伍祥龙
- 作品数:14 被引量:17H指数:2
- 供职机构:贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金:贵州省自然科学基金博士科研启动基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪支气管败血波氏杆菌FlaA基因克隆与序列分析
- 2008年
- 参考相关资料,针对支气管败血波氏杆菌Bordetella bronchiseptica FlaA基因上游序列选择合成1对特异性引物,对贵州分离株(B8株和B27株)进行PCR扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体上,并转化到DI-L5a感受态细胞中,提取重组质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序。结果获得分子长为237bp的特异性DNA片段;核苷酸同源性分析表明,贵州分离株间的同源性高达99.1%,与Bb参考株的同源性为97.8%~99.6%,与Bpp参考株的同源性为95.6%-97.4%;系统进化树分析表明,贵州分离株与Bb参考株亲缘关系较近,而与Bpp参考株亲缘关系远。
- 袁翠霞伍祥龙唐源文明周碧君汪德生
- 关键词:支气管败血波氏杆菌基因克隆
- 斗鸡新城疫病毒DQ株融合蛋白基因序列分析
- 2007年
- 从越南斗鸡暴发的病例中分离出1株新城疫病毒(NDV),命名为贵州分离株(DQ)。采用RT—PCR方法扩增分离株(DQ)的整个F基因片段,并将其克隆到pMD-18T载体中。序列分析结果表明,DQ株F基因分子长为1662bp,编码553个氨基酸。该毒株与国内2株分离株(CH2000、TW2000)之间的亲缘关系较近,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95.7%-96.6%和96.6%-96.8%;但与LaSota、B1及1748E9等常见毒株的核苷酸和氨基酸同源性仅为84.0%-86.5%和87.2%-89.9%。DQ分离株在F蛋白裂解住点的氨基酸顺序为^112R—R—Q—K—R—F^117,与NDV强毒株特征相符,且具有101处的K(赖氨酸)和121处V(缬氨酸)2个特征性氨基酸,与NDV基因Ⅶ型的特性完全相符。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树表明该分离株为基因Ⅶd亚型。
- 伍祥龙伍明山何骞岳筠文明
- 关键词:斗鸡新城疫病毒
- 新城疫病毒贵州分离株F基因的克隆和序列分析被引量:1
- 2008年
- 根据GenBank中登录的新城疫病毒(NDV)F基因序列设计了一对引物,用RT-PCR方法扩增了8个NDV贵州分离株的F基因片段,并将其分别克隆到pMD-18T载体中。序列分析结果表明,上述分离株F基因长度为1662bp,编码553个氨基酸,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为84.0%~99.7%和87.5%~99.3%,但与LaSota、B1及F48E9等常见毒株的氨基酸同源性为87.2%~97.7%。F蛋白裂解位点的氨基酸序列分别为112R-R-Q-R/K-R-F117(其中P1、H2、N98、DQ、FW、BY、GZ7株为强毒)和112G-R-Q-G-R-L117(TN1株为弱毒)。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树,结果表明,4个分离株(P1、H2、、N98、DQ)为基因Ⅶ型,2株(GZ、TN)为基因Ⅱ型,2株(FW、BY)为基因Ⅸ型。
- 伍祥龙温贵兰袁翠霞周碧君文明李永明
- 关键词:新城疫病毒F基因克隆
- 贵州省新城疫分子流行病学研究
- 2010年
- 应用PCR技术对贵州省不同时期NDV分离株包括肉鸡源P1株与BY株、蛋鸡源H2株与FW株、七彩山鸡源N98株、越南斗鸡源DQ株、鸵鸟源TN株及鸽源GZ株进行F蛋白基因的扩增,并分别进行克隆和测序,然后与国内外NDV参考毒株的对应序列进行比较分析。结果表明:8株贵州省NDV分离株的F基因长度均为1 662 bp,可编码553个氨基酸;贵州省NDV分离株间的核苷酸同源性为84.0%~99.7%,氨基酸同源性为87.5%~99.3%;与国内外NDV参考毒株(La Sota株、B1株、F48E9株、CH2000株和TW2000株)的核苷酸同源性为84.2%~98.9%,氨基酸同源性为87.2%~98.6%;经系统发育进化树分析,DQ株、N98株、P1株和H2株为基因Ⅶ型(均为Ⅶd亚型),而BY株和FW株为基因Ⅸ型,GZ株和TN株为基因Ⅱ型。这些结果提示贵州省不同禽类间存在相同NDV毒株感染的可能性,不同时期NDV分离株发生了基因型改变,且近年来贵州省流行的新城疫(ND)疫情主要是由基因Ⅶ型NDV引起。
- 杨忠成周碧君文明殷俊磊伍祥龙温贵兰
- 关键词:F基因基因型
- 贵州省新城疫分子流行病学研究被引量:1
- 2010年
- 应用RT-PCR技术对贵州省不同时期不同禽源NDV分离株(肉鸡源P1株与BY株、蛋鸡源H2株与FW株、七彩山鸡源N98株、越南斗鸡源DQ株、鸵鸟源TN株及鸽源GZ株)F蛋白基因进行扩增、克隆和测序分析,结果表明:8株NDV贵州分离株F基因长度均为1 662 bp,可编码553个氨基酸;NDV贵州分离株间核苷酸同源性为84.0%-99.7%,氨基酸同源性为87.5%-99.3%;与国内外NDV参考毒株(LaSota株、B1株、F48E9株、CH2 000株和TW2 000株)的核苷酸同源性为84.2%-98.9%,氨基酸同源性为87.2%-98.6%;GZ株和TN株为基因II型,DQ株、N98株、P1株和H2株为基因VII型(均为VIId亚型),BY株和FW株为基因IX型。表明,不同时期NDV贵州分离株的基因型不同,近年流行的ND疫情主要是由基因VII型NDV引起,与国内其他省市ND流行趋势基本一致。
- 高颖殷俊磊伍祥龙周碧君文明温贵兰
- 关键词:新城疫病毒F基因基因型
- 新城疫病毒贵州不同鸡源分离株F基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2008年
- 应用PCR技术扩增NDV贵州不同鸡源分离株,包括肉鸡源P1株与BY株、蛋鸡源H2株与FW株、七彩山鸡源N98株和越南斗鸡源DQ株的F蛋白基因,将该基因片段分别进行克隆和测序,并与国内外NDV参考株的对应序列进行比较分析。结果表明:6株NDV贵州不同鸡源分离株的F基因长度均为1 662 bp,编码553个氨基酸;分离株间核苷酸同源性为86.9%~99.7%,氨基酸同源性为91.0%~99.3%;与国内外NDV代表株(LaSota株、B1株、F48E9株、CH2000株和TW 2000株)的核苷酸同源性为84.0%~98.9%,氨基酸同源性为87.2%~98.6%;经系统发育进化树分析,DQ株、N98株、P1株和H2株为基因VIId型,而BY株和FW株为基因IX型。这些结果提示贵州省不同鸡群间存在相同NDV毒株感染的可能性,不同年份间NDV毒株发生基因型改变,而近年来贵州省流行的ND疫情主要是由NDV基因VII型引起。
- 汪德生伍祥龙文明周碧君王文亮温贵兰
- 关键词:新城疫病毒F基因基因型
- 1株越南斗鸡新城疫病毒的分离和分子鉴定
- 2008年
- 从一起新城疫暴发的病例中分离出1株新城疫病毒(NDV),命名为贵州分离株(DQ)。用RT—PCR方法扩增了贵州分离株的整个F基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体中。序列分析结果表明,上述分离株F基因长度为1662bp,编码553个氨基酸。该毒株与国内2株分离株(CH2000、TW2000)之间的亲缘关系较近,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95.7%~96.6%和96.6%~96.8%;但与LaSota、B1及F48E9等常见毒株的核苷酸和氨基酸同源性仅为84.0%~86.5%和87.2%~89.9%。DQ分离株在F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为^112R—R—Q_K—R—F^117,与NDV强毒株特征相符,且具有101处的K(赖氨酸)和121处V(缬氨酸)2个特征性氨基酸,与NDV基因Ⅶ型的特性完全相符。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树,结果表明,该分离株为基因Ⅶd亚型。
- 伍祥龙伍明山何骞文明李永明
- 关键词:新城疫病毒分子鉴定
- 贵州新城疫分子流行病学调查及荧光RT-PCR方法的检测
- 新城疫/(Newcastle Disease,ND/)是由新城疫病毒/(Newcastle Disease Virus,NDV/)引起的极易传染的毁灭性疾病。NDV属于副粘病毒科,副粘病毒亚科,腮腺炎病毒属。由于该病发病...
- 伍祥龙
- 关键词:新城疫分子流行病学调查荧光RT-PCR
- 文献传递
- 一例鸡绿脓杆菌病病原的分离与鉴定被引量:2
- 2007年
- 2006年4月,贵阳市某养殖场4 300只的雏鸡2日龄开始发病,发病率10%(430/4300);其中死亡190只,病死率44%(190/430).病雏主要表现精神沉郁,食欲减退,卧地、呆立、不喜运动.4日龄后死亡停止,无不良后遗症,整个鸡群呈健康状态.……
- 袁翠霞袁翠连徐景峨伍祥龙文明
- 关键词:绿脓杆菌病动物细菌病马立克氏病疫苗皮下水肿
- 雏鸡体内新城疫病毒强毒的荧光定量RT-PCR检测被引量:2
- 2009年
- 将新城疫病毒(NDV)强毒H2株经滴鼻感染和同居感染18日龄雏鸡,应用建立的荧光定量RT-PCR检测病毒在雏鸡体内各组织的动态分布。结果显示,滴鼻感染后第6 h,即可在肺、脑、脾、肾和肠5种组织中检出NDV RNA,而12 h后所有组织均能检测到;同居感染12 h后才可在肺、脑、脾和肾4种组织中检出,而24 h后所有组织均能检测到;在上述2种感染途径中,受检组织内的病毒含量从高到低依次为:肺、脑、脾、肾、肠、肝、心脏和腿肌。与普通RT-PCR相比,检测灵敏度相近。
- 殷俊磊伍祥龙伍明山文明周碧君温贵兰
- 关键词:荧光定量RT-PCR新城疫病毒雏鸡