郁凯
- 作品数：11 被引量：9H指数：2
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程理学生物学更多>>
- 应用拉氏图信息提高短乳杆菌谷氨酸脱羧酶催化性能被引量：2
- 2016年
- 谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)是用于催化L-谷氨酸脱羧合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyrate,GABA)的唯一酶,提高GAD的催化活力或热稳定性,有利于GABA的高效制备和生产。以热稳定性和活性为筛选目标,通过研究短乳杆菌GAD1407三维模拟结构的拉氏图,确定不稳定氨基酸残基位点K413,采用定点突变的方法构建该位点的突变体,并测定野生型酶和突变酶的热稳定性和活力。结果表明突变酶K413A和突变酶K413I分别在热稳定性和酶活力上获得了提高,突变酶K413A在50℃的半衰期为105 min,是野生酶的2.1倍;突变酶K413I热稳定性没有明显的提高,但其酶活力却得到了有效提高,约为野生型的1.6倍。因此,通过拉氏图提供的结构信息可为利用理性设计提高GAD活性和热稳定性提供指导。
- 柯丕余黄俊胡升赵伟睿吕常江郁凯雷引林王进波梅乐和
- 关键词：谷氨酸脱羧酶蛋白质工程Γ-氨基丁酸
- 谷氨酸脱羧酶热稳定变体G311P基因及其用途
- 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G311P基因，其核苷酸序列在第311位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了...
- 梅乐和郁凯胡升黄俊
- 文献传递
- 谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因及其用途
- 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因，其核苷酸序列在第56位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对...
- 梅乐和郁凯胡升黄俊
- 文献传递
- 饱和定点突变拓宽谷氨酸脱羧酶催化pH范围的研究被引量：5
- 2014年
- 谷氨酸脱羧酶(GAD)是生物法制备γ-氨基丁酸GABA以及一些含氮化合物的关键酶,其催化活力受p H值调控。研究GAD的pH值调控性质具有重要的理论和应用价值。研究通过氨基酸序列比对,发现了一个影响GAD 1407催化p H特性的关键位点:S307。通过对这个位点进行饱和突变,构建突变文库,从中筛选出催化pH范围拓宽的突变酶S307N,并对该突变酶的酶学性质进行了研究。为了解GAD 1407结构与功能之间的相互关系提供了一定的依据。
- 林玲胡升郁凯黄俊梅乐和
- 关键词：谷氨酸脱羧酶蛋白质工程
- 谷氨酸脱羧酶的变体基因及其用途
- 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，该基因的DNA序列为SEQ ID NO.1。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在中性pH值的催化活力，拓宽了酶的最适pH值范围，使对应的...
- 梅乐和郁凯胡升黄俊姚善泾
- 谷氨酸脱羧酶C末端缺失的变体基因及其用途
- 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，其碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了GAD在中性pH值环境的催化活力，使对应变体酶在pH 6.0条件下催化谷氨酸...
- 梅乐和郁凯胡升黄俊姚善泾
- 文献传递
- 谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因及其用途
- 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G56P基因，其核苷酸序列在第56位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对...
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- 文献传递
- 谷氨酸脱羧酶热稳定变体G311P基因及其用途
- 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶热稳定变体G311P基因，其核苷酸序列在第311位有定点突变。研究发现，此位点突变后得到的变体基因编码的谷氨酸脱羧酶的热稳定性有所增强。本发明通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了...
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- 文献传递
- 谷氨酸脱羧酶的变体基因及其用途
- 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，该基因的DNA序列为SEQ ID NO.1。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了其对应变体酶在中性pH值的催化活力，拓宽了酶的最适pH值范围，使对应的...
- 梅乐和郁凯胡升黄俊姚善泾
- 文献传递
- 谷氨酸脱羧酶C末端缺失的变体基因及其用途
- 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶的变体基因，其碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明变体基因通过在编码野生GAD酶基因基础上进行定点突变，提高了GAD在中性pH值环境的催化活力，使对应变体酶在pH 6.0条件下催化谷氨酸...
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