丁楅森
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南京大学生命科学学院分子医学研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究被引量:2
- 2004年
- 将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI Sepharose亲和层析、SP Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95%以上,比活大于500000IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究.
- 朱镇华孙自勇陈于红张菁王石泉杨庆刘莉莉丁楅森陈新园刘建宁
- 关键词:发酵活化纯化蛋白
- 一种具有抗肿瘤活性的新型尿激酶原Kringle结构域变体蛋白的研究被引量:1
- 2004年
- 利用PCR技术获得人尿激酶原Kringle结构域基因,将其克隆至具有T7启动子的表达质粒pET29a中,并进而插入plasminogenKringle5一段16肽片段构建了其变体,重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达,其产物以包涵体形式存在.通过体外复性,得到可溶性的prourokinaseKringle及其变体.所得蛋白质经过动物肿瘤模型测活,确定变体蛋白具有抑制肿瘤生长作用.
- 曹中炜丁楅森陈新园周颖江王石泉张菁朱镇华陈于红刘建宁
- 关键词:抗肿瘤活性抑制疗法