于鑫
- 作品数：13 被引量：45H指数：4
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
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- 人肝癌细胞系HCCLM3中生长抑素受体亚型的表达研究被引量：3
- 2006年
- 目的检测人肝癌高转移细胞系生长抑素受体mRNA和蛋白的表达,探讨生长抑素对肝癌细胞株增殖的影响及其作用机制。方法应用免疫组化和RT-PCR的方法检测人肝癌细胞系中五种生长抑素受体亚型的表达,并进行半定量分析;应用MTT法检测8肽生长抑素对肿瘤细胞增殖的影响。结果肝癌细胞HCCLM3中存在SSTR1-5表达。生长抑素抑制肝癌细胞株HCCLM3的增殖并呈浓度依赖性,其作用可以被PTp抑制剂正钒酸钠所抑制;HCCLM3细胞表达5种生长抑素受体的mRNA和蛋白,表达强度由强到弱依次为SSTR2、SSTR1、SSTR4、SSTR3、SSTR5。SSTR2和 SSTR1的表达强度明显强于SSTR3、SSTR4、SSTR5(P<0．05),应用生长抑素后受体亚型SSTR2、 SSTR3、SSTR5 mRNA表达强度明显高于SSTR1、4 mRNA(P<0．05)。结论五种生长抑素受体亚型均存在于HCCLM3肝癌细胞系中,生长抑素可以明显抑制肝癌细胞的增殖。SSTR2 SSTR3、SSTR5和生长抑素结合后通过激活PTP抑制肿瘤细胞的生长和增殖。
- 钟朝辉李澍彭吉润朱继业冷希圣周迈焦岗军郭晏同黄迅魏玉华于鑫
- 关键词：MRNA
- 腺病毒介导反义Smad4基因大鼠体内转移对实验性肝纤维化的治疗作用被引量：3
- 2004年
- 徐新保何振平梁志清林凯魏玉华于鑫冷希圣
- 关键词：实验性肝纤维化ECM分泌金属蛋白酶信号传导通路
- 应用广谱抗体CK3-6H5检测细胞角蛋白在人类上皮组织来源的肿瘤细胞系中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的应用广谱抗细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)抗体CK3-6H5检测上皮组织来源的肿瘤细胞系中CK的表达,并研究应用此抗体检测血液循环中此类肿瘤细胞的敏感性。方法应用CK3-6H5标记QGY-7703等26种人类上皮组织来源的肿瘤细胞系、人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji、人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat以及健康志愿者外周血单个核细胞,通过免疫荧光显色和免疫细胞化学技术检测其中CK的表达情况;以表达CK的人肝癌细胞系QGY-7703作为靶细胞,以不同的比例分别掺入到健康志愿者PBMC中,以免疫磁珠去除CD45+的白细胞,对肿瘤细胞进行富集,流式细胞仪检测其中CK+CD45-肿瘤细胞数目,分析用CK3-6H5检测外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的敏感性。结果所有上皮组织来源肿瘤细胞系均表达CK,而健康志愿者和淋巴瘤细胞系Raji、T淋巴细胞白血病细胞株中未检测到CK表达。当向2×108个PBMC中掺入20个QGY-7703细胞时,经免疫磁珠富集后,行FACS分析,仍能检测到12个肿瘤细胞。结论CK3-6H5抗体复合物可以识别常见的上皮来源的肿瘤,应用CK3-6H5抗体标记肿瘤细胞,采用免疫磁珠富集技术以及流式细胞技术,可以用于有效检测外周血中上皮来源的肿瘤细胞。
- 于鑫魏玉华彭吉润郭立民赵丽君公磊王卉李澍冷希圣
- 关键词：循环肿瘤细胞细胞角蛋白流式细胞技术
- 多发性硬化抗原特异性CD4+CD25high调节性T细胞的体外扩增及其功能效应
- <正>目的针对多发性硬化(MS)患者CD4+CD25~(high)调节性T细胞(Treg)的免疫功能缺陷,尝试利用体外培养法获取功能正常的Treg。方法密度梯度离心法获得MS和健康对照外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁...
- 姜红刘广志杨亭亭何洋于鑫向亚娟敖冬慧高旭光
- 文献传递
- 反义Smad_4基因对贮脂细胞系CFSC生物学特性的影响被引量：11
- 2004年
- 目的 探讨通过反义Smad4基因转移阻断转化生长因子 β1(TGF β1)的信号传导后对贮脂细胞部分生物学特性的影响。方法 分别构建、重组了含有反义Smad4基因序列的复制缺陷型腺病毒表达载体AdvATSmad4和空病毒表达载体Adv0。将两种复制缺陷型腺病毒扩增纯化 ,再分别转入贮脂细胞系CFSC内 ,测定它们生长曲线、3 H掺入率 (3 H TdR)、脯氨酸掺入等部分生物学特性的变化 ,并用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、Western印迹和免疫组织化学等方法检测转基因细胞Smad4和细胞外基质的表达。结果 与正常对照组CFSC和转染Adv0的CFSC细胞相比较 ,转染AdvATSmad4的CFSC细胞内有反义Smad4表达 ,其生长曲线、3 H TdR、脯氨酸掺入等均有不同程度的降低 ,且其合成分泌Smad4和细胞外基质减少。结论 反义Smad4基因可以抑制贮脂细胞内源性Smad4的表达 ,抑制贮脂细胞的生长、繁殖和细胞外基质的产生 ,可作为抗肝纤维化基因治疗的选择之一。
- 徐新保冷希圣何振平梁志清林凯于鑫魏玉华
- 关键词：生物学特性转化生长因子Β1信号传导
- 生长抑素类似物奥曲肽对肝星状细胞结缔组织生长因子基因表达的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 研究生长抑素类似物奥曲肽 (OCT)对体外培养的大鼠肝星状细胞 (HSC)中结缔组织生长因子 (CTGF)基因表达的影响。方法 从SpragueDawley大鼠的肝脏中分离培养HSC ,待其自发激活增殖及传代后 ,将其分为 5组 ,其中 4组加入不同浓度的OCT ,余 1组为不加OCT的对照组 ,培养 72h ,RT PCR法检测各组细胞CTGF及转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA表达的情况。结果OCT能够明显抑制CTGF及TGF β1mRNA的表达。在一定浓度范围内呈剂量依赖性。 结论 OCT能够抑制激活的HSC中CTGF和TGF β1基因的表达 ,由此发挥其抗纤维化作用 ,为临床抗纤维化治疗提供新的思路。
- 宋盛晗冷希圣李涛彭吉润赵力秦致中魏玉华于鑫
- 关键词：生长抑素类似物奥曲肽肝星状细胞结缔组织基因表达
- 大鼠肝星状细胞中生长抑素受体表达的研究被引量：8
- 2005年
- 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝星状细胞(HSC)中5个生长抑素受体(SSTR)亚型的表达情况,从侧面探索生长抑素影响肝纤维化的作用机制.
- 宋盛晗冷希圣李涛彭吉润秦致中赵力魏玉华于鑫
- 关键词：生长抑素受体肝星状细胞鼠肝HSC活细胞共聚焦显微镜
- 流式细胞术在非造血系统肿瘤骨髓侵犯检测中的价值被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨流式细胞术在识别CK阳性和阴性非造血系统肿瘤骨髓侵犯中的价值。方法 选取代表10种常见人类上皮来源肿瘤的26个细胞系和1种人淋巴瘤细胞系、1种T淋巴母细胞白血病细胞系，均购自美国标准生物品收藏中心。选择2009年7月至2010年6月北京市道培医院5份非造血系统肿瘤患者、15份血液系统肿瘤患者、15份移植后骨髓恢复正常的对照组患者骨髓标本。复苏冻存的各细胞系，传代培养至细胞进入对数生长期。破膜后使用胞浆CK—FITC抗体做荧光标记，进行四色流式细胞术检测，分析肿瘤细胞CK表达率。骨髓标本按照我室常规四色直接免疫荧光标记法做胞膜和胞浆染色，通过系别标志和幼稚细胞标志，以及CK表达情况，根据2008年世界卫生组织诊断标准做出相应诊断或者排除造血系统肿瘤。结果 所有上皮来源的肿瘤细胞系均不同程度表达CK，平均CK表达率为81．1％，而淋巴系统肿瘤细胞系均不表达CK。2例上皮来源肿瘤均表达CK，其中1例甲状腺癌病例CK表达率为100．0％，1例肺癌病例CK表达率为98．2％。血液系统肿瘤和对照组骨髓标本均不表达CK，分别表达相应的血液学标志：如CD45，和系别标志，或者CD138和胞浆轻链。3份非上皮来源的非造血系统肿瘤骨髓标本均不表达CK。CK阳性或阴性的非造血系统肿瘤不表达造血细胞标志：如CD45、HLA—ABC、HLA—DRDPDQ，不表达特异性系别标志。而CK阳性可能有助于提示上皮来源肿瘤的诊断。结论 使用流式细胞术检测造血细胞标志和CK可以有效排除CD45，阴性的造血系统肿瘤，检测CK阳性和阴性非造血系统肿瘤骨髓侵犯。
- 王卉于鑫彭吉润童春容伍平李燕燕康蕊孙慧鹏
- 关键词：骨髓肿瘤肿瘤侵润流式细胞术
- 多发性硬化抗原特异性CD4^+CD25^+调节性T细胞的体外扩增及其功能效应被引量：2
- 2014年
- 目的针对多发性硬化(MS)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的免疫功能缺陷,尝试利用体外培养法获取功能正常的Treg。方法密度梯度离心法获得MS患者(n=5)和健康对照者(n=5)外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠法分选B细胞和CD4+CD25-初始T细胞,前者进一步经可溶性CD40配体(sCD40L)刺激活化后作为抗原提呈细胞(APC),与后者混合体外共培养,并以髓鞘碱性蛋白(MBP)85-99等刺激后收获细胞;经流式细胞仪分选获得CD4+CD25highCD127low Treg。通过增殖分析鉴定所获Treg的免疫抑制功能。结果磁珠法分选B细胞、初始T细胞的纯化率分别达到90%和80.62%。体外诱导扩增所获的MBP反应性Treg比例为3.5%~6%,MS组与健康对照组Treg比较抑制功能活性无明显差异。结论经此方法可扩增获得免疫功能正常的Treg细胞,进而为今后开展MS的特异性免疫调节治疗提供客观的依据。
- 姜红刘广志杨亭亭何洋于鑫向雅娟高旭光
- 关键词：多发性硬化体外培养
- 蛋白激酶激活受体-2在人类结直肠癌中表达的研究被引量：2
- 2007年
- 目的 研究蛋白酶激活受体-2（PAR-2）在结直肠癌中的蛋白表达和mRNA表达的水平,并探讨其临床价值.方法 采用免疫组织化学法、免疫荧光分析法和实时荧光定量PCR的方法,检测38例结直肠肿瘤患者的正常肠黏膜组织、癌旁组织和癌组织PAR-2的蛋白和mRNA的表达情况.结果 （1）PAR-2在结直肠正常肠黏膜、癌旁组织和癌组织中表达阳性率分别为25%、45%和85%;（2）PAR-2的表达强度的IOD值由弱到强依次为正常肠组织（681±101）、癌旁组织（6627±971）和癌组织（15861±2709）,三组间经方差分析差异有统计学意义（F=132.6,P＜0.05）;（3）PAR-2 mRNA在正常肠组织、癌旁组织和癌组织的表达水平分别为1.57±0.69、2.91±1.4和4.09±1.99,三组间的差异有统计学意义（F=9.688,P=0.00）;结论 PAR-2的表达在结直肠肿瘤中高表达;PAR-2的表达和结直肠肿瘤的发生和发展密切相关.
- 钟朝辉焦岗军杨燊彭吉润于鑫董建强阎征潘秀英程西奎卢军黄迅
- 关键词：结直肠肿瘤受体PAR-2
