龚兴国
- 作品数：88 被引量：620H指数：12
- 供职机构：浙江大学生命科学学院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- TBP-like Protein(TLP)通过G_2/M期阻滞抑制HeLa细胞的增殖被引量：1
- 2014年
- TBP-like protein(TLP)是真核细胞中一种常见的转录因子,在调节生长发育方面起着重要的作用。该实验构建重组质粒pEGFP-N1-TLP,研究TLP对人宫颈癌细胞HeLa增殖的影响。利用流式细胞仪检测质粒的转染效率,通过激光共聚焦显微镜观察外源TLP蛋白的亚细胞定位。经过MTT检测、RNAi-TLP诱导的基因沉默及Hoechst33258染色研究TLP对HeLa细胞的增殖抑制作用。流式细胞术、Western blot和RT-PCR实验结果表明,TLP将HeLa细胞周期阻滞于G2/M期,并抑制周期相关基因CDK1和CyclinB1的转录和翻译。研究表明,外源TLP在HeLa细胞的细胞核中表达,通过降低细胞周期相关基因CDK1和CDK1的表达水平,将HeLa细胞的细胞周期阻滞于G2/M期,从而抑制细胞的增殖。
- 王宏伟龚兴国
- 关键词：TLPHELA细胞CDK1CYCLINB1
- 内含子Ⅱ的作用机制和演化被引量：6
- 2003年
- 内含子是广泛存在于原核生物的叶绿体、线粒体以及真核生物基因组中的非编码DNA序列,但其含有的调控元件却常常影响基因的表达效率。内含子的自我剪接在mRNA的成熟过程中起着重要作用,内含子也可利用逆转录剪接作用插入到同源或异源DNA中,同时也常常通过“外显子改组”来促进基因进化。文章重点介绍了近年来在内含子Ⅱ作用机制及演化方面研究的最新进展。
- 于红龚兴国
- 猪脾血红素加氧酶的纯化和某些性质研究被引量：1
- 1993年
- 通过DEAE－纤维素层析，羟基磷灰石层析及Sepharose CL-6B层析，从猪脾中获得了纯的血红素加氧酶。纯化的酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS－聚丙烯酰胺电泳中均呈现单一条带。测得该酶分子量约为30500道尔顿，含272个氨基酸残基。氨基酸组成分析表明该酶中谷氨酸、谷氨酰胺含量丰富，而半胱氨酸和色氨酸含量低。在280nm处具有较低的消光系数（E1cm^1%=8.12)，而在406nm处具有强烈的光吸收。Triton×-100和EDTA对酶有稳定作用。
- 曾冬云龚兴国等
- 关键词：纯化猪脾谷氨酰胺消光系数光吸收
- 藻类多糖的提取分离方法
- 本发明公开的藻类多糖的提取分离方法是利用多糖、糖蛋白溶于水的特性，用水提法浸取，并用乙醇分级沉淀的方法分离，最后用阴离子交换柱，和凝胶排阻层析纯化多糖。本发明方法以一般藻类为原料，提取、纯化各种藻类的胞内、外多糖，并且可...
- 龚兴国曾冬云郭建军
- 文献传递
- 从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法
- 本发明公开的从红细胞中提取超氧化物歧化酶的方法，步骤包括动物新鲜血液抗凝处理后，离心收集红细胞，经溶血，热变性，丙酮分级沉淀，冻干得SOD粗品。粗品经离子交换层析和/或分子筛层析得SOD精品。本发明彻底摒弃了氯仿乙醇，只...
- 郦剑勇龚兴国曾冬云叶跃国
- 文献传递
- 从禽畜血中提取血红蛋白和超氧化物歧化酶的方法
- 本发明公开的从禽畜血中提取血红蛋白和超氧化物歧化酶的方法，步骤包括新鲜禽畜血抗凝处理后，离心收集血球，溶血后加热处理提取血红蛋白和SOD粗提液；SOD粗提液经热变性，超滤浓缩，丙酮分级沉淀和离子交换剂吸附处理获得SOD精...
- 龚兴国郦剑勇叶跃国曾冬云秦勇
- 文献传递
- 藻类多糖的提取分离方法
- 本发明公开的藻类多糖的提取分离方法是利用多糖、糖蛋白溶于水的特性，用水提法浸取，并用乙醇分级沉淀的方法分离，最后用阴离子交换柱，和凝胶排阻层析纯化多糖。本发明方法以一般藻类为原料，提取、纯化各种藻类的胞内、外多糖，并且可...
- 龚兴国曾冬云郭建军
- 文献传递
- 靶向抗肺癌SOD的构建与表达的方法
- 本发明公开了一种pET-SOD工程菌的构建及其表达纯化方法，本发明通过下述技术方案予以实现：设计引物从含念珠藻CHEN Fe-SOD的pET-SOD质粒中扩增获得Fe-SOD基因；设计引物从含ScFv的T-ScFv质粒扩...
- 龚兴国
- 文献传递
- 钝顶螺旋藻Fe-SOD基因的克隆及序列分析被引量：11
- 2004年
- 参照GenBank中Fe-SOD基因序列,根据SOD的保守区域设计引物,以钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)基因组DNA为模板,PCR扩增获得大小为528bp的片段.序列分析表明,其与集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)、念珠藻(NostoccommuneDRH1)等物种的Fe-SOD基因的同源性分别为75%、71%,且由该序列推导的氨基酸序列与集胞藻、念珠藻等种属的Fe-SOD相比,同源性为68%、67%.表明该片段为钝顶螺旋藻Fe-SOD基因的部分序列.
- 郭建军龚兴国鲁宇文卢敏
- 关键词：螺旋藻超氧化物歧化酶克隆
- 血红素加氧酶系的共固定化及部分性质研究
- 1998年
- 为了检测血红素加氧酶系分子间的相互作用和共固定化酶系的反应动力学，利用２′，５′－ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱对血红素加氧酶、ＮＡＤＰＨ－细胞色素ｃ还原酶和胆绿素还原酶进行非膜重组，再以纤维素为载体，用重氮化法固定此重组的酶复合物和共固定非重组的３种酶，发现固定化的重组酶系比非重组酶系能更好地发挥协同作用，在室温条件下可催化血红素一步合成胆红素．共固定化酶的最适ｐＨ为７．２，最适温度为３８℃，Ｋｍ值为０．９３μｍｏｌ／Ｌ．巯基试剂和金属卟淋对固定化酶有抑制作用，共固定化酶比游离酶系稳定性提高，３８℃下的操作半寿期可延长至４２０ｈ，在０～４℃保存两个月其酶活力无明显变化．
- 龚兴国曾冬云
- 关键词：血红素加氧酶共固定化
