于欢
- 作品数:5 被引量:25H指数:3
- 供职机构:北京大学第三医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 早发重度子痫前期、HELLP综合征及抗磷脂综合征对胎盘滋养细胞LCHAD基因甲基化的影响及其与基因mRNA表达相关性的研究被引量:16
- 2016年
- 目的探讨早发重度子痫前期、HELLP综合征及抗磷脂综合征(APS)对胎盘滋养细胞线粒体长链3.羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因甲基化程度的影响及其与基因mRNA表达的相关性。方法采集2013年1月至2015年3月在北京大学第三医院产前检查及住院治疗的病理妊娠孕妇的血清,其中早发重度子痫前期14例(子痫前期组)、HELLP综合征12例(HELLP组)及APS14例(APS组)为病理妊娠组,以正常妊娠的14例孕妇的血清为对照(对照组);原代绒毛滋养细胞来自于2014年3月至8月在北京大学第三医院自愿要求人工流产、胚胎正常、无妊娠合并症和并发症妇女40例的绒毛组织。在体外培养原代绒毛滋养细胞和永久性滋养细胞系HTR-8/Svneo细胞,分别加入相同浓度(10%)的4组孕妇的血清,孵育24h后收集各组滋养细胞。(1)采用在线生物信息学预测软件(MethPrimer软件)预测滋养细胞中LCHAD基因启动子区二核苷酸胞嘧啶(CpG)岛甲基化位点的数量及位置;(2)通过MassARRAY甲基化DNA定量分析平台检测4组滋养细胞中LCHAD基因启动子区各位点的甲基化程度;(3)采用实时荧光定量逆转录(RT)-PCR技术检测4组滋养细胞中LCHADmRNA的表达水平;(4)采用Pearson相关系数对4组滋养细胞中LCHAD基因启动子区各位点的甲基化程度与LCHADmRNA的表达水平进行相关性分析。结果因原代滋养细胞和HTR.8/Svneo细胞两种细胞的实验结果完全一致,故将两种细胞合并用“滋养细胞”表述。(1)滋养细胞中LCHAD基因启动子区目标CpG岛(长度558bp)中,含有17个胞嘧啶鸟嘌呤(cG)位点,获得其中11个(11/17)位点的甲基化程度,其位置分别为:-984、-960、-899、-853、-811、-796、-774、-727、-615、-595、-579位点,其中-899、-796及-774位点为复合位点(含有2个及以上CG序列),另外8个为单独位点(含有
- 孟然杨孜王海玲韩怡炜王雁玲于欢
- 关键词:HELLP综合征抗磷脂综合征滋养层
- 长链脂肪酸氧化酶在妊娠中期子痫前期样母鼠和胎鼠组织中的表达被引量:1
- 2015年
- 目的 探讨长链脂肪酸氧化酶LCHAD在妊娠中期子痫前期样改变母鼠和胎鼠组织中的蛋白表达及分布.方法 将C57BL/6J孕鼠于孕1id皮下注射一氧化氮合酶抑制剂建立子痫前期样模型,同时设立注射生理盐水的正常妊娠对照组,模型鉴定成功后,于孕14 d进行标本取材.采用免疫组化方法检测母鼠及胎鼠组织中LCHAD蛋白的分布和表达状况.结果 孕14 d实验组平均动脉压(115.6±3.3)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)和尿蛋白(97.0±4.3)μg·g体质量^-1·24h^-1较对照组平均动脉压(96.2±4.9)mmHg和尿蛋白(60.8 ±4.9) μg·g体质量^-1·24 h^-1显著升高(P<0.05).在两组动物中均可见到母鼠肝、肾、心、胎盘组织中LCHAD蛋白呈阳性表达,实验组母体肝、胎盘LCHAD的IA值强度较对照组明显降低(P<0.05).胎鼠的肝、肾、心、肺和神经视网膜组织中,两组均有LCHAD表达,但IA值差异无统计学意义(P>0.05).结论 妊娠中期LCHAD蛋白在母鼠和胎鼠重要器官均广泛表达分布,在妊娠期LCHAD与母体能量代谢、胎盘的发育及胎儿生长发育有关;子痫前期样改变时母体肝脏和胎盘的LCHAD表达存在异常.
- 韩怡炜杨孜丁晓燕于欢易雁鸿
- 关键词:先兆子痫
- 妊娠期特发性肝损害与脂肪酸氧化代谢障碍被引量:4
- 2015年
- 子痫前期、HELLP综合征(hemolysis,elevated liver enzymes,low platelets,HELLP)与妊娠期急性脂肪肝(acute fatty liver of pregnancy,AFLP)被看作为妊娠期特发性肝损害,另外还包括妊娠剧吐、妊娠期肝内胆汁淤积症等。这是一组特发于妊娠时期的具有肝损伤表现的疾病,表现为胆汁淤积性肝损害或肝细胞性肝损害。其中,子痫前期。
- 杨孜于欢韩怡炜
- 关键词:HELLP综合征AFLP脂肪酸氧化
- 不同途径建立的子痫前期模型孕鼠胎盘组织中LCHAD基因位点甲基化水平的差异性研究被引量:2
- 2015年
- 目的 通过检测不同诱发途径建立的子痫前期模型孕鼠胎盘组织中长链脂肪酸β氧化关键酶长链-3-羟酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因位点甲基化程度的差异,探讨多因素和多通路在子痫前期病理机制中的分子实验基础.方法 按不同途径建立子痫前期孕鼠模型并分组如下:(1)左硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组:给予孕鼠皮下注射L-NAME的方法建模;(2)脂多糖(LPS)组:给予孕鼠腹腔注射LPS的方法建模;(3)载脂蛋白C3(ApoC3)组:给予存在脂代谢障碍的孕鼠皮下注射L-NAME的方法建模型;(4)β2糖蛋白Ⅰ(β-2GPI)组:给予孕鼠皮下注射β-2GPI不完全弗氏佐剂的方法建模.根据建模时间对L-NAME组、LPS组及ApoC3组孕鼠于妊娠第3、11、16天分别定为胚胎植入前期、子痫前期早发期和晚发期3个不同实验阶段,β-2GPI组孕鼠仅有植入前期,对不同实验阶段的孕鼠胎盘LCHAD基因位点的甲基化水平进行检测.同时设生理盐水对照组,以及应用ApoC3高表达转基因孕鼠作为对照的转基因对照组.结果 (1)各组孕鼠LCHAD基因发生甲基化的位点:在LCHAD基因转录起始位点上游728 bp的范围内,共发现存在45个CG位点,其中LCHAD基因CG-5、12、13、14、15、16、19、24、25、27、28、29、30、31、32、34、35、43为含有2个及以上CG序列的复合位点,其他位点为仅含有1个CG序列的单一位点.L-NAME组、LPS组、ApoC3组和β-2GPI组孕鼠均有13个LCHAD基因位点发生甲基化改变,其中,LCHAD基因CG-3、5、6、11、13、14、18、28位点呈不同程度的高甲基化状态;LCHAD基因CG-16、25、31、42、44位点呈不同程度的低甲基化状态;其余32个位点无甲基化改变.(2)各组孕鼠胎盘LCHAD基因位点甲基化水平比较:L-NAME组、LPS组、ApoC3组、β-2GPI组和转基因对照组孕鼠胎盘LCHAD基因CG-3、11、13、14、18位点的甲基化水平显著高于生理盐水对照组,分别比较,差
- 韩怡炜杨孜丁晓燕于欢易雁鸿
- 关键词:先兆子痫胎盘
- 子痫前期HELLP和APS血清游离脂肪酸水平对滋养细胞脂质沉积影响的研究被引量:3
- 2014年
- 目的探讨子痫前期,HELLP综合征和抗磷脂综合征血清中游离脂肪酸水平对滋养细胞内脂质沉积的不同影响。方法采用早发型重度子痫前期(E-PE组)、重度子痫前期并发HELLP(PE-HELLP组)及抗磷脂综合征(APS组)的不同病理妊娠血清和正常妊娠孕妇(NC组)血清孵育体外原代培养人绒毛滋养细胞和细胞系HTR8/SVneo。ELISA法检测血清中CHO、TG和FFA含量;脂肪特殊染色检测细胞内脂滴沉积。结果E-PE组和APS组中血清FFA水平和滋养细胞内脂滴沉积均明显高于PE-HELLP组及NC组(P<0.05);PE-HELLP组中血清FFA水平和滋养细胞内脂滴沉积高于NC组(P<0.05)。血清游离脂肪酸水平与滋养细胞内脂质沉积量呈正相关(R=0.8669、0.8435、0.7734,P<0.05)。结论早发型重度子痫前期、HELLP和APS间存在不同程度的脂肪酸氧化代谢异常。
- 于欢杨孜丁晓燕王伽略王雁玲韩怡炜
- 关键词:子痫前期HELLPAPS脂肪酸氧化