陈淑惠 作品数:40 被引量:197 H指数:9 供职机构: 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市教委科研基金 重庆市科委基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
双歧杆菌脂磷壁酸体外诱导胃癌细胞凋亡的研究 被引量:13 2005年 目的探讨双歧杆菌表面分子脂磷壁酸(LTA)的抗肿瘤作用及其机制。方法应用M TT法、透射电镜及流式细胞术等方法观察双歧杆菌LTA对胃癌细胞BGC 823的增殖抑制作用及其对细胞形态和细胞周期的影响,并用免疫细胞化学染色法检测LTA处理前后细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果双歧杆菌LTA对体外培养的BGC 823细胞具有明显的生长抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。经LTA处理的BGC 823细胞超微结构改变,出现凋亡小体,同时细胞周期发生变化,细胞被阻滞于G0/G1期。免疫细胞化学染色结果显示,LTA能下调B cl-2蛋白和c-m yc蛋白的表达,同时上调p53蛋白和c-fos蛋白的表达。结论双歧杆菌LTA能抑制胃癌细胞BGC 823的增长,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白的表达变化,将细胞阻滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡。 王跃 程磊 刘明方 陈淑惠关键词:胃肿瘤 二裂菌属 凋亡 细胞周期 高效液相色谱紫外检测法测定血浆中总半胱氨酸 被引量:4 2005年 建立了一种柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法测定血浆总半胱氨酸的方法。以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine(TCEP)为还原剂,7-fluorbenzo-2-oxa-1,3-diazole-4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂,N-乙酰半胱氨酸为内标,C8色谱柱分离,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(pH=3.0),梯度洗脱,385nm处检测。线性范围为8.3~1042.6μmol/L,最低检测限为0.42μmol/L,日内精密度为1.67%~1.86%,日间精密度为2.08%~3.06%,平均回收率为98.1%~103.2%。 丁敏 何俊 叶炼 陈淑惠 包红勇关键词:反相高效液相色谱 柱前衍生 紫外检测 半胱氨酸 血浆 双歧杆菌的分离驯化与鉴定 被引量:2 1994年 本文报道了从重庆市正常人群肠道中筛选出的5株双歧杆菌经厌氧→微氧→有氧的方式进行了数百次传代驯化,最后选送3株送国家认可的法定菌种鉴定单位认可为:86321两歧杆菌、86043青春双歧杆菌和86274婴儿双歧菌。它的成功为我们进一步开发系列双歧产品奠定了很好基础。 张德纯 刘明方 陈淑惠 胡宏关键词:双歧杆菌 驯化 双歧杆菌对小鼠肠道树突状细胞数量的影响 被引量:9 2005年 目的研究双歧杆菌对小鼠肠道树突状细胞(dendritic ce ll,DC)数量的影响。方法分别采用活双歧杆菌菌液(1×109CFU/m l)、灭活双歧杆菌菌液(1×109CFU/m l)、双歧杆菌耗尽培养上清(Spen t cu lturesupernatan t,SCS)、无菌生理盐水给BALB/c小鼠灌胃,均为0.5 m l/(只.d),连续7 d,取小肠空、回肠段,SP免疫组织化学法分析检测肠道DC数量。结果DC分布于整个空、回肠的黏膜固有层。细胞大小不一,外形不规则,胞核外形亦不规则,多数呈偏心位,且DC有不规则突起,与周围细胞有紧密的接触。计数发现,双歧杆菌灌胃后小鼠小肠黏膜固有层DC数量增加(P<0.05),以活菌作用最明显,死菌次之,培养上清作用最弱,经统计学处理差异有显著性(P<0.05)。结论外源性双歧杆菌能增加小鼠小肠黏膜固有层中DC的数量,活菌作用最明显。提示双歧杆菌通过胃肠道途径可能影响DC的分化、发育;对DC的作用可能就是双歧杆菌影响机体免疫功能的重要环节;且保持活菌状态对机体免疫有重要作用。 熊菲 程茜 刘明方 陈淑惠关键词:双歧杆菌 树突状细胞 小鼠 肠道 双歧杆菌对单核细胞来源的树突状细胞成熟及功能影响的体外研究 被引量:10 2007年 目的研究双歧杆菌对正常成年人外周血单核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)刺激淋巴细胞增殖功能及分泌细胞因子的影响。方法以GM-CSF、IL-4联合诱导单核细胞生成未成熟DC,加入不同剂量热灭活的双歧杆菌,观察DC形态,检测混合淋巴细胞反应,ELISA法测IL-12、IFN-γ分泌。结果经双歧杆菌死菌刺激后,可获得具有典型树突状突起形态的DC;诱导后的DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力增强(P<0.01),分泌IL-12、IFN-γ的水平提高(P<0.05),呈剂量依赖型。结论双歧杆菌能影响单核细胞来源的DC的分化、成熟及功能的发挥,且不同剂量的双歧杆菌对DC的成熟程度影响有差异。 熊菲 程茜 刘明方 陈淑惠关键词:树突状细胞 双歧杆菌 单核细胞 小鼠胃内和皮内接种BCG免疫后抗结核细胞免疫的比较 2004年 目的 :为比较小鼠胃内与皮内接种BCG后 ,机体产生抗结核杆菌的细胞免疫。方法 :分别于小鼠胃内、皮内免疫接种BCG的第 6 0、90天 ,检测小鼠脾淋巴细胞受到PPD刺激后转化率、小鼠脾淋巴细胞受到PPD刺激后IL - 2表达量。结果 :淋巴细胞的转化率分别为 31.30 % ,37.90 % (与皮内接种无显著性差异 ,与未免疫组有显著性差异 ) ;脾淋巴细胞IL - 2表达量分别为 37.4 7± 5 .6 0 (U/ml) ,39.4 1± 7.73(U/ml) (与皮内接种无显著性差异 ,与未免疫组有显著性差异 )。结论 魏江 卢贤瑜 陈淑惠 刘明方关键词:BCG 细胞免疫 双歧杆菌的生物拮抗与药敏试验 被引量:7 1991年 本文介绍了双歧杆菌生物拮抗试验和药物敏感试验的方法。结果说明双歧杆菌对肠道正常菌群及病原菌有调节与拮抗作用,且对多种抗生素敏感。提示在治疗肠道感染时,应尽量避免口服对双歧杆菌敏感的药物,否则会使肠道感染加重或蔓延。 刘明方 张德纯 陈淑惠 胡宏关键词:双歧杆菌 抗生素 药物敏感试验 生物调节 复方双歧豆奶的营养成份及保质观察 被引量:3 1996年 复方双歧豆奶系双歧杆菌等菌发酵新鲜豆浆、牛奶等配制而成。本文对其糖、脂肪、蛋白质、微量元素、游离氨基酸等营养成份进行了检测,并观察了在不同温度条件下的保质情况。实验证明,复方双歧豆奶具有合理的营养组成,能提供足够数量的双歧活菌,在4℃冰箱中有较长的保质期,认为是一种较好的营养保健品。 张德纯 邓蕾 刘明方 陈淑惠 胡宏关键词:豆奶 营养成分 保质期 双歧杆菌脂磷壁酸抗免疫衰老的实验研究 被引量:8 2006年 目的:探讨双歧杆菌抗衰老的分子机理。方法:在建立D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型的同时,每日注射双歧杆菌LTA。检测各组小鼠体重增长曲线、胸腺形态、胸腺指数、用免疫组化方法检测胸腺c-fos、p16蛋白表达及用ELISA法检测外周血IL-2的含量。结果:与青年对照组小鼠相比,衰老模型组小鼠胸腺组织形态结构异常,体重、胸腺指数、胸腺c-fos蛋白表达与外周血IL-2含量显著下降,胸腺p16蛋白表达显著升高;而双歧杆菌LTA,能显著逆转上述这些变化。结论:双歧杆菌LTA具有抗衰老作用。 王跃 付玉荣 刘明方 陈淑惠关键词:双歧杆菌 脂磷壁酸 免疫衰老 HtrA基因缺陷对肺炎链球菌毒力影响的研究 被引量:5 2006年 目的HtrA基因可编码肺炎链球菌的一种重要蛋白酶,本文目的是探索HtrA基因缺陷对细菌毒力的影响.方法用插入复制失活的方式使HtrA基因缺失,通过RT-PCR分析毒力因子表达,并通过动物试验观察HtrA基因缺陷株毒力改变情况.结果RT-PCR显示HtrA缺陷株毒力因子表达低于野毒株,两组比较P<0.05;转化试验发现缺陷菌株转化力下降;小鼠毒力试验表明野毒株半数致死时间22h,而缺陷株半数致死时间8d,P<0.01,有显著性差异;缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野毒株.结论HtrA基因缺陷使肺炎链球菌多种毒力因子表达减弱,自然转化能力下降,毒力降低. 黄远帅 许颂霄 朱旦 阳强 刘明芳 陈淑惠 张雪梅 尹一兵关键词:肺炎链球菌 毒力因子 密度感应系统