侯小君
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 旋毛虫病斑点免疫金渗滤法诊断试剂盒
- 本发明公开了一种旋毛虫病斑点免疫金渗滤法诊断试剂盒，它采用金标-SPA为抗体标记标签，通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导pMAL-c2X-Ts21/TB1重组菌、表达并纯化了旋毛虫Ts21基因编码蛋白(Ts21抗原基因...
- 崔晶王中全侯小君姜鹏王烨王来王睿逯丽秦银霞
- 文献传递
- 纳氏旋毛虫肌幼虫细胞的体外培养及多重PCR鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的研究纳氏旋毛虫（Trichinella nelsoni，T7）肌幼虫细胞的分离和体外培养方法。方法消化法分离纳氏旋毛虫肌幼虫，用研磨法分离其细胞，倒置相差显微镜下观察分离细胞的形态并测量细胞核与细胞直径。用含10％胎牛血清的RPMI1640培养液进行细胞培养，并通过多重PCR对培养的细胞进行鉴定。结果纳氏旋毛虫肌幼虫细胞平均直径为11．72±1．13μm，细胞核平均直径为5．76±0．68μm。细胞在接种于培养液后24～72h开始贴壁生长，培养8～12d后单层细胞形成，贴壁细胞多为发亮、饱满、圆形细胞。对培养14d的细胞进行多重PCR分析，结果与纳氏旋毛虫肌幼虫具有相同的DNA条带。结论纳氏旋毛虫肌幼虫细胞在含10％胎牛血清的RPMI1640培养液中至少可存活20d。
- 李宛青崔晶赵桂花牛洪涛侯小君逯莉张西臣王中全
- 关键词：肌幼虫细胞培养多重PCR
- Ts21重组蛋白斑点免疫金渗滤法检测旋毛虫抗体的研究被引量：4
- 2008年
- 目的应用旋毛虫Ts21基因重组蛋白建立诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA、旋毛虫Ts21重组蛋白与肌幼虫排泄-分泌(excretory-secretory,ES)抗原包被硝酸纤维素膜(NCM),分别建立Ts21重组蛋白-斑点免疫金渗滤法(Ts21-dot immunogold-filtration assay,Ts21-DIGFA)与ES-DIGFA,对旋毛虫病及其他寄生虫病患者血清和感染动物血清进行检测,并与ELISA检测结果进行比较。结果Ts21-DIGFA检测旋毛虫病患者血清抗体的敏感性和特异性分别为94.73%和86.96%,ES-DIGFA的敏感性和特异性分别为89.47%和86.96%,差异无统计学意义(χ2敏感=0.368,χ2特异=0,P>0.05);Ts21-ELISA的敏感性和特异性分别为94.73%和94.20%,与Ts21-DIGFA相比差异无统计学意义(χ2敏感=0,χ2特异=1.272,P>0.05)。Ts21-DIGFA检测旋毛虫感染猪血清的敏感性和特异性分别为88.89%和100%,ES-DIGFA的敏感性和特异性分别为94.44%和95.00%,差异均无统计学意义(χ2敏感=0,χ2特异=0,P>0.05)。小鼠感染300条旋毛虫后4周Ts21-DIGFA的血清抗体检出率为100%(10/10);感染10条及5条旋毛虫后6周血清抗体检出率均为100%(10/10)。DIGFA可在3 min内肉眼观察结果,抗原包被后的NCM和金标SPA在4℃至少保存6个月。结论Ts21-DIGFA检测旋毛虫抗体具有较高的敏感性和特异性及良好的稳定性和重复性,可用于旋毛虫病的血清学诊断及血清流行病学调查。
- 侯小君王中全崔晶秦银霞王睿
- 关键词：旋毛虫斑点免疫金渗滤法重组蛋白ELISA
- 旋毛虫肌幼虫细胞传代培养及超微结构观察被引量：2
- 2007年
- 消化、分离观察旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫,获得肌幼虫细胞,用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养原代细胞,胰酶(含0.02%EDTA)消化法进行传代,透射电镜观察培养细胞超微结构,用多重PCR鉴定培养细胞。结果表明,在培养24～72h原代细胞开始贴壁,7～8d形成单层细胞,细胞间融合现象不明显,10～12d传一代。透射电镜显示旋毛虫细胞核为椭圆形,核膜、核仁清晰,核内染色质较丰富,胞浆含丰富的线粒体。细胞主要有两种类型:椭圆形和多角形,以椭圆形为主。多重PCR扩增培养细胞DNA,可见1条与旋毛虫肌幼虫DNA扩增产物相同的条带(173bp)。结果表明,旋毛虫肌幼虫细胞可在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中传代培养。
- 李宛青王中全王睿侯小君赵桂花崔晶
- 关键词：旋毛虫肌幼虫超微结构多重PCR
