黄锟
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 供职机构：武汉工程大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 人乙醛脱氢酶2基因在毕赤酵母SMD1168中的表达研究被引量：6
- 2010年
- 目的得到一株产人乙醛脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase-2,ALDH2)的重组毕赤酵母菌株,优化其发酵条件以满足生产和科研需求。方法将ALDH2基因整合到质粒pPIC9K,构建重组表达载体pPIC9K-ALDH2,将重组表达质粒pPIC9K-ALDH2经电转化到毕赤酵母SMD1168中,转化子经MD平板筛选后,用G418筛选多拷贝重组子,测序鉴定。通过改变诱导温度、pH、初始OD值、甲醇浓度等诱导条件,对SMD1168(pPIC9K-ALDH2)发酵的条件进行优化。结果ALDH2cDNA整合到毕赤酵母基因组中,得到SMD1168(pPIC9K-ALDH2);获得最佳的诱导表达优化条件:在28℃、pH=7.0、诱导初始OD600=12、每隔24h添加1.5%甲醇、转速为300r/min,发酵所产生的人ALDH2酶活可达到0.115U/ml,相对较高。结论以蛋白酶缺陷型毕赤酵母SMD1168为宿主,分泌表达质粒pPIC9K为载体,能够成功构建重组子SMD1168(pPIC9K-ALDH2)。
- 黄锟赵玉凤赵锦雷明科林宏楠王存文吴元欣
- 关键词：毕赤酵母醛脱氢酶乙醛基因
- 按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列
- 本发明涉及一种基因序列。按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列，其特征在于：按照毕赤酵母偏好性设计的DNA分子，该分子编码具有与人乙醛脱氢酶2基因gene ID 217编码的蛋白在氨基酸水平相同的核苷酸序列。所述的按...
- 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡池汝安黄锟赵锦
- 文献传递
- 立式撞击流反应器破碎酵母菌的研究被引量：1
- 2009年
- 介绍了自行研制开发的新型立式撞击流反应器破碎酵母菌的方法,并研究了转速、撞击时间和介质用量等因素对酵母菌破碎率的影响。结果表明,采用立式撞击流反应器破碎酵母菌,在转速为1200r.min-1、撞击时间为7h、介质(细沙)用量为200g时,破碎率可达到75.8%。该方法可望在细胞水力破碎方面获得极有价值的应用,也有利于进一步扩展和深化液体连续相撞击流理论。
- 邹文敏郭嘉赵玉凤周玉新伍沅黄锟杨雨佳
- 关键词：撞击流酵母菌破碎率影响因素
- 一株重组毕赤酵母菌株的应用
- 本发明涉及一种基因工程重组微生物的应用。一株重组毕赤酵母菌株的应用，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115－07ALDH2菌株应用于解酒、保肝。本发明具有解酒、保肝效果好的特点。
- 吴元欣赵玉凤雷明科邓凡黄锟赵锦王红波王存文
- 文献传递
- 人乙醛脱氢酶2基因在毕赤酵母中的高效表达被引量：6
- 2010年
- 去除自行构建的质粒pPIC9K-07ALDH2的信号肽(α-Factor)得到质粒pPIC9K-ALDH2-delsign,采用电转化方法将该质粒转化到Pichia pastorisSMD1168中构建得到能在胞内高效表达人乙醛脱氢酶2(ALDH2)的基因工程菌株Pichia pastorisSMD1168(pPIC9K-ALDH2-delsign)。利用该重组毕赤酵母摇瓶发酵得到的发酵液的人ALDH2的酶活为0.315 U.mL-1,明显高于胞外表达时人ALDH2的酶活;经过亲和色谱分离纯化后的人ALDH2酶液的酶活为0.944 U.mL-1。
- 赵锦赵玉凤黄锟雷明科吴元欣刘洋
- 关键词：毕赤酵母乙醛脱氢酶
- 按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列的方法
- 本发明涉及一种设计基因序列的方法。按毕赤酵母偏爱密码子设计人乙醛脱氢酶2序列的方法，其特征在于：按照毕赤酵母偏好性设计的DNA分子，该分子编码具有与人乙醛脱氢酶2基因gene ID 217编码的蛋白在氨基酸水平相同的核苷...
- 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡池汝安黄锟赵锦
- 文献传递
- 一株重组毕赤酵母菌株及其筛选方法
- 本发明涉及一种基因工程重组微生物及其筛选方法。一株重组毕赤酵母菌株，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115-07ALDH2 CCTCC NO：M208266。本发明具有解酒、保肝效果好...
- 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡王存文黄锟赵锦
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- 一株重组毕赤酵母菌株的应用
- 本发明涉及一种基因工程重组微生物的应用。一株重组毕赤酵母菌株的应用，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115-07ALDH2菌株应用于解酒、保肝。本发明具有解酒、保肝效果好的特点。
- 吴元欣赵玉凤雷明科邓凡黄锟赵锦王红波王存文
- 文献传递
- 一株重组毕赤酵母菌株及其筛选方法
- 本发明涉及一种基因工程重组微生物及其筛选方法。一株重组毕赤酵母菌株，其特征在于为一株巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115－07ALDH2CCTCC No：M208266。本发明具有解酒、保肝效果好的...
- 赵玉凤吴元欣雷明科邓凡王存文黄锟赵锦
- 文献传递
- 人乙醛脱氢酶2的表达及其在缓解小鼠急性酒精中毒中的研究
- 人乙醛脱氢酶2（acetaldehyde dehydrogenase2, ALDH2）是乙醇在体内代谢关键酶之一。在醉酒过程中，乙醇代谢产生大量乙醛，通过ALDH的催化分解，可以缓解乙醛对人体的毒害作用。ALDH在体内其...
- 黄锟
- 关键词：ALDH动物实验
- 文献传递
