郭淑元
- 作品数：10 被引量：37H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型L1基因的克隆及序列分析被引量：20
- 1999年
- 目的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）晚期基因区（Ｌ１）编码病毒的主要衣壳蛋白，且ＨＰＶ１６感染与宫颈癌发生、发展关系密切，故对中国妇女感染的ＨＰＶ１６基因进行克隆及序列分析有重要实际意义。方法采用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）扩增了３例中国妇女宫颈癌组织中ＨＰＶ１６的Ｌ１基因片段，并对其进行了克隆及全序列分析。结果发现３个ＨＰＶ１６Ｌ１基因核苷酸序列有４处均与最初报道的ＨＰＶ１６Ｌ１ＤＮＡ序列不同，并由此引起所编码的氨基酸亦发生变化。结论中国妇女宫颈癌组织中ＨＰＶ１６Ｌ１核苷酸有一定程度变异。
- 谷鸿喜凌虹张凤民钟照华王文阁郭淑元娄阁郭彩玲
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌
- 人乳头瘤病毒16型晚期基因L1的原核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2000年
- 目的 构建人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型晚期基因 L1的原核表达质粒 ,以期从中选出能够高效表达 HPV16 L1的重组子 ,为进一步表达 L1蛋白奠定基础。方法 应用定向克隆策略 ,将 HPV16 L1基因分别克隆到原核表达载体 p Trac99A和 p ET- 2 1c中。结果 通过酶切鉴定选出了重组子 p Trc99A- HPV16 L1和 p ET- 2 1c-HPV16 L1。结论 HPV16
- 郭淑元凌虹钟照华庄敏林道红曲章义郭彩玲谷鸿喜
- 关键词：基因重组质粒
- 柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因序列分析被引量：6
- 2002年
- 目的 分析柯萨奇 B3病毒 (CVB3 )中国分离株编码主要中和抗原的 VP1基因序列。方法 用逆转录 PCR技术扩增 CVB3中国分离株的 VP1基因 ,通过 TA克隆法构建 p CR2 .1-VP1并进行核苷酸序列的测定分析。结果 测序发现 CVB3中国分离株与 CVB3 Nancy株 VP1基因均编码 2 93个氨基酸 ,二者存在 5 9个核苷酸差异 ,其中 10处影响到氨基酸的编码 ,其余均为同义变异。结论 CVB3中国分离株与 Nancy株 VP1基因序列存在一定的差异 。
- 钟照华田野郭淑元赵文然赵铁强安毅孟繁超谷鸿喜鲁凤民叶鸿瑁
- 关键词：柯萨奇病毒BVP1基因
- 胃腺癌组织中EB病毒EBNA1基因存在情况的检测被引量：1
- 1998年
- 张凤民郭淑元谷鸿喜姜晓峰郭彩玲黄建林
- 关键词：胃肿瘤爱泼斯坦-巴尔病毒病毒DNA
- 原位RT-PCR法检测柯萨奇B病毒RNA的实验研究被引量：1
- 1999年
- 目的建立定位检测细胞或组织中柯萨奇Ｂ病毒ＲＮＡ的原位ＲＴ－ＰＣＲ方法（直接法）。方法对柯萨奇Ｂ病毒（１～６型）感染ＨｅＬａ细胞，经核酸酶（ＤＮａｓｅ和ＲＮａｓｅ）处理后的病毒感染ＨｅＬａ细胞以及非感染的ＨｅＬａ细胞进行原位ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果经扩增后，病毒感染的ＨｅＬａ细胞呈蓝黑阳性信号；并且这种阳性信号经ＲＮａｓｅＡ作用而消失，却不受ＤＮａｓｅ作用的影响；而非感染的ＨｅＬａ细胞则不着色。结论原位ＲＴ－ＰＣＲ法可特异地检测柯萨奇Ｂ病毒感染ＨｅＬａ细胞中的病毒ＲＮＡ，是一种特异和敏感的定位检测方法。
- 张凤民赵德超郭淑元郭彩玲郭彩玲
- 关键词：柯萨奇B病毒HELA细胞RNA
- 原位RT-PCR法定位检测柯萨奇B病毒RNA
- 2001年
- 目的 用定位检测细胞或组织中柯萨奇B病RNA的原位RT PCR方法 (直接法 )。方法 对柯萨奇B病毒 ( 1～ 6型 )感染HeLa细胞 ,经核酸酶 (DNase和RNase)处理后的病毒感染HeLa细胞以及非感染的HeLa细胞进行RT PCR和原位RT RCR检测。结果 经原位RT PCR扩增后 ,病毒感染的HeLa细胞呈蓝黑阳性信号 ;并且这种阳性信号经RNaseA作用而消失 ,却不受DNase作用的影响 ;而非感染的HeLa细胞则不着色 ,其显示的结果与RT PCR的结果一致。结论 原位RT PCR法可特异地检测柯萨奇B病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA ,是一种特异和敏感的定位检测方法 ,可应用于研究该病毒的持续性感染及其与克山病等相关疾病的关系。
- 郭淑元郭彩玲庄敏谷鸿喜张凤民赵德超
- 关键词：柯萨奇B病毒HELA细胞
- 人乳头瘤病毒16型L1基因重组表达质粒的构建及在E.Coli宿主中的表达与鉴定被引量：2
- 2000年
- 构建 pGEX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,为进一步研制基因工程疫苗奠定基础 ,采用PCR方法扩增HPV16中国分离株L1外源基因片段 ,pGEX4T 1为表达载体 ,构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达系统 ,在大肠杆菌宿主BL(2 1)中 ,经IPTG诱导 ,表达融合蛋白GST L1,经SDS PAGE电泳和Westernblot进行鉴定结果表明 ,成功构建pEGX4T 1 HPV16L1重组表达质粒并获得高效表达并经Westernblot鉴定为L1外源蛋白。提示 :所构建的 pGEX4T 1
- 林道红凌虹庄敏郭淑元马培林谷鸿喜
- 关键词：人乳头瘤病毒16型质粒构建
- 人乳头瘤病毒16型晚期基因L1在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2000年
- 人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染与宫颈癌的发生关系密切。其晚期蛋白Ｌ１是主要结构蛋白，可以刺激机体产生中和抗体，对病毒攻击可以起到保护作用。本研究将ＨＰＶ１６型中国分离株的Ｌ１基因定向克隆到原核表达载体ｐＥＴ－２１ｃ质粒中，建立ＨＰＶ１６ Ｌ１在大肠杆菌中的高效表达系统ｐＥＴ２１ｃ－ＨＰＶ１６Ｌ１，该系统在ＩＰＴＧ的诱导下可表达 ６０ｋｕ的 Ｌ１蛋白，表达效率为 ２３％，此蛋白通过Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ得到证实。该表达体系的成功建立可以为进一步研究ＨＰＶ１６ Ｌ１蛋白的分子和免疫学特性以及基因疫苗的研制提供实验依据。
- 郭淑元凌虹庄敏林道红郭彩玲谷鸿喜
- 关键词：基因表达大肠杆菌
- HPV18 L1基因重组DNA构建及其免疫小鼠体内特异抗体的测定被引量：1
- 2000年
- 目的：人类乳头瘤病毒18型（HPV18）感染与宫颈癌的发生高度相关。其晚期基因L1编码的L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原。利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究。方法：从HPV18－pBR322质粒中扩增HPV18L1基因，测序证明扩增片段的可靠性，构建了两个真核表达重组质粒HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1－peEP4。将提纯的质粒DNA直接免疫小鼠，用HPV18L1抗原经ELISA检测小鼠血清相应抗体。结果：HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1-pcEP4质粒DNA均能在小鼠体内表达并诱导产生HPV18特异性抗体。结论：HPV18L1重组质粒DNA直接注射小鼠可以刺激机体产生抗体。
- 贾士东谷鸿喜王文阁钟照华郭淑元凌虹贺福初
- 关键词：HPV18宫颈癌
- 大鼠胎脑组织冻存与同种异体移植被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨冻存大鼠胎脑细胞体外培养的活性及其移植后的存活情况。方法 对经冷冻保存 1～ 2 4周的WK大鼠胎脑细胞进行体外培养 ,观察其存活情况 ,并将保存 2 4h后培养 14d的胎脑细胞行脑内定位移植。结果 冻存 1～ 2 4周的胎脑组织其活细胞率在 90 %以上 ,复苏后培养 14d的胎脑细胞活性最强 ;胎脑细胞移植后可在受者体内存活至少 30d以上。结论 冷冻保存后培养的胎脑细胞能够存活 。
- 林道红王启弘庄敏凌虹郭淑元谷鸿喜金连弘
- 关键词：同种异体移植脑组织移植
