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陈克平: 作品数：166 被引量：670H指数：14; 供职机构：江苏大学生命科学研究院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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利用Red系统快速敲除家蚕核型多角体病毒orf60基因被引量：7: 2007年; 用Red重组系统和最近构建的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)bacmid在大肠杆菌BW25113中快速地敲除BmNPVorf60基因。从大肠杆菌BmDH10Bac中提取BmNPVbacmid,将其电转化到含有质粒pKD46(能表达Red重组酶)的大肠杆菌菌株BW25113中,获得了可用于BmNPV基因打靶的菌株BW25113-Bac。设计一对长63bp的引物(5′端为orf60基因的左右同源臂,长45bp;3′端长18bp,为氯霉素抗性基因(cat)的首尾序列),以pKD3质粒(含cat)为模板,PCR扩增携带orf60左右同源臂的cat,即打靶线性化片段。将该线性化片段电转入BW25113-Bac菌株,在Red重组酶的作用下,线性化片段与BmNPVbacmid中的orf60基因发生同源重组。设计3对特异引物,用PCR方法证明cat成功地替换了BmNPVorf60基因。重组bacmid DNA转染BmN细胞后,Western blot分析未检测到orf60基因的表达。; 王强郭忠建姚勤王海燕陈克平; 关键词：RED重组系统基因敲除

家蚕二分浓核病毒DNA聚合酶基因启动子P97的研究: 2013年; 家蚕浓核病毒2型(BmDNV-2)已被正式命名为家蚕二分浓核病毒(BmBDV),该病毒致使家蚕罹患浓核病。BmBDV是目前已知唯一能够编码DNA聚合酶的ssDNA病毒,DNA聚合酶的表达对该病毒复制至关重要。使用双荧光素酶报告系统检测BmBDV DNA聚合酶基因启动子P97的活性以及病毒潜在的调控蛋白或宿主的互作蛋白对P97的调控作用。BmBDVDNA聚合酶翻译起始位点上游286 nt序列具有启动子活性,但其活性比病毒非结构蛋白NS1基因启动子P5的活性弱。共转染瞬时表达病毒的NS1蛋白使P97启动子活性降低,而病毒的结构蛋白VP则可提高P97启动子活性;宿主家蚕的转录因子Twist蛋白的表达能够提高P97启动子的活性,但其调控作用较小。; 马瑛吕鹏张苗苗胡朝阳李国辉陈克平姚勤; 关键词：DNA聚合酶活性

家蚕中肠组织抗核型多角体病毒病的相关蛋白分析被引量：9: 2008年; 家蚕中肠上皮是病毒经口侵入遇到的第一个组织。昆虫幼虫抵御杆状病毒的感染,可通过选择性的使感染的中肠上皮细胞发生调亡并在释放病毒粒子进入血淋巴之前使感染的细胞从中肠脱落。为研究家蚕抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoledrovirus,BmNPV)病的机制,通过对BmNPV高度抗性和高度敏感性的家蚕品系杂交和回交构建了近等基因系。本文对家蚕高抗,敏感及近等基因系5龄起蚕中肠组织的蛋白质表达谱进行了二维电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分析,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight,MALDI-TOF)质谱对差异蛋白进行鉴定。结果发现了5个差异表达的蛋白。推测这些蛋白可能与家蚕中肠对BmNPV的抗性或感性有关。; 刘晓勇陈克平姚勤李军蔡克亚; 关键词：家蚕中肠家蚕核型多角体病毒二维电泳

河豚鱼骨骼肌蛋白组分析被引量：2: 2009年; 为了建立一套对河豚骨骼肌总蛋白进行蛋白组分析的技术体系,采用高分辨率的双向电泳技术对河豚骨骼肌总蛋白进行分离,银染后用IMAGEMASTERTM软件分析2D凝胶图谱,共检测出112种以上的蛋白。利用基质辅助质量飞行时间质谱(MALDITOFMS)对分离较好的33个蛋白点进行肽质量指纹图谱分析,并用MASCOT在线软件通过检索NCBInr,MSDB及UniProtKB/TrEMBL等数据库,鉴定其中的21个蛋白点,包括原肌球蛋白等结构蛋白以及各种与代谢相关的酶、与信号传导和细胞凋亡相关的蛋白等。该体系为动态监测河豚鱼骨骼肌在不同水环境及饲料的不当添加等情况下蛋白表达谱的变化提供了新的方法。; 陆健郑建洲刘海军李军陈克平; 关键词：河豚骨骼肌双向电泳蛋白质组学

昆虫氨基酸转运蛋白的分类与功能: 2021年; 氨基酸是一类在生物体内参与蛋白质合成、细胞生长调节等生理功能的重要小分子物质,也是一些重要生理活性物质的前体。氨基酸的跨膜转运受氨基酸转运蛋白的调节,氨基酸转运蛋白通常能够转运具有相似结构的多种氨基酸。昆虫的氨基酸转运蛋白可分为8个家族,在营养吸收、物质转运、神经系统调节、信号途径调控和病毒感染等方面具有多种重要功能。本文简要综述昆虫氨基酸转运蛋白的分类和功能,为家蚕和其他昆虫的生理及病理研究提供参考。; 胡朝阳申佳敏刘庆森李国辉陈克平姚勤; 关键词：昆虫

家蚕浓核病毒DNV-3(中国株)的VD_2基因组序列分析被引量：7: 2006年; 浓核病毒BmDNV-3(中国株)基因组中含有两种不同的单链线形DNA分子(VD1,VD2)。该病毒的VD2被分离、纯化、克隆到pUC119载体上,并完成了VD2全基因组序列的测定。序列分析显示:VD2全基因组长为6022个核苷酸,末端拥有524个核苷酸反向重复序列(ITRs)。VD2基因组正链含有2个大的开放阅读框,负链含有1个小的开放阅读框。计算机分析推测该基因组正链上开放阅读框(ORF1)及负链上开放阅读框(ORF3)主要编码病毒的非结构蛋白,而正链上开放阅读框(ORF2)主要编码病毒的结构蛋白。比较BmDNV-3 VD2和BmDNV-2(Yamanashiisolate)VD2基因组全序列,两者同源性达97.7%,并且有132个碱基的替代1、1个碱基的删除和2个碱基插入。研究结果显示BmDNV-3 VD2和BmDNV-2 VD2有很近的亲缘关系,但也发生一定的变异,这为更好地理解浓核病毒种类的多样性,也为研究家蚕浓核病毒进化提供了有益的线索。; 王永杰陈克平姚勤高贵田韩序; 关键词：家蚕浓核病毒基因组结构

理性认识转基因食品的安全性被引量：5: 2007年; 综述了转基因食品的技术实质、转基因植物与传统植物的异同、转基因食品的安全性,阐述了转基因食品的发展前景。; 王永杰陈克平陈宇; 关键词：转基因食品

家蚕羧酸酯酶基因克隆及差异表达被引量：13: 2006年; 家蚕浓核病毒(Bombyx moridensonucleosis virus,BmDNV)是蚕业生产上危害比较严重的一类病毒。用完全抗浓核病中国镇江株(BmDNV-Z)的家蚕品系秋丰、感性品系华八及以华八为轮回亲本回交8代和自交8代构建的近等基因系BC8为材料,采用mRNA荧光差显技术首次分离克隆了家蚕羧酸酯酶(B.moricarboxylesterase,BmCarE)基因全长cDNA,并用实时荧光定量PCR检测了添毒后12h、36h、72h BmCarE在感、抗BmDNV-Z家蚕品系中肠内的表达差异。结果表明:(1)添毒后12h不同品系家蚕中肠BmCarE表达差异最大,抗性品系BC8和秋丰分别是感性品系华八的17.714倍和3.602倍,三者彼此间的差异达到极显著水平;(2)同一品系添毒后12h与添清水后12hBmCarE表达也有较大差异,BC8添毒是BC8添清水的15.08倍,秋丰添毒是秋丰添清水的3.39倍,差异达到极显著水平,而华八添毒和添清水的BmCarE表达量均低,二者差异不显著;(3)同一品系添毒后不同时间BmCarE表达也有较大差异,BC8和秋丰添毒后12h BmCarE表达量最高,显著高于各自添毒后36h和72h表达水平,而添毒后36h与72h表达无显著差异;华八添毒后12h、36h和72h,BmCarE表达无显著差异。上述结果提示羧酸酯酶基因可能与家蚕抗浓核病毒有一定关系。; 高贵田陈克平姚勤王林玲陈慧卿; 关键词：家蚕近等基因系 RT-PCR

家蚕品种资源茧丝性状的调查报告被引量：4: 1994年; 对２０９个家蚕保育品种的茧丝长进行调查，平均丝长８４０ｍ，最长１２７３ｍ，最短３４４ｍ。各类品种中以中系二化品种最长，日系二化次之，多化最短。解舒率的调查结果是，平均值７９．４％，最高１００．Ｏ％，最低４１．５％，９０．０％以上的品种３１个。解舒率多化品种和日本系统品种较好，中系和欧系品种较差。平均解舒丝长６６３ｍ，最长１０４３ｍ，最短２７４ｍ。调查２１８个品种的净度，平均９３．９分，最高９９．２分，最低７６．７分，９８分以上的品种１８个，多化品种净度最好，二化品种次之，一化品种最差。调查了２００个品种的茧丝量，平均０．２３３克，最高０．３５４克，最低０．０７１克。以日系一化品种最高，二化品种次之，多化品种最低。; 林昌麒陈克平吴冬秀汪萍姚琴; 关键词：家蚕品种资源茧丝性状

基因工程抗体及其在识别小分子中的应用被引量：3: 2021年; 对基因工程抗体的种类以及筛选制备进行详细介绍,并对目前其在小分子识别中的研究进行梳理总结,分析基因工程抗体在识别小分子方面的优势,对应用中存在的问题进行讨论,希望对基因工程抗体在小分子识别中的进一步应用和产品研发提供一些思路。; 王沁芸潘晔陈克平王慧英吕鹏; 关键词：基因工程抗体小分子

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