郭颂
- 作品数：7 被引量：26H指数：2
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 泡桐丛枝植原体侵染的泡桐组培苗cDNA文库构建及植原体相关蛋白与文库的筛选
- 郭颂
- 关键词：酵母双杂交CDNA文库构建
- 泡桐丛枝植原体侵染的泡桐组培苗酵母双杂交cDNA文库的构建
- 由植原体引起的泡桐丛枝病分布于整个泡桐栽培区,遍及全国各地.泡桐丛枝病的发生使泡桐的长势减弱,导致木材质量下降,严重时导致病株死亡.植原体具有多型性,形态大小约为80～1000nm,基因组大小为500～1300kb之间,...
- 郭颂林彩丽周涛田国忠范在丰
- 关键词：酵母双杂交系统脱氧核糖核酸文库构建
- 泡桐丛枝植原体侵染的泡桐组培苗酵母双杂交cDNA文库的构建
- ＜正＞由植原体引起的泡桐丛枝病分布于整个泡桐栽培区,遍及全国各地。泡桐丛枝病的发生使泡桐的长势减弱,导致木材质量下降,严重时导致病株死亡。植原体具有多型性,形态大小约为80～1000nm,基因组大小为500～1300kb...
- 郭颂林彩丽周涛田国忠范在丰
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体质粒膜蛋白p19与泡桐互作蛋白的筛选
- ＜正＞泡桐丛枝病是最早发现由植原体引起的病害之一,植原体是寄生于植物韧皮部筛管细胞缺乏细胞壁的原核微生物。质粒作为能够移动的复制子广泛存在于细菌和真核生物细胞,质粒编码的基因对寄主菌来说并非所必需但通常对寄主菌的生长有很...
- 林彩丽郭颂胡佳续宋传生耿显胜周涛范在丰田国忠
- 关键词：森林病害泡桐丛枝病
- 文献传递
- 樱桃病毒A北京分离物外壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：8
- 2010年
- 根据前期研究获得的樱桃病毒A北京分离物(Cherry virus Aisolate Beijing,CVA-BJ)外壳蛋白基因序列设计引物,将此基因克隆到原核表达载体pET-28a后转化大肠杆菌BL21(DE3),以终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达。Ni珠吸附法纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。间接ELISA测得抗血清效价为1∶2048。以纯化后的蛋白和樱桃叶片总蛋白为检测材料,Western blot分析表明抗血清具有高度特异性。间接ELISA方法检测樱桃病叶,结果呈阳性,与RT-PCR检测结果一致。表明制备的抗血清可用于感病樱桃样品中CVA的检测。
- 郭颂张福兴怀晓周颖张瑞范在丰周涛
- 关键词：间接ELISA脱毒苗
- 泡桐丛枝植原体tRNA异戊烯基焦磷酸转移酶基因克隆、原核表达及功能分析被引量：2
- 2013年
- 【目的】为了鉴定植原体tRNA异戊烯基焦磷酸转移酶基因(tRNA-ipt)的表达及蛋白功能,探索植原体致病机理。【方法】对泡桐丛枝、桑萎缩、长春花绿变及苦楝丛枝植原体tRNA-ipt基因完整序列进行PCR扩增和生物信息学分析。对泡桐丛枝植原体tRNA-ipt基因进行原核表达并制备抗体。利用Western blot和FITC间接免疫荧光显微镜检测其在植原体中的表达。使用分光光度计分析该基因对大肠杆菌生长的影响,用ELISA测定转化菌株细胞分裂素含量。【结果】首次发现泡桐丛枝、桑萎缩、长春花绿变及苦楝丛枝植原体中完整tRNA-ipt基因,大小为876 bp,编码291个氨基酸,且N端均含有ATP/GTP结合位点保守序列(GPTASGKT)。4种植原体tRNA-IPT之间的氨基酸序列相似率为99.1%-99.5%,与同组植原体同源性在95.4%-99.3%,与其他组植原体同源性低于70%。SDS-PAGE结果显示tRNA-IPT蛋白在大肠杆菌中得到表达。首次获得泡桐丛枝植原体tRNA-IPT抗体并检测到该蛋白在泡桐发病组织中的特异表达。经过对转化菌株生长曲线及玉米素含量的测定,发现该基因能促进大肠杆菌后期生长和玉米素核苷的积累。【结论】4种植原体tRNA-ipt基因编码相同特性的功能蛋白,泡桐丛枝植原体tRNA-IPT蛋白能够在植原体中表达,根据该基因对异源菌株生长速率和激素合成的影响推断该蛋白可能参与植原体的细胞分裂素合成,在致病过程中起到重要作用。
- 胡佳续田国忠林彩丽宋传生牟海青任争光郭颂周涛范在丰李怀方
- 关键词：原核表达
- 北京地区地黄花叶病病原的分子鉴定被引量：16
- 2010年
- 为明确北京地区发生的地黄花叶病的病原,在进行生物学接种分离纯化的基础上利用RT-PCR方法对其进行了分子鉴定。通过接种指示植物和进行单斑分离,获得了病毒的纯分离物。经RT-PCR和序列测定及分析,有明显花叶症状的北京地黄样品受黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus（CMV）和蚕豆萎蔫病毒2Broad bean wilt virus2（BBWV2）复合侵染。为进一步明确BBWV2地黄分离物（BBWV2-Rg）的分类地位,克隆了BBWV2-Rg RNA2多聚蛋白基因,并进行了序列测定和分析,结果表明该多聚蛋白基因由3 195个核苷酸组成,编码1 064个氨基酸。经序列比对分析,BBWV2-Rg编码的外壳蛋白大亚基LCP基因和小亚基SCP基因核苷酸序列与已发表的BBWV2其它株系相应基因核苷酸序列的同源性分别为78.69%~89.30%和76.99%~90.52%,氨基酸序列同源性分别为91.29%~97.51%和87.82%~96.45%。
- 周颖张瑞郭颂怀晓范在丰周涛
- 关键词：黄瓜花叶病毒系统进化树
