阎晓飞
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 小鼠胎儿成纤维细胞及胚胎干细胞转绿色荧光蛋白基因的研究被引量：1
- 2008年
- 目的检测用增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染的小鼠胎儿成纤维细胞及小鼠胚胎干细胞的转染效率及EGFP的表达情况。方法电穿孔法将EGFP转入胎儿成纤维细胞及胚胎干细胞,G418筛选,荧光显微镜观察转染效率及绿色荧光蛋白表达情况。结果胚胎干细胞的转染率高于成纤维细胞,转染后的两种细胞经药物筛选均有绿色荧光蛋白表达。结论电穿孔转染细胞的方法简单、效率高,是一种较为理想的基因转染方法,经药物筛选后的两种细胞均可用于核移植,为转基因克隆动物的研究奠定了基础。
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- 关键词：电穿孔转基因成纤维细胞胚胎干细胞
- 蛋白激酶Cα在小鼠孤雌及四倍体胚胎早期发育过程中的分布和作用被引量：2
- 2008年
- 为了观察蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)在昆明白小鼠受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段的亚细胞定位和致密化进程中的表达变化,本实验利用免疫荧光化学染色与激光共聚焦显微镜观察相结合的方法,对受精卵、孤雌激活和四倍体胚胎早期发育阶段PKCα的表达进行了定位观察,并利用Westernblot对三组胚胎致密化进程中PKCα的表达进行定量分析。结果显示,PKCα在上述三组胚胎发育的2-细胞期至囊胚期均有表达,虽然不同胚胎PKCα的分布在同一发育阶段存在差异,却表现出在各胚胎期主要分布于卵裂球核染色质内,以及在胚胎致密化开始,PKCα在卵裂球连接处发生重新分布的共同特点。此外,三组胚胎PKCα在致密化进程中的表达呈升高趋势,即致密化后的表达高于致密化前。结果表明,PKCα对胚胎致密化的调节具有重要作用,其在8-细胞/4-细胞期的重新分布是胚胎进入桑椹胚期的必然事件,是胚胎致密化的前提,同时伴随蛋白表达增多。此外,PKCα在囊胚期发生了植入前的第二次重新分布。PKCα在三组胚胎各发育阶段表达情况各不相同,它对小鼠胚胎发育的影响体现在整个早期发育阶段。PKCα在小鼠受精卵早期发育阶段的两次重新分布可能与在致密化开始时启动的细胞黏附事件存在某种必然联系。
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- 关键词：蛋白激酶CΑ孤雌胚胎四倍体胚胎致密化
- 老化对卵母细胞孤雌发育和减数分裂期间微管动态变化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究老化对卵母细胞孤雌激活发育率的影响,以及老化对减数分裂期间微管的动态变化的影响。方法用孤雌激活的方法来观察不同老化时间胚胎的发育情况;用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术结合的方法研究小鼠卵母细胞微管的动态变化。结果从注射hCG后14h到18h,卵母细胞在体外老化过程中激活率和发育率呈上升趋势,但是差异不显著。体外老化至18h,卵母细胞更容易被激活,并且减数分裂期间微管的变化发生要早于14h。结论短时间的体外老化可以使细胞更容易被激活,且微管发育更完善。
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- 关键词：孤雌激活微管卵母细胞激光共聚焦
- 蛋白激酶Cα在小鼠受精、孤雌及四倍体胚胎早期发育过程的分布和作用
- 蛋白激酶 C(protein kinase C,PKC)作为哺乳动物信号转导途径的重要信号分子,对早期胚胎发育过程中核的组建、细胞分裂周期以及细胞偏极化的调节具有重要作用。本实验以昆明小白鼠为实验对象,将孤雌激活获得的孤...
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- 文献传递
