,U2 5 1细胞HOXB1基因表达明显上调 ;ATRA能显著上调HCMV感染后U2 5 1细胞HOXB1基因的表达。结论 :HCMV感染能诱导U2 5 1细胞HOXB1基因表达上调 ,HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。
- 戴橄陈利玉李太存邬国军罗敏华
- 关键词:人类巨细胞病毒RT-PCR
- 人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响被引量:7
- 2001年
- 目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常 。
- 陈利玉邬国军戴橄姚孟辉罗敏华
- 关键词:巨细胞病毒基因表达细胞先天性畸形
- 单链DNA标记免疫探针的构建用于免疫聚合酶链反应的初步研究被引量:2
- 2002年
- 邬国军陈淑贞陈利玉姚孟辉戴橄罗敏华
- 关键词:免疫PCR聚合酶链反应
- 医学微生物学多媒体教学课件设计与制作的体会被引量:6
- 2005年
- 本文首先介绍了教学多媒体制作软件的选择,然后从素材准备、版面设计、音频及动画素材的使用及课件的交互性设计方面对利用Powerpoint软件制作医学微生物学多媒体教学课件的一些技巧进行了简单的介绍。
- 邬国军夏忠弟刘水平姚孟晖马琼山陈利玉
- 关键词:微生物学POWERPOINT课件多媒体教学
- 长沙地区临床分离碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征被引量:17
- 2012年
- 目的:了解长沙地区临床分离鲍曼不动杆菌的耐药性,探讨碳青霉烯类抗生素耐药菌株的分子流行病学特征。方法:收集长沙地区10所综合性医院2010年3月至2010年12月间临床分离的非重复鲍曼不动杆菌株205株;采用K-B法检测药物敏感性,改良双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶(金属酶),改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR扩增OXA-23,OXA-24,OXA-51,OXA-58及IMP-1和VIM-2型碳青霉烯酶基因,并进行测序分析。应用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR,ERIC-PCR)对菌株进行DNA分型及同源性分析。结果:在监测的18种药物中,耐药率超过50%的达14种。其中哌拉西林耐药率最高(80.5%),头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(2.5%)。共筛选出耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌115株,其金属酶表型及基因检测均为阴性;改良Hodge试验阳性71株,其中64株OXA-23基因扩增阳性。115株菌株OXA-51均阳性,未检出OXA-24,OXA-58基因。115株菌株共分为7个ERIC基因型。其中A型19株,B型72株,为主要的流行克隆。结论:长沙地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药十分严重;产OXA-23和OXA-51型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制,且碳青霉烯类耐药菌株存在克隆流行。
- 梁伟邹明祥邬靖敏邬国军李军豆清娅刘文恩
- 关键词:鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶分子流行病学特征
- 人巨细胞病毒AD_(169)株引起小鼠脑部畸形的初步探讨被引量:13
- 2003年
- 目的 :探讨人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)感染昆明小鼠的敏感性 ,建立HCMV致畸的动物模型。方法 :昆明系小鼠 4 0只 ,随机分为两组 :对照组 (8只 )和接种病毒组 (32只 ) ,病毒感染途径为脑内注射。在接种病毒 7,1 5 ,30 ,6 0d后不同时期分别以病理学方法观察动物脑部发育特点 ,以免疫组织化学方法检查病毒抗原 ,PCR方法检测动物脑组织中HCMV基因。结果 :接种HCMVAD1 69株的小鼠脑组织在不同时期发生了病理改变和脑部发育畸形 ,用免疫组织化学方法和PCR方法在脑组织细胞内检获HCMV抗原和基因。结论 :HCMVAD1 69株可引起小鼠脑部发育畸形 。
- 谢妮陈利玉戴橄邬国军罗敏华袁建辉
- 关键词:人巨细胞病毒小鼠动物模型
- 人类巨细胞病毒在脐动脉血管平滑肌细胞中的增殖被引量:1
- 2010年
- 目的研究人类巨细胞病毒对血管平滑肌细胞的感染性,为人类巨细胞病毒致动脉粥样硬化及移植物血管病机制研究建立细胞模型。方法自脐动脉分离血管平滑肌细胞,以1个感染复数(MO I)的人类巨细胞病毒感染该细胞,观察细胞病变效应,以RT-PCR技术检测人类巨细胞病毒IE基因在平滑肌细胞内的表达,同时以电镜技术检测平滑肌细胞内的病毒颗粒。结果人类巨细胞病毒感染脐动脉血管平滑肌细胞后第3天即可出现细胞病变,至第8天已出现明显的细胞病变效应,以RT-PCR技术可从感染人类巨细胞病毒AD169株的平滑肌细胞内扩增出预期的产物,经测序验证为人类巨细胞病毒IE基因,以电镜技术可从感染人类巨细胞病毒AD169株的血管平滑肌细胞中观察到病毒颗粒。结论人类巨细胞病毒AD169株可以感染人血管平滑肌细胞,并复制出子代病毒颗粒。为人类巨细胞病毒致动脉粥样硬化及移植物血管病的机制研究提供了较好的实验依据及细胞模型。
- 李玲芳陈华邬国军
- 关键词:人类巨细胞病毒动脉粥样硬化血管平滑肌细胞移植物血管病
- 人类巨细胞病毒感染与血脂代谢关键酶的关系被引量:5
- 2010年
- 目的研究人类巨细胞病毒(HCMV)感染与肝脂酶(HL)、脂蛋白脂肪酶(LPL)及卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)3个血脂代谢关键酶的含量或相对活性的关系,初步探讨HCMV致动脉粥样硬化的机制。方法利用ELISA技术检测研究对象HCMV-IgG、HL及LPL,用自身底物法检测LCAT的相对活性并对数据进行分析。结果 HCMV-IgG阳性组HL含量为(170.65±89.14)μg/mL,LCAT相对活性为(30.85±19.72)%,均明显低于HCMV-IgG阴性组(218.74±104.58)μg/mL及(39.16±22.44)%,t值分别为2.2316和2.2633,均P<0.05。HCMV-IgG阳性组与HCMV-IgG阴性组LPL差异无显著性(t=1.4834,P>0.05)。HCMV-IgG抗体指数在20.1以上或10.1以上者,血浆HL含量或LCAT相对活性均分别明显低于HCMV-IgG抗体指数20.0或10.0以下各组;相关性分析表明,HCMV-IgG抗体指数值与HL含量及LCAT相对活性存在明显的负相关关系,相关系数分别为-0.4612和-0.5541(均P<0.05)。结论 HCMV感染可通过改变宿主基因表达致HL及LCAT含量或相对活性下降,从而导致宿主脂代谢异常,最终导致动脉粥样硬化的形成。
- 陈华李玲芳程洁刘伟李娟徐玉芬王明达邬国军
- 关键词:人类巨细胞病毒肝脂酶脂蛋白脂肪酶卵磷脂胆固醇酰基转移酶